【摘要】：[目的]本研究主要以在體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型為對象,通過對比各組樣本之間的心肌梗死面積的大小,探究右美托咪定對在體大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用。同時利用基因芯片技術分析右美托咪定對在體大鼠心肌缺血再灌注損傷保護作用的miRNA差異表達譜。為以后在基因?qū)用嫣骄坑颐劳羞涠▽π募∪毖俟嘧p傷保護機制,及后續(xù)分子生物學層面的探索打下基礎。[方法]用健康雄性SPF級SD大鼠280-300g建立在體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型。實驗共分為四組分別為:空白組(C組,只掛線不做任何處理)、缺血/再灌注組(IR組)、右美托咪定預處理組(DP組)、缺血預處理組(IP組)。C組持續(xù)灌注180min不做任何處理:IR組穩(wěn)定期后繼續(xù)灌注30min;DP組于穩(wěn)定期末后15min經(jīng)頸內(nèi)靜脈注射右美托咪定溶液,劑量為20ug/kg,再灌注15min(即右美托咪定預處理);IP組于穩(wěn)定期末結扎左前降支5min開放5min重復三個循環(huán)(即缺血預處理)。隨后IR組、DP組、IP組均結扎左前降支30min然后松開結扎絲線再灌注120min。用TTC染色的方法測定各組心肌梗死面積,甲醛脫水石蠟包埋切片,HE染色觀察心肌組織改變,基因芯片技術分析miRNA差異表達譜。結果分析用SPSS17.0,各組心肌梗死面積的差異采用方差分析,基因芯片中miRNA的分析采用T-檢驗的方法。[結果]C組與IR組、DP組及IP組的心肌梗死面積的差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);IR組與C組、DP組及IP組的心肌梗死面積的差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);DP組與IR組、C組的心肌梗死面積的差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),與IP組心肌梗死面積差異無統(tǒng)計學意義;IP組與IR組、C組的心肌梗死面積的差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),與DP組心肌梗死面積差異無統(tǒng)計學意義。與IR組相比C組共8個miRNA表達上調(diào),共4個miRNA表達下調(diào);與C組相比IP組共12個miRNA表達上調(diào),共6個miRNA表達下調(diào);與C組相比DP組共6個miRNA表達上調(diào),共3個miRNA表達下調(diào);與IP組相比DP組共16個miRNA表達上調(diào),共4個miRNA表達下調(diào);與IR組相比DP組共27個miRNA表達上調(diào),共38個miRNA表達下調(diào);與IR組相比IP組共42個miRNA表達上調(diào),共72個miRNA表達下調(diào)。[結論]右美托咪定預處理可以起到對抗心肌缺血再灌注損傷的作用;其作用機制與miRNA的異常表達有著十分密切的關系。
【圖文】：

注組（ＩＲ組）、右美托咪定預處理組（ＤＰ組）、缺血預處理組（ＩＰ組）；６只用逡逑于心肌梗死面積大小的分析，１只用于病理檢查。所有大鼠均禁食１２ｈ，不禁飲。逡逑實驗進程如圖１所示。逡逑ｃＭ逡逑＊邐１邋－＾Ｊｄｆ邐＾邐ｖ邋＊邋／＞邋－邋＂１＇邋ＭＣＪ邋＾邋＾４逡逑０邐２０邐４０邐６０邐８０邐１００邐１２０邐１４０邐１６０邐１８０邐２００逡逑！邐１邐１邋Ｉ邐Ｉ邋Ｉ逡逑Ｔ１邋Ｔ２邐Ｔ３邋Ｔ４邐Ｔ５逡逑ｋ￣ａ心臟灌流：：：：：：：：：：：缺血預處理＊Ｈ心肌缺血逡逑注：Ｔ１：穩(wěn)定期末；Ｔ２：邋ＤＰ組注射右美托咪定；Ｔ３：心肌缺血即刻；Ｔ４：再灌注即刻逡逑（缺血３０ｍｉｎ）即刻；Ｔ５：再灌注１２０ｍｉｎ結束即刻；逡逑圖１實驗分組及處理示意圖逡逑２．４實驗步驟逡逑在建模成功后，Ｃ組持續(xù)灌注１８０ｍｉｎ不做任何處理：ＩＲ組于穩(wěn)定期后繼逡逑續(xù)灌注３０ｍｉｎ；邋ＤＰ組于穩(wěn)定期末后１５ｍｉｎ經(jīng)頸內(nèi)靜脈注射右美托咪定溶液，劑逡逑量為２０ｕｇ／ｋｇ，而后再灌注１５ｍｉｎ邋（即右美托咪定預處理）；ＩＰ組于穩(wěn)定期末結逡逑扎左前降支５ｍｉｎ開放５ｍｉｎ重復三個循環(huán)（即缺血預處理）。隨后ＩＲ組、ＤＰ組、逡逑ＩＰ組均結扎左前降支３０ｍｉｎ；結扎３０ｍｉｎ后松開結扎絲線再灌注１２０ｍｉｎ邋（通過逡逑１１逡逑

ＤＰ組心肌梗死面積差異無統(tǒng)計學意義，可以認為、ＩＰ組與ＩＲ組、Ｃ組之間的心逡逑肌梗死面積有差異。ＩＰ組與ＤＰ組心肌梗死面積無差異。逡逑具體結果如表１、圖２所示，所有數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標準差來表示。逡逑表１四組大鼠心肌梗死面積的比較（％，ｎ＝６，無土；ｓ）逡逑ｍ＼邐＾邐梗死面積逡逑￣ＣＨ邐３．５７士２．３５逡逑Ｒ邋組邐３９．２３±１．３８＊逡逑ＤＰ邋組邐２２．１３±２．３７＃＊逡逑ＩＰ邋組邐２５．２５±１．２４＃＊逡逑注：與Ｃ組相比，＞＜０．０５；與ＩＲ組相比，＃Ｐ＜０．０５逡逑４５邋邐逡逑＊逡逑４０邐＊煖邐邐邐邐邐邐逡逑３５邋邐逡逑邐＇Ｉ邋—邋——邋．邐邐邋￣逡逑邐－Ｂ逡逑Ｃ組邐ＩＲ組邐ＤＰ組邐ＩＰ組逡逑注：與Ｃ組相比，＞＜０．０５；與ＩＲ組相比，＃Ｐ＜０．
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R614

【參考文獻】

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本文編號：2536717