【摘要】：背景椎間盤退變引起的下腰痛(Low Back Pain LBP)已經(jīng)成為影響人類正常生活最主要的職業(yè)性疾病之一。近年來,許多國(guó)家報(bào)道每年用于該類疾病的治療及預(yù)防的經(jīng)費(fèi)已經(jīng)對(duì)其造成了巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),因此針對(duì)椎間盤退變的研究具有十分重要的意義。椎間盤退變有許多病理學(xué)表現(xiàn),如髓核組織水分丟失、纖維環(huán)變性破裂,終板損傷等。目前的主要研究認(rèn)為椎間盤退變的最終途徑是營(yíng)養(yǎng)通道的缺失,而椎間盤內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)幾乎都來自于終板血管的彌散作用。目前關(guān)于基因、細(xì)胞等治療方式的研究主要著重于修復(fù)退變的髓核組織,且主要適用于早、中期退變的患者,并未針對(duì)主要影響椎間盤營(yíng)養(yǎng)彌散功能的終板進(jìn)行研究。近50年來,同種異體椎間盤移植技術(shù)作為一種新的治療方法,已在部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床治療中開展,且取得了良好的療效。然而,對(duì)于移植術(shù)后椎間盤營(yíng)養(yǎng)功能的變化情況目前仍不清楚。動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)核磁共振(Dynamic Contrast-enhanced Magnetic Resonance Imaging, DCE-MRI)在增強(qiáng)造影劑的輔助下可以獲得組織的灌注及血流情況,目前已在各個(gè)器官良惡性腫瘤的鑒別得到廣泛應(yīng)用。近期一些動(dòng)物及人體試驗(yàn)中也證明了其在觀察椎間盤彌散功能狀態(tài)的有效性及可行性。目的1.通過建立犬同種異體椎間盤模型,研究并描述一種在無內(nèi)固定輔助條件下建立犬同種異體椎間盤移植模型的手術(shù)技術(shù)。2.利用DCE-MRI技術(shù)及病理學(xué)觀察對(duì)移植術(shù)后動(dòng)物進(jìn)行隨訪,觀察移植椎間盤內(nèi)彌散功能狀態(tài)的動(dòng)態(tài)變化,探討其生物功能的變化情況。方法：1.選取1歲齡健康雜種犬25只,(10-15月齡,10-14kg),雌雄不限,進(jìn)行X線及MRI對(duì)椎間盤整體情況進(jìn)行評(píng)價(jià),通過Pfirrmann分級(jí)篩選出無明顯脊柱畸形,椎間盤整體情況良好的動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。2.注射過量戊巴比妥鈉處死其中的5只犬,在無菌條件下取L1-L6椎間盤共25個(gè)放入預(yù)先配置好的凍存液中,逐級(jí)凍存,步驟為4℃(12h)、-20℃(2h)、-40℃(2h)、-80℃(2h),最后放入液氮中保存。剩余20只犬用于建立L5-L6椎間盤移植模型的研究。3.術(shù)前、術(shù)后1、4、6、8、12周進(jìn)行腰椎正側(cè)位X線檢查,觀察移植椎間盤的位置以及與相鄰椎體的愈合情況,測(cè)量術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)椎間盤高度數(shù)值,以x±s表示,并采用方差分析(ANOVA)分別與術(shù)前測(cè)量的椎間盤高度進(jìn)行對(duì)比。以P0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。4.術(shù)后4、8、12、24周對(duì)移植成功的動(dòng)物進(jìn)行DCE-MRI觀察,每次掃描的時(shí)間點(diǎn)為靜脈注射造影劑(0.3 mmol/kg)后0 min,2 min、5 min、10 min、30 min、 60min、90min、120 min、150 min、180 min、210 min、240 min,掃描序列為T1 FSE,3.0 T。