【摘要】：目的研究miR-143過表達(dá)對(duì)人成骨肉瘤143B細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響。方法通過慢病毒攜帶miR-143過表達(dá)載體轉(zhuǎn)染骨肉瘤143B細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分為3組。實(shí)驗(yàn)組轉(zhuǎn)染miR-143過表達(dá)序列,對(duì)照組轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照NC序列,空白組為空白PBS。分別采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western blot、Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組基因、蛋白的表達(dá)以及細(xì)胞侵襲和遷移能力。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組miR-143基因和蛋白的表達(dá),相較于對(duì)照組和空白組顯著增加(P0.05),而基質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)基因和蛋白的表達(dá)相較于對(duì)照組和空白組顯著減少(P0.05);實(shí)驗(yàn)組穿膜細(xì)胞數(shù)顯著低于對(duì)照組和空白組(P0.05);實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞劃痕愈合率顯著低于對(duì)照組和空白組(P0.05)。結(jié)論 miR-143過表達(dá)通過靶向MMP-13基因,進(jìn)一步抑制成骨肉瘤143B細(xì)胞侵襲及遷移能力。
【圖文】：

細(xì)胞密度為2×106·mL－1的單細(xì)胞懸液。細(xì)胞融合率達(dá)到100%時(shí)用10μL的槍頭作筆直劃痕，劃痕完畢后，，PBS輕洗細(xì)胞3次，漂洗去除劃下的細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)。按0、24、48h時(shí)間點(diǎn)取樣，拍照，用ImageJ軟件分析培養(yǎng)0、24、48h時(shí)的各組劃痕情況。1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件，采用單因素方差分析，多組間比較使用SNK法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2．1觀察轉(zhuǎn)染率采用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，根據(jù)最強(qiáng)紅色熒光判斷轉(zhuǎn)染率，轉(zhuǎn)染率可達(dá)90%以上，證實(shí)本實(shí)驗(yàn)的轉(zhuǎn)染方法是成功的，轉(zhuǎn)染率高。見圖1。A:熒光圖;B:透視圖;C:A和B組合圖圖1激光共聚焦顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染率·1810·廣東醫(yī)學(xué)2017年6月第38卷第12期GuangdongMedicalJournalJun．2017，Vol．38，No．12

無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。表1各組miＲ－143和MMP－13mＲNA的表達(dá)(n=6)xs

本文編號(hào)：2536841