【摘要】：目的:檢測在人關節(jié)軟骨中是否表達溫度敏感性瞬時受體通道TRPM4,探討其在不同年齡正常關節(jié)軟骨及不同程度骨關節(jié)炎患者關節(jié)軟骨上的變化趨勢,研究TRPM4通道與關節(jié)軟骨退變的關系。方法:收集山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院骨科外傷截肢患者正常膝關節(jié)軟骨,根據(jù)年齡分為20~29歲組,30~39歲組,40~49歲組,每組6例;收集OA患者膝關節(jié)置換關節(jié)軟骨,根據(jù)破壞程度分為軟骨破壞輕組和軟骨破壞重組,每組6例。番紅O染色結果評價不同年齡正常膝關節(jié)及骨關節(jié)炎患者軟骨退變程度,實時熒光定量聚合酶鏈反應法測定TRPM4 m RNA在基因水平的變化,免疫印跡法測定TRPM4蛋白水平的表達,免疫熒光和免疫組化分析TRPM4在關節(jié)軟骨及細胞表面的分布。結果:番紅O染色顯示,隨著患者年齡的增加,關節(jié)軟骨表面逐漸由光滑變毛糙,細胞間區(qū)染色逐漸由深紅色變?yōu)闇\紅色,OA患者糖胺多糖退變更明顯。人膝關節(jié)軟骨上存在TRPM4蛋白通道。隨著年齡的增加,正常軟骨中各組TRPM4m RNA和蛋白逐漸增加,差別有統(tǒng)計學意義(P0.05),并且年齡和TRPM4蛋白表達量呈正相關(r=0.632,P0.01)。隨著關節(jié)軟骨破壞的加重,軟骨中TRPM4的m RNA和蛋白顯著增加,差別有統(tǒng)計學意義(P0.05),且TRPM4蛋白表達量和破壞程度正相關(r=0.714,P0.01)。免疫熒光顯示,TRPM4主要位于軟骨細胞膜上。免疫組化顯示,TRPM4位于軟骨淺中層。結論:TRPM4在人類膝關節(jié)軟骨細胞中表達,且存在于關節(jié)軟骨的淺中層細胞的細胞膜上。在正常人群中,隨著年齡的增長,TRPM4的表達量逐漸增加,在骨關節(jié)炎患者中,隨著破壞的加重,TRPM4表達量逐漸增加,并且,TRPM4的表達量與年齡變化及骨關節(jié)炎軟骨破壞程度呈正相關。目前,TRPM4在軟骨細胞的生理作用和病理生理機制仍不清楚,下一步我們的研究重點將關注于TRPM4通道蛋白在正常軟骨細胞和關節(jié)炎軟骨細胞中的功能,以便關節(jié)軟骨細胞退變的保護和預防,為治療骨關節(jié)炎提供新的靶點。
[Abstract]:Objective: to detect the expression of temperature-sensitive transient receptor channel TRPM4, in human articular cartilage to investigate the change trend of temperature-sensitive transient receptor channel in normal articular cartilage of different ages and in patients with osteoarthritis of different degrees. To study the relationship between TRPM4 channel and articular cartilage degeneration. Methods: the normal knee cartilage of orthopedic trauma amputation patients in the second Hospital of Shanxi Medical University were divided into 20 鈮，

本文編號：2493772