選取椎間隙上下椎體、上下終板區(qū)域及髓核五個(gè)區(qū)域的感興趣區(qū)間,對(duì)感興趣的間隔不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)量感興趣區(qū)域(Region Of Interest ROI)的信號(hào)強(qiáng)度值,并計(jì)算增強(qiáng)率。根據(jù)結(jié)果繪制各感興趣區(qū)間的時(shí)間-信號(hào)增強(qiáng)率曲線,觀察各曲線的變化特點(diǎn),并對(duì)其進(jìn)行分析。5.術(shù)后12周、24周處死半數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,獲得移植節(jié)段椎間盤及上下約5mm的椎體骨性結(jié)構(gòu),放入4%的多聚甲醛中固定2周,然后放入配制好的Perenyi's脫鈣液中脫鈣4周,最后進(jìn)行石蠟包埋,切片后行HE染色及Masson染色,觀察椎間盤內(nèi)髓核、終板及纖維環(huán)的形態(tài)結(jié)構(gòu)等。結(jié)果1.椎間盤移植手術(shù)前選取合適大小的供體椎間盤,術(shù)中注意保留前、后縱韌帶及對(duì)側(cè)纖維環(huán),可以實(shí)現(xiàn)在無內(nèi)固定條件下成功建立同種異體椎間盤移植模型。本研究中椎間盤移植成功17例,其余2例出現(xiàn)椎間盤脫出,1例出現(xiàn)椎間盤炎。2.術(shù)后3月影像學(xué)檢查示移植椎間盤的上下終板與相鄰椎體形成骨性愈合,未出現(xiàn)移位及脫出。影像學(xué)測(cè)量移植術(shù)前椎間盤高度為：3.0±0.7mm,術(shù)后1、4、6、8、12周椎間盤高度分別為：2.9±0.3mm、2.7±0.6mm、2.7±0.4mm、2.6±0.8mm、 2.6±0.7mm;椎間盤高度的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)平均值均低于術(shù)前,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),隨著觀察時(shí)間的增加,椎間盤的高度略有下降趨勢(shì),但各組間椎間盤高度平均值無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3.大體標(biāo)本觀察發(fā)現(xiàn),可見術(shù)后12周時(shí)移植椎間盤與椎體已形成骨性愈合,愈合區(qū)域仍可辨認(rèn),局部無明顯免疫炎癥反應(yīng)表現(xiàn)。術(shù)后12周及24周的移植椎間盤與對(duì)照組相比均發(fā)生了一定程度的退變,椎間盤高度降低,髓核組織部分變性,纖維環(huán)結(jié)構(gòu)與髓核組織分界不清,纖維環(huán)同心圓排列結(jié)構(gòu)清楚,部分存在缺損,但兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組間無明顯差別。4.病理學(xué)觀察中,與對(duì)照組相比,術(shù)后12周時(shí)髓核組織結(jié)構(gòu)松散,排列紊亂；內(nèi)層纖維環(huán)部分?jǐn)嗔?大體結(jié)構(gòu)仍較完整；軟骨終板增厚。術(shù)后24周時(shí)纖維環(huán)結(jié)構(gòu)紊亂,髓核組織部分纖維化,軟骨終板無明顯退變。5.術(shù)后4、8、12、24周各感興趣區(qū)間時(shí)間-信號(hào)增強(qiáng)率曲線中,正常終板、髓核及椎體均出現(xiàn)兩個(gè)峰值,之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。術(shù)后4周移植椎間盤終板及髓核的分別于90 min和120 min達(dá)到峰值后出現(xiàn)波動(dòng),未觀察到第二峰值出現(xiàn),增強(qiáng)速率及增強(qiáng)率最大值均低于對(duì)照組。