發(fā)布時(shí)間：2019-09-18 06:58

【摘要】：背景： 骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis, OA)的治療是臨床上的巨大挑戰(zhàn)。機(jī)械損傷、肥胖、運(yùn)動(dòng)不當(dāng)?shù)榷伎赡軐?dǎo)致骨關(guān)節(jié)炎。骨關(guān)節(jié)炎在60歲以上的人群中發(fā)病率已經(jīng)達(dá)到了10%,但是在臨床上僅有少量的藥物能緩解癥狀,其中多數(shù)為止痛藥。骨關(guān)節(jié)炎的病理過(guò)程包括軟骨表面磨損、軟骨基質(zhì)的降解,炎性水平的升高等。腫瘤壞死因子(TNFa)是導(dǎo)致OA病理過(guò)程的重要因素之一。Atsttrin蛋白來(lái)源于顆粒蛋白前體(Progranulin, PGRN)的三個(gè)有效片段,能夠與TNFa受體(TNFR)結(jié)合進(jìn)而拮抗TNFa引起的炎癥反應(yīng),具有較PGRN更強(qiáng)的結(jié)合TNFR的能力以及更顯著的炎癥治療效果。因此,我們擬研究過(guò)表達(dá)Atsttrin蛋白的小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞在骨關(guān)節(jié)炎中的治療作用及其潛在機(jī)制。 方法：構(gòu)建過(guò)表達(dá)Atsttrin蛋白的小鼠干細(xì)胞系(MSC-Atsttrin),并與人軟骨細(xì)胞(hAC)體外共培養(yǎng)。TNFa處理后檢測(cè)相關(guān)基因的表達(dá)變化。構(gòu)建小鼠關(guān)節(jié)腔韌帶切斷導(dǎo)致的骨關(guān)節(jié)炎模型(ACLT-OA),通過(guò)關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射MSC-GFP/Atsttrin治療,觀察骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)展程度。 結(jié)果：TNFa在人和鼠的OA關(guān)節(jié)軟骨中呈現(xiàn)高表達(dá)。TNFa處理使人軟骨細(xì)胞MMP13,ADAMTS-5等基因的mRNA表達(dá)水平顯著升高。而MSC-Atsttrin與之共培養(yǎng)后能有效的拮抗TNFa病理反應(yīng)。體內(nèi)結(jié)果顯示,相對(duì)于正常組樣本,OA模型構(gòu)建后關(guān)節(jié)軟骨呈現(xiàn)明顯的軟骨表層磨損、軟骨基質(zhì)降解及OARIS評(píng)分升高。MSC-Atsttrin注射組骨關(guān)節(jié)軟骨退行性病變明顯減緩。 結(jié)論：Atsttrin過(guò)表達(dá)的小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞在OA中具有較顯著的治療效果。
【圖文】：

浙江大學(xué)碩+學(xué)位論文 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 TNFa在OA病理組織中蛋白水平的表達(dá)為了檢測(cè)TNFa在OA病理組織中的表達(dá)，我們收集了人和小l#正常關(guān)節(jié)軟骨和OA病理關(guān)節(jié)軟骨（鼠的OA樣本為造模后8周，n=3),分別做了免疫組化實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如圖1、2所示，在人和鼠的關(guān)節(jié)樣本中，相對(duì)于正常組，OA病理環(huán)境中的關(guān)節(jié)軟骨的TNFa的表達(dá)均明顯升高，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比分別是(39.17±1.4%VS 60.47±1.8o/o,尸<0.01)，(32.75±8.3% vs 77.84±5.9%,/7<0.001)oA B

江大學(xué)碩十學(xué)位論文 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖2. TNFa在l#正常和OA關(guān)節(jié)軟骨中的表達(dá)：（A、B)是昆正常軟骨樣本切片染色結(jié)果，標(biāo)尺長(zhǎng)度分別為200 jum、lOOMm,結(jié)果表明TNFa的表達(dá)接近于無(wú)；(C、D)是鼠OA軟骨樣本切片染色結(jié)果，標(biāo)尺長(zhǎng)度分別為200 M m、100 pm,果表明TNFa的表達(dá)相對(duì)于正常組明顯升高；（E)是相應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞統(tǒng)計(jì)圖。3.2 TNFa在OA病理組織中mRNA水平的表達(dá)為了檢測(cè)TNFa在OA病理組織中mRNA水平的表達(dá)，我們收集了人和小正常關(guān)節(jié)軟骨和OA病理關(guān)節(jié)軟骨（小鼠的OA樣本為造模后4周和8周樣本，，n=3)。RNA提取過(guò)程見實(shí)驗(yàn)步驟。結(jié)果顯示如圖3所示，在人和鼠的關(guān)節(jié)樣本中，相對(duì)于正常組，OA病理環(huán)境關(guān)節(jié)軟骨中TNFa的RNA表達(dá)均顯著升高，尤其是鼠造模后8周的樣本。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R684.3

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 周宇飛;周峻崗;袁漢英;呂紅;;人超氧化物歧化酶-胸腺素α1融合蛋白在畢赤酵母中的表達(dá)與活性檢測(cè)[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年02期

2 周江濤,劉獻(xiàn)祥;骨性關(guān)節(jié)炎與白細(xì)胞介素-1β[J];福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年03期

