發(fā)布時(shí)間：2019-09-17 07:08

【摘要】：[目的]本研究主要以在體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型為對(duì)象,通過對(duì)比各組樣本之間的心肌梗死面積的大小,探究右美托咪定對(duì)在體大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。同時(shí)利用基因芯片技術(shù)分析右美托咪定對(duì)在體大鼠心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用的miRNA差異表達(dá)譜。為以后在基因?qū)用嫣骄坑颐劳羞涠▽?duì)心肌缺血再灌注損傷保護(hù)機(jī)制,及后續(xù)分子生物學(xué)層面的探索打下基礎(chǔ)。[方法]用健康雄性SPF級(jí)SD大鼠280-300g建立在體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型。實(shí)驗(yàn)共分為四組分別為:空白組(C組,只掛線不做任何處理)、缺血/再灌注組(IR組)、右美托咪定預(yù)處理組(DP組)、缺血預(yù)處理組(IP組)。C組持續(xù)灌注180min不做任何處理:IR組穩(wěn)定期后繼續(xù)灌注30min;DP組于穩(wěn)定期末后15min經(jīng)頸內(nèi)靜脈注射右美托咪定溶液,劑量為20ug/kg,再灌注15min(即右美托咪定預(yù)處理);IP組于穩(wěn)定期末結(jié)扎左前降支5min開放5min重復(fù)三個(gè)循環(huán)(即缺血預(yù)處理)。隨后IR組、DP組、IP組均結(jié)扎左前降支30min然后松開結(jié)扎絲線再灌注120min。用TTC染色的方法測(cè)定各組心肌梗死面積,甲醛脫水石蠟包埋切片,HE染色觀察心肌組織改變,基因芯片技術(shù)分析miRNA差異表達(dá)譜。結(jié)果分析用SPSS17.0,各組心肌梗死面積的差異采用方差分析,基因芯片中miRNA的分析采用T-檢驗(yàn)的方法。[結(jié)果]C組與IR組、DP組及IP組的心肌梗死面積的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);IR組與C組、DP組及IP組的心肌梗死面積的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);DP組與IR組、C組的心肌梗死面積的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與IP組心肌梗死面積差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;IP組與IR組、C組的心肌梗死面積的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與DP組心肌梗死面積差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與IR組相比C組共8個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào),共4個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào);與C組相比IP組共12個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào),共6個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào);與C組相比DP組共6個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào),共3個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào);與IP組相比DP組共16個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào),共4個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào);與IR組相比DP組共27個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào),共38個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào);與IR組相比IP組共42個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào),共72個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào)。[結(jié)論]右美托咪定預(yù)處理可以起到對(duì)抗心肌缺血再灌注損傷的作用;其作用機(jī)制與miRNA的異常表達(dá)有著十分密切的關(guān)系。
【圖文】：

注組（ＩＲ組）、右美托咪定預(yù)處理組（ＤＰ組）、缺血預(yù)處理組（ＩＰ組）；６只用逡逑于心肌梗死面積大小的分析，１只用于病理檢查。所有大鼠均禁食１２ｈ，不禁飲。逡逑實(shí)驗(yàn)進(jìn)程如圖１所示。逡逑ｃＭ逡逑＊邐１邋－＾Ｊｄｆ邐＾邐ｖ邋＊邋／＞邋－邋＂１＇邋ＭＣＪ邋＾邋＾４逡逑０邐２０邐４０邐６０邐８０邐１００邐１２０邐１４０邐１６０邐１８０邐２００逡逑！邐１邐１邋Ｉ邐Ｉ邋Ｉ逡逑Ｔ１邋Ｔ２邐Ｔ３邋Ｔ４邐Ｔ５逡逑ｋ￣ａ心臟灌流：：：：：：：：：：：缺血預(yù)處理＊Ｈ心肌缺血逡逑注：Ｔ１：穩(wěn)定期末；Ｔ２：邋ＤＰ組注射右美托咪定；Ｔ３：心肌缺血即刻；Ｔ４：再灌注即刻逡逑（缺血３０ｍｉｎ）即刻；Ｔ５：再灌注１２０ｍｉｎ結(jié)束即刻；逡逑圖１實(shí)驗(yàn)分組及處理示意圖逡逑２．４實(shí)驗(yàn)步驟逡逑在建模成功后，Ｃ組持續(xù)灌注１８０ｍｉｎ不做任何處理：ＩＲ組于穩(wěn)定期后繼逡逑續(xù)灌注３０ｍｉｎ；邋ＤＰ組于穩(wěn)定期末后１５ｍｉｎ經(jīng)頸內(nèi)靜脈注射右美托咪定溶液，劑逡逑量為２０ｕｇ／ｋｇ，而后再灌注１５ｍｉｎ邋（即右美托咪定預(yù)處理）；ＩＰ組于穩(wěn)定期末結(jié)逡逑扎左前降支５ｍｉｎ開放５ｍｉｎ重復(fù)三個(gè)循環(huán)（即缺血預(yù)處理）。隨后ＩＲ組、ＤＰ組、逡逑ＩＰ組均結(jié)扎左前降支３０ｍｉｎ；結(jié)扎３０ｍｉｎ后松開結(jié)扎絲線再灌注１２０ｍｉｎ邋（通過逡逑１１逡逑

ＤＰ組心肌梗死面積差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可以認(rèn)為、ＩＰ組與ＩＲ組、Ｃ組之間的心逡逑肌梗死面積有差異。ＩＰ組與ＤＰ組心肌梗死面積無差異。逡逑具體結(jié)果如表１、圖２所示，所有數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來表示。逡逑表１四組大鼠心肌梗死面積的比較（％，ｎ＝６，無土；ｓ）逡逑ｍ＼邐＾邐梗死面積逡逑￣ＣＨ邐３．５７士２．３５逡逑Ｒ邋組邐３９．２３±１．３８＊逡逑ＤＰ邋組邐２２．１３±２．３７＃＊逡逑ＩＰ邋組邐２５．２５±１．２４＃＊逡逑注：與Ｃ組相比，＞＜０．０５；與ＩＲ組相比，＃Ｐ＜０．０５逡逑４５邋邐逡逑＊逡逑４０邐＊煖邐邐邐邐邐邐逡逑３５邋邐逡逑邐＇Ｉ邋—邋——邋．邐邐邋￣逡逑邐－Ｂ逡逑Ｃ組邐ＩＲ組邐ＤＰ組邐ＩＰ組逡逑注：與Ｃ組相比，＞＜０．０５；與ＩＲ組相比，＃Ｐ＜０．
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R614

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2536717