術(shù)后8周移植椎間盤終板及髓核的均于120 min達(dá)到峰值后出現(xiàn)波動(dòng),未觀察到第二峰值出現(xiàn),其增強(qiáng)速率及增強(qiáng)率最大值均低于對(duì)照組。術(shù)后12周各感興趣區(qū)間時(shí)間-信號(hào)增強(qiáng)率曲線中,移植椎間盤終板、髓核信號(hào)增強(qiáng)率均在120 min時(shí)達(dá)到峰值,然后開始緩慢下降,未出現(xiàn)第二個(gè)峰值,增強(qiáng)速率及增強(qiáng)率最大值較前提高但仍均低于對(duì)照組。術(shù)后24周各感興趣區(qū)間時(shí)間-信號(hào)增強(qiáng)率曲線中,移植椎間盤終板、髓核信號(hào)強(qiáng)度分別在30 min及90 min時(shí)達(dá)到峰值后逐漸下降,均在150 min時(shí)再次開始增高,210 min時(shí)達(dá)到第二個(gè)峰值,兩個(gè)峰值之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論：1.術(shù)前通過腰椎橫突進(jìn)行體表定位,可以保證手術(shù)節(jié)段的準(zhǔn)確性。采用恰當(dāng)?shù)氖中g(shù)技術(shù),有助于在無內(nèi)固定輔助下成功實(shí)施同種異體椎間盤移植手術(shù)。選擇合適大小的供體椎間盤,有利于提高手術(shù)成功率及降低術(shù)后移植椎間盤移位及脫出風(fēng)險(xiǎn)。本研究提供了一種建立犬同種異體椎間盤移植模型的可行的手術(shù)方案。2.術(shù)后4、8周實(shí)驗(yàn)組DCE-MRI觀察提示椎間盤彌散功能受到了一定的影響,主要原因考慮是移植間盤與宿主椎體未形成骨性愈合,椎體與終板之間的血管襻網(wǎng)未完全吻合,造影劑到達(dá)終板時(shí)間延長(zhǎng),同時(shí)由于椎間盤代謝速率下降,導(dǎo)致240 min內(nèi)未觀察到第二峰值出現(xiàn)。3.術(shù)后12周實(shí)驗(yàn)組DCE-MRI觀察提示椎間盤彌散功能與之前相比得到了一定的恢復(fù),但與正常椎間盤仍有區(qū)別,主要原因考慮是移植椎間盤與椎體形成了骨性愈合,終板與椎體之間的血管網(wǎng)完成了重建,因此造影劑到達(dá)終板的速度較前加快,但由于手術(shù)造成前期椎間盤營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)障礙,導(dǎo)致髓核細(xì)胞活性降低及細(xì)胞外基質(zhì)減少,對(duì)其代謝功能造成了一定影響,故仍未觀察到第二峰值出現(xiàn)。4.術(shù)后24周實(shí)驗(yàn)組DCE-MRI觀察提示移植椎間盤的終板功能已接近正常,盡管終板及髓核增強(qiáng)率最大值仍小于對(duì)照組,但均可在210 min時(shí)觀察到第二峰值出現(xiàn),說明移植手術(shù)未造成終板結(jié)構(gòu)破裂缺損情況。盡管移植手術(shù)對(duì)早期椎間盤彌散功能存在一定影響,并會(huì)降低髓核細(xì)胞活性,但在沒有損害終板的前提下,椎間盤的彌散功能可以得到基本的恢復(fù)。總的來說,同種異體椎間盤移植技術(shù)作為治療椎間盤退行性疾病的方法,可以在一定程度上恢復(fù)椎間盤的穩(wěn)定性、活動(dòng)度及生物活性。通過動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)核磁共振對(duì)術(shù)后的觀察隨訪中發(fā)現(xiàn),早期椎間盤內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的彌散功能受到了一定的影響,但隨著血管網(wǎng)的重建、終板功能的恢復(fù),椎間盤的代謝功能基本得到了恢復(fù)。這不僅探討了同種異體椎間盤移植術(shù)后終板功能的動(dòng)態(tài)變化對(duì)椎間盤彌散能力的影響,也為將來同種異體椎間盤移植在臨床中的開展提供了可靠的依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R687.3