3 陸斌,湯亭亭;骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制中的免疫學(xué)因素[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(骨科學(xué)分冊(cè));2004年01期

4 蔡偉平,湯亭亭;骨關(guān)節(jié)炎的細(xì)胞生物學(xué)研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(骨科學(xué)分冊(cè));2004年01期

5 張曉敏;郭恪;任春霞;閆嘉晴;林崇韜;;牙周炎骨喪失機(jī)制中關(guān)于炎癥和解偶聯(lián)的研究[J];國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2013年02期

6 陳家平;張杰;;小針刀聯(lián)合鉆孔減壓術(shù)治療髕股關(guān)節(jié)炎的臨床研究[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2013年10期

7 黃淑婷;徐建華;丁長(zhǎng)海;;炎癥細(xì)胞因子及力學(xué)因素在膝骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制和關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)改變中的作用[J];安徽醫(yī)學(xué);2013年09期

8 陳家平;張杰;;小針刀配合鉆孔減壓術(shù)治療跟痛癥的療效觀察[J];安徽醫(yī)藥;2014年04期

9 陳朝陽(yáng);;針刺療法配合中藥外敷與封閉療法配合中藥外敷治療骨關(guān)節(jié)炎病的臨床療效比較[J];中國(guó)地方病防治雜志;2014年03期

10 鄧敏;陳晨;瞿華;王行;魏慧麗;鄧華聰;;肥胖及2型糖尿病患者血漿CTRP3水平與胰島素抵抗相關(guān)因素的研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年15期

相關(guān)會(huì)議論文 前4條

1 陳益丹;邱華平;金肖青;方劍喬;俞邁紅;諸劍芳;;針刺、溫針灸、電針對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎模型軟骨代謝相關(guān)因子影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];2011中國(guó)針灸學(xué)會(huì)年會(huì)論文集（摘要）[C];2011年

2 陳益丹;邱華平;金肖青;俞邁紅;諸劍芳;;針刺對(duì)兔膝骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型血清IL-1β、TNF-α的影響[A];中國(guó)針灸學(xué)會(huì)2009學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下集）[C];2009年

3 徐智儀;高曉強(qiáng);王海;張科技;陳旭;鄧懷明;;早期膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎康復(fù)治療體會(huì)[A];2013浙江省物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)暨第八屆浙江省康復(fù)醫(yī)學(xué)發(fā)展論壇論文集[C];2013年

4 ;The anti-hyperuricemia and xanthine oxidase inhibition effects of chrysoeriol, a component from Apium graveolens L. seeds[A];2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集[C];2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 韓清民;膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨病理改變的分子生物學(xué)機(jī)制及中藥干預(yù)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2006年

2 周琦石;骨炎定對(duì)一氧化氮抑制人類軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原合成的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2006年

3 周斌;關(guān)節(jié)康治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)與臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2006年

4 王培民;膝寧方治療膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎肝腎虧虛證的臨床研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2005年

5 鐘玉;復(fù)元膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性骨關(guān)節(jié)炎的軟骨保護(hù)作用研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

6 林木南;OA護(hù)膝防治膝骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建中醫(yī)學(xué)院;2008年

7 任志偉;MAPKs通路在兔骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞表達(dá)MMP-1/-13中作用的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

8 侯德才;人類原發(fā)性膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎病變滑膜全基因組表達(dá)與分析[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2008年

9 任婕;消痹靈注射液對(duì)退行性骨關(guān)節(jié)炎的防治作用及其機(jī)理研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

10 王兵;基因工程菌E.coli pET28a（+）-PAW的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)化廢棄物產(chǎn)生物柴油的研究[D];浙江大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 韓波;L-CVN的中試發(fā)酵及其初步毒性和免疫原性研究[D];暨南大學(xué);2011年

2 孔揚(yáng);聯(lián)合基因治療骨關(guān)節(jié)炎：IL-1Ra聯(lián)合自殺基因HSV-tk體外轉(zhuǎn)染滑膜細(xì)胞促使炎性介質(zhì)釋放減少并抑制過(guò)度增生的滑膜細(xì)胞[D];山東大學(xué);2011年

3 段鑫;缺氧誘導(dǎo)因子-1α在人關(guān)節(jié)滑膜組織中表達(dá)及轉(zhuǎn)染HIF-1α后滑膜細(xì)胞功能及形態(tài)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

4 周江濤;透骨消痛顆粒防治骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建中醫(yī)學(xué)院;2005年

5 郭艾軍;骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)因素研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2006年

6 崔長(zhǎng)存;中西醫(yī)結(jié)合治療膝骨關(guān)節(jié)炎的臨床觀察[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2009年

7 吳世棟;白介素-7及基質(zhì)金屬蛋白酶-13在骨關(guān)節(jié)炎中的表達(dá)及意義[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2009年

8 王曉慧;黑曲霉硫氧還蛋白體系基因的克隆、鑒定、融合及其在食品工程中的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2010年

9 陳偉;LCVN的可溶性表達(dá)及其N-末端特異性PEG修飾[D];暨南大學(xué);2010年

10 寒樺;BMI與膝關(guān)節(jié)軟骨滑膜損傷程度之間的聯(lián)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2537388