【摘要】：[目的]通過不同時間窗對比行為學(xué)和組織學(xué)檢測結(jié)果,研究免疫炎性反應(yīng)在小鼠急性脊髓損傷及損傷后修復(fù)過程中的神經(jīng)保護(hù)或毒性作用。為探索通過不同時間點(diǎn)干預(yù)免疫反應(yīng)過程來治療脊髓損傷的治療策略提供更有利的理論依據(jù)。[方法]1、A組轉(zhuǎn)基因型小鼠和B組野生型小鼠各24只。2、使用紐約大學(xué)脊髓撞擊儀撞擊小鼠T9節(jié)段脊髓,建立脊髓損傷模型。3、小鼠脊髓損傷后取1w、2w、4w三個時間點(diǎn),每批次隨機(jī)取A組、B組各8只,用BMS評分評估小鼠后肢運(yùn)動功能恢復(fù)情況,并取以損傷節(jié)段為中心共1.0cm脊髓。4、采用GFAP免疫組化染色檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞激活形態(tài)及在脊髓損傷區(qū)的分布；采用Ibal染色法檢測小膠質(zhì)細(xì)胞激活形態(tài)及分布情況；采用Nissl染色評估神經(jīng)細(xì)胞功能情況：觀察神經(jīng)元內(nèi)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化(尼氏體形態(tài)的變化,細(xì)胞核形態(tài),樹突和軸突的變化)；用ChAT標(biāo)記脊髓運(yùn)動神經(jīng)元在脊髓損傷區(qū)的存活情況。5、用spss13.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。[結(jié)果]通過小鼠脊髓損傷模型,我們觀察到SCI后第三天開始兩組小鼠后肢運(yùn)動功能逐漸恢復(fù),第5天時,轉(zhuǎn)基因型小鼠BMS評分均數(shù)3.625,而野生型小鼠BMS評分均數(shù)為1.5(P0.01,n=8),顯示具有顯著差異性,至第一周時,轉(zhuǎn)基因型小鼠BMS評分均數(shù)5.40625,而野生型小鼠BMS評分均數(shù)為2.8125(P0.001,n=8),顯示具有高度顯著差異性。提示在SCI后第一周內(nèi),轉(zhuǎn)基因型小鼠功能恢復(fù)情況明顯優(yōu)于同時間點(diǎn)的野生型小鼠。而第一周后,轉(zhuǎn)基因型小鼠恢復(fù)速度趨于平緩,野生型小鼠恢復(fù)速度在第一至第三周間迅速提升,至第三周時已優(yōu)于轉(zhuǎn)基因型小鼠(BMS評分：野生型mean=6.625,轉(zhuǎn)基因型mean=5.71875,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義)。提示第一周至第二周,免疫炎性反應(yīng)開始往有利于脊髓損傷修復(fù)的方向發(fā)展。我們選取行為學(xué)有高度顯著差異性的SCI后1w觀察,通過免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞在野生型小鼠脊髓損傷區(qū)活化增殖明顯,胞體增大,細(xì)胞排列稠密,突起增長增粗。而轉(zhuǎn)基因型小鼠的星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞輕度活化,胞體較小,排列稀疏,突起少而細(xì),同時期的尼氏染色和chat染色顯示,野生型小鼠殘存神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目少,基于以上結(jié)果,我們認(rèn)識到SCI早期可能以有害的免疫反應(yīng)為主,而隨后的免疫炎性反應(yīng)可能具有神經(jīng)保護(hù)作用。[結(jié)論]1、SCI早期過度激活的免疫炎癥反應(yīng)具有神經(jīng)毒性作用,妨礙了神經(jīng)功能的恢復(fù)。2、SCI后期免疫炎性反應(yīng)開始往有利于脊髓損傷修復(fù)的方向發(fā)展。3、通過不同時間點(diǎn)干預(yù)免疫反應(yīng)過程有可能成為脊髓損傷治療的一個新方向。
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R651.2
【圖文】：