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 曹正霖;周守國(guó);黃耀渠;付忠泉;王剛;陳志維;;彈性棒動(dòng)態(tài)內(nèi)固定治療腰椎退行性疾病的初期效果[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年01期

2 李利;史亞民;王華東;郭繼東;馬超;張宇鵬;;Dynesys系統(tǒng)不同應(yīng)用方式治療椎間盤退變性疾病的臨床療效[J];中國(guó)骨與關(guān)節(jié)雜志;2013年06期

3 李杰;王洪崗;尚進(jìn);周躍;;經(jīng)椎間孔腰椎椎間融合術(shù)植骨融合前后應(yīng)力分布差異的有限元分析[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2015年14期

4 衛(wèi)沛然;鄒德威;陳曉明;譚榮;;后路減壓Dynesys動(dòng)態(tài)固定與后路減壓融合內(nèi)固定治療單節(jié)段腰椎退行性疾病的臨床療效的比較[J];頸腰痛雜志;2014年02期

5 張凱;趙長(zhǎng)清;馬振江;孫曉江;李華;孫偉;趙杰;;單枚Z-Cage單側(cè)椎弓根螺釘固定治療退行性腰椎疾病的影像及臨床觀察[J];脊柱外科雜志;2014年04期

6 莊偉;莊汝杰;;下腰痛患者的Modic改變的流行病學(xué)分析[J];現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué);2014年12期

7 方展永;;運(yùn)用整脊推拿療法結(jié)合導(dǎo)引治療140例神經(jīng)根型頸椎病的對(duì)比療效[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2015年01期

8 楊大志;韓晶;易偉宏;;兔椎間盤退變與修復(fù)模型的研究現(xiàn)狀[J];生物骨科材料與臨床研究;2015年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 原威;IL-1刺激大鼠纖維環(huán)細(xì)胞基因表達(dá)譜研究及ERK信號(hào)通路抑制對(duì)IL-1誘導(dǎo)的大鼠纖維環(huán)細(xì)胞退變的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

2 劉建航;腰椎后路多節(jié)段內(nèi)固定技術(shù)的有限元研究及臨床觀察[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

3 陶暉;功能化自組裝多肽納米纖維水凝膠對(duì)人退變髓核細(xì)胞的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

4 劉青華;去勢(shì)山羊骨質(zhì)疏松與椎間盤退變的相關(guān)性研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

5 劉恩志;撐開型融合器治療腰椎疾患長(zhǎng)期隨訪及療效評(píng)價(jià)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

6 陳宇飛;miR-129-5p在椎間盤退變中的作用及其表觀遺傳調(diào)控研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

7 江仁兵;椎體血管異常有限元分析及影像、病理、臨床研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2014年

8 林周勝;腰椎后路經(jīng)椎弓根動(dòng)態(tài)與柔性內(nèi)固定的生物力學(xué)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

9 孫偉;Sox9基因轉(zhuǎn)染骨髓干細(xì)胞修復(fù)退變椎間盤的研究[D];上海交通大學(xué);2014年

10 施榮茂;腰椎融合輔以鄰近節(jié)段動(dòng)態(tài)固定治療腰椎退行性疾病的臨床對(duì)比觀察[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 韓小偉;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療兔椎間盤退行性變的實(shí)驗(yàn)研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2013年

2 劉楊青;重組腺病毒介導(dǎo)的Sox9基因轉(zhuǎn)染終板軟骨細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的研究[D];鄭州大學(xué);2013年

3 馬錚;Modic改變與椎間盤高度及椎體骨質(zhì)增生的關(guān)系[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

4 張旭靜;MRI功能成像對(duì)腰椎間盤退變下腰痛的臨床應(yīng)用價(jià)值研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

5 劇松立;胸腰椎結(jié)核分類方法的研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

6 黃世磊;棘突間非融合彈性內(nèi)固定系統(tǒng)治療腰椎間盤突出癥的早期療效觀察[D];鄭州大學(xué);2013年

7 任偉劍;經(jīng)Wiltse入路置入Dynesys系統(tǒng)治療腰椎退行性疾病的臨床研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

8 王海;來源于人退變椎間盤的三種干細(xì)胞與BM-MSCs生物學(xué)特性及組織工程應(yīng)用的比較研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 張濤;Beagle犬脂肪干細(xì)胞向類髓核細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

10 王浩明;Dynesys和Isobar兩種動(dòng)態(tài)固定系統(tǒng)非融合治療腰椎間盤突出癥的臨床對(duì)比研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：2479806