大鼠脊髓損傷后TSP1與NL1表達變化的實驗研究
發(fā)布時間:2020-03-30 21:19
【摘要】:目的探究大鼠脊髓損傷后TSP1與NL1的表達變化及其對突觸再生的影響。方法90只SPF級成年健康雌性SD大鼠隨機等分為假手術(shù)組(n=45)和實驗組(n=45),再分別將兩組大鼠隨機等分為3d、7d、14d、21d和28d 5個亞組,假手術(shù)組僅行第九胸椎~第十一胸椎(T_9~T_(11))椎板切除術(shù),實驗組在行T_9~T_(11)椎板切除術(shù)后,用Allen打擊儀打擊T_(10)脊髓。于術(shù)后相應(yīng)時間點依照BBB評分方法評估實驗組和假手術(shù)組大鼠后肢運動功能并進行比較,對造模失敗的予以剔除并及時補缺;Golgi-Cox染色觀察損傷中心上端脊髓白質(zhì)中樹突及樹突棘的變化;免疫熒光染色及Western blot蛋白免疫印跡檢測TSP1與NL1在大鼠脊髓損傷后3d、7d、14d、21d及28d時的表達,并對熒光染色結(jié)果和Western blot結(jié)果用ImageJ 1.50i圖像分析軟件和Graphpad Prism 6軟件進行處理,分別測量和分析平均光密度值和相對灰度值。結(jié)果1.實驗組大鼠各時間點BBB評分結(jié)果均低于假手術(shù)組(n=6,P0.001)。2.與假手術(shù)組相比,實驗組脊髓白質(zhì)中樹突在損傷后隨時間而逐漸減少,樹突棘密度也逐漸降低(n=6,P0.001)。3.免疫熒光染色及平均光密度值分析結(jié)果顯示,與假手術(shù)組相比,脊髓損傷后3天TSP1表達既開始升高,后繼續(xù)升高,至14天時有所降低,21d時又升高,28d時又降低;與假手術(shù)組相比,NL1免疫熒光染色及平均光密度值分析結(jié)果顯示,與假手術(shù)組相比,損傷3d后NL1表達開始升高,7d后繼續(xù)升高,至損傷后14d時達到峰值,21d后NL1表達開始降低,至損傷后28天時已降低至接近假手術(shù)組。4.Western blot結(jié)果及相對灰度值分析結(jié)果與免疫熒光染色及平均光密度值分析結(jié)果基本一致,即TSP1于脊髓損傷后3d表達開始升高,7d時繼續(xù)升高,14d時表達有所下降,但21d時表達又升高,28d時又降低;NL1表達于損傷后3d開始升高,至損傷14d時達到峰值,后開始下降。結(jié)論TSP1和NL1的表達在脊髓損傷后28d內(nèi)自發(fā)性升高,但還不足以誘導(dǎo)突觸再生。
【圖文】:
士學(xué)位論文 大鼠脊髓損傷后 TSP1 與 NL1 表達變化的實驗表 1 各組大鼠 BBB 評分結(jié)果假手術(shù)組 n=6 實驗組 n=6 x±s x±s20.333±0.471 0.667±0.74520.833±0.373 2.677±0.74521.000±0.000 6.167±0.68721.000±0.000 9.000±0.70721.000±0.000 12.333±0.849
假手術(shù)組及實驗各組Golgi-Cox染色(樹突)
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R651.2
本文編號:2608079
【圖文】:
士學(xué)位論文 大鼠脊髓損傷后 TSP1 與 NL1 表達變化的實驗表 1 各組大鼠 BBB 評分結(jié)果假手術(shù)組 n=6 實驗組 n=6 x±s x±s20.333±0.471 0.667±0.74520.833±0.373 2.677±0.74521.000±0.000 6.167±0.68721.000±0.000 9.000±0.70721.000±0.000 12.333±0.849
假手術(shù)組及實驗各組Golgi-Cox染色(樹突)
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R651.2
【參考文獻】
相關(guān)期刊論文 前1條
1 Yi-Min Yuan;Cheng He;;The glial scar in spinal cord injury and repair[J];Neuroscience Bulletin;2013年04期
,本文編號:2608079
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