【摘要】：目的觀察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激退變人椎間盤髓核細胞前后,核因子kapp B(NF-κB)與炎癥因子表達及相互關系。方法體外培養(yǎng)退變的人椎間盤髓核細胞,設立對照組、LPS(500μg/m L)刺激組、NF-κB抑制劑(BAY11-7082)+LPS(500μg/m L)刺激組。ELISA方法檢測各組細胞培養(yǎng)液中炎癥因子TNF-α及IL-1β的含量,免疫熒光法檢測各組髓核細胞內p65的表達及定位,Western blot檢測TNF-α、IL-1β、NF-κB結合蛋白p65以及磷酸化p-p65的表達,Real-time PCR檢測TNF-α及IL-1β的表達。結果 LPS刺激髓核細胞后,p65入核增多,p-p65表達明顯增加,ELISA實驗結果表明LPS刺激組細胞培養(yǎng)液中炎癥因子TNF-α及IL-1β表達水平升高(P0.05),Western blot及Real-time PCR檢測結果也表明其髓核細胞內炎癥因子TNF-α及IL-1β表達水平明顯上升(P0.05);而與LPS刺激組相比,NF-κB抑制劑+LPS刺激組p65入核減少,p-p65表達明顯降低,細胞培養(yǎng)液中炎癥因子TNF-α及IL-1β表達水平降低(P0.05),Western blot及Real-time PCR檢測結果也表明其髓核細胞內炎癥因子TNF-α及IL-1β表達水平明顯下降(P0.05)。結論 LPS能夠通過激活人退變髓核細胞NF-κB信號通路,促進炎性因子TNF-α及IL-1β表達增多,抑制NF-κB信號通路后可明顯減輕炎性因子的表達。
【圖文】：

條件:95℃3min;95℃15s，55℃30s，39個循環(huán);溶解分析(65～95℃)，以β-actin為內參照標化各組cDNA模板。1．3統(tǒng)計學方法采用SPSS19．0統(tǒng)計軟件，計量資料用xs，

本文編號：2524488