大鼠脊髓損傷后TSP1與NL1表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2020-03-30 21:19
【摘要】:目的探究大鼠脊髓損傷后TSP1與NL1的表達(dá)變化及其對(duì)突觸再生的影響。方法90只SPF級(jí)成年健康雌性SD大鼠隨機(jī)等分為假手術(shù)組(n=45)和實(shí)驗(yàn)組(n=45),再分別將兩組大鼠隨機(jī)等分為3d、7d、14d、21d和28d 5個(gè)亞組,假手術(shù)組僅行第九胸椎~第十一胸椎(T_9~T_(11))椎板切除術(shù),實(shí)驗(yàn)組在行T_9~T_(11)椎板切除術(shù)后,用Allen打擊儀打擊T_(10)脊髓。于術(shù)后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)依照BBB評(píng)分方法評(píng)估實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)組大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能并進(jìn)行比較,對(duì)造模失敗的予以剔除并及時(shí)補(bǔ)缺;Golgi-Cox染色觀察損傷中心上端脊髓白質(zhì)中樹突及樹突棘的變化;免疫熒光染色及Western blot蛋白免疫印跡檢測(cè)TSP1與NL1在大鼠脊髓損傷后3d、7d、14d、21d及28d時(shí)的表達(dá),并對(duì)熒光染色結(jié)果和Western blot結(jié)果用ImageJ 1.50i圖像分析軟件和Graphpad Prism 6軟件進(jìn)行處理,分別測(cè)量和分析平均光密度值和相對(duì)灰度值。結(jié)果1.實(shí)驗(yàn)組大鼠各時(shí)間點(diǎn)BBB評(píng)分結(jié)果均低于假手術(shù)組(n=6,P0.001)。2.與假手術(shù)組相比,實(shí)驗(yàn)組脊髓白質(zhì)中樹突在損傷后隨時(shí)間而逐漸減少,樹突棘密度也逐漸降低(n=6,P0.001)。3.免疫熒光染色及平均光密度值分析結(jié)果顯示,與假手術(shù)組相比,脊髓損傷后3天TSP1表達(dá)既開始升高,后繼續(xù)升高,至14天時(shí)有所降低,21d時(shí)又升高,28d時(shí)又降低;與假手術(shù)組相比,NL1免疫熒光染色及平均光密度值分析結(jié)果顯示,與假手術(shù)組相比,損傷3d后NL1表達(dá)開始升高,7d后繼續(xù)升高,至損傷后14d時(shí)達(dá)到峰值,21d后NL1表達(dá)開始降低,至損傷后28天時(shí)已降低至接近假手術(shù)組。4.Western blot結(jié)果及相對(duì)灰度值分析結(jié)果與免疫熒光染色及平均光密度值分析結(jié)果基本一致,即TSP1于脊髓損傷后3d表達(dá)開始升高,7d時(shí)繼續(xù)升高,14d時(shí)表達(dá)有所下降,但21d時(shí)表達(dá)又升高,28d時(shí)又降低;NL1表達(dá)于損傷后3d開始升高,至損傷14d時(shí)達(dá)到峰值,后開始下降。結(jié)論TSP1和NL1的表達(dá)在脊髓損傷后28d內(nèi)自發(fā)性升高,但還不足以誘導(dǎo)突觸再生。
【圖文】:
士學(xué)位論文 大鼠脊髓損傷后 TSP1 與 NL1 表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)表 1 各組大鼠 BBB 評(píng)分結(jié)果假手術(shù)組 n=6 實(shí)驗(yàn)組 n=6 x±s x±s20.333±0.471 0.667±0.74520.833±0.373 2.677±0.74521.000±0.000 6.167±0.68721.000±0.000 9.000±0.70721.000±0.000 12.333±0.849
假手術(shù)組及實(shí)驗(yàn)各組Golgi-Cox染色(樹突)
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R651.2
本文編號(hào):2608079
【圖文】:
士學(xué)位論文 大鼠脊髓損傷后 TSP1 與 NL1 表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)表 1 各組大鼠 BBB 評(píng)分結(jié)果假手術(shù)組 n=6 實(shí)驗(yàn)組 n=6 x±s x±s20.333±0.471 0.667±0.74520.833±0.373 2.677±0.74521.000±0.000 6.167±0.68721.000±0.000 9.000±0.70721.000±0.000 12.333±0.849
假手術(shù)組及實(shí)驗(yàn)各組Golgi-Cox染色(樹突)
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R651.2
【參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前1條
1 Yi-Min Yuan;Cheng He;;The glial scar in spinal cord injury and repair[J];Neuroscience Bulletin;2013年04期
,本文編號(hào):2608079
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