質(zhì)組成致密的膠質(zhì)瘢痕，早期有助于限制炎癥細(xì)胞擴(kuò)散、隔絕損傷區(qū)刺激減發(fā)性神經(jīng)損害、維持局部微環(huán)境穩(wěn)定，后期卻又成為抑制軸突生長的物理屏示意圖 1)。有研究通過硫酸軟骨素酶 ABC 消除和削弱 CSPG 的抑制作用來膠質(zhì)瘢痕來治療脊髓損傷[21]。

活化的小膠質(zhì)細(xì)胞對炎癥反應(yīng)的影響（摘自YoungjeonLee，Sang-RaeLee，etal.2014）

[44]。這暗示我們應(yīng)該重新審視中性粒細(xì)胞在 SCI 中有害/有利的兩面性。示意圖3 中性粒細(xì)胞在脊髓損傷后的活化 (摘自 Apostolia Tzekou and MichaelG. Fehlings.2014)單核巨噬細(xì)胞SCI 后 2-3 天可以在損傷區(qū)觀察到單核細(xì)胞，7 天左右達(dá)到高峰并隨后逐漸減少，直至 14 天時降到最低，隨后計數(shù)又緩慢增高，在傷后 60 天達(dá)到第二個高峰并維持到 180 天左右[37]。進(jìn)入損傷區(qū)后單核細(xì)胞很快分化為巨噬細(xì)胞，能有效的吞噬、清除損傷區(qū)組織碎片[45, 46]，能分泌細(xì)胞活素類成分和生長因子保護(hù)神經(jīng)元、促進(jìn)髓鞘再生和周圍血管重建[47-50]，但同時又產(chǎn)生大量活性氧自由基、一氧化氮和蛋白水解酶等，破壞鄰近區(qū)域正常組織，加重組織損傷[51]。根據(jù)功能的不同

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 Zhourui Wu;Ziru Zhao;Yan Yu;Xiao Hu;Wei Xu;Zhili Zeng;Yi Eve Sun;Liming Cheng;;New strategies for the repair of spinal cord injury[J];Chinese Science Bulletin;2014年31期

2 田園;丁壯;岳玉環(huán);;干擾素γ生物學(xué)功能及其應(yīng)用的研究進(jìn)展[J];中國生物制品學(xué)雜志;2010年10期

3 Xiang Zhou;Xijing He;Yi Ren;;Function of microglia and macrophages in secondary damage after spinal cord injury[J];Neural Regeneration Research;2014年20期

4 Priyanka L.Singh;Nitin Agarwal;James C.Barrese;Robert F.Heary;;Current therapeutic strategies for inflammation following traumatic spinal cord injury[J];Neural Regeneration Research;2012年23期

5 張驚宇;李國忠;孫博;曹京燕;王廣友;馬珊珊;王曙辰;李呼倫;金連弘;;大鼠腦缺血后IFN-γ mRNA的表達(dá)[J];中國免疫學(xué)雜志;2006年06期

6 孫湘蘭;許燕;龔愛華;劉錦波;崔顏紅;王穆彬;谷曉楚;張志堅(jiān);;IL-10在脊髓損傷SD大鼠脊髓神經(jīng)組織中的表達(dá)及其動態(tài)變化[J];中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2008年24期

7 張建祥;胡薇薇;陳忠;;對膠質(zhì)疤痕所致神經(jīng)再生障礙的治療進(jìn)展[J];浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2009年06期

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1 楊剛;唐文淵;鐘東;晏怡;;IL-6在大鼠脊髓損傷后再生中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

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1 吳世強(qiáng);β-干擾素對大鼠急性脊髓損傷后炎癥反應(yīng)及神經(jīng)功能恢復(fù)的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

2 王慧;不同免疫狀態(tài)對小鼠脊髓損傷后修復(fù)的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

3 李茂;IL-23在大鼠脊髓損傷中的表達(dá)[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2013年

本文編號：2745114