【摘要】：目的:體外沖擊波不僅可以通過增加血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá),增加心肌有效灌注和改善左室重塑,從而改善缺血性心臟病患者癥狀,治療缺血性心臟病;而且可以使骨細(xì)胞將機(jī)械信號(hào)轉(zhuǎn)化為生化信號(hào)后傳導(dǎo)給破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞,引起骨的重建,治療骨折延遲愈合或不愈合,這提示沖擊波具有促進(jìn)組織再生的作用。然而有關(guān)沖擊波對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化影響的研究并不多。本研究利用不同能量的發(fā)散式?jīng)_擊波刺激骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,觀察其成軟骨效果,探究沖擊波在體內(nèi)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化的調(diào)節(jié)作用。方法:從骨髓中分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,培養(yǎng)至P3代,通過倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),流式分析細(xì)胞表面相關(guān)抗原的表達(dá)和誘導(dǎo)成骨成脂分化能力鑒定為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。在探索沖擊波調(diào)控干細(xì)胞成軟骨分化時(shí),我們先后采用裸鼠皮下細(xì)胞種植模型和新西蘭大白兔膝關(guān)節(jié)軟骨損傷兩種動(dòng)物模型。首先將裸鼠分為4組,分別為對照組(藻酸鈣種植到裸鼠皮下),干細(xì)胞組(包裹干細(xì)胞的藻酸鈣種植到裸鼠皮下),低能量沖擊波組(2.0bar,200次,10Hz的沖擊波刺激干細(xì)胞后,包裹在藻酸鈣中種植到裸鼠皮下),高能量沖擊波組(3.0bar, 200次,10Hz的沖擊波刺激干細(xì)胞后,包裹在藻酸鈣中種植到裸鼠皮下)。種植后3個(gè)月和12個(gè)月,對樣本進(jìn)行組織學(xué)檢測。然后將新西蘭大白兔分為4組,,建立膝關(guān)節(jié)軟骨損傷模型,根據(jù)分組將細(xì)胞或支架移植到軟骨損傷區(qū),分組和細(xì)胞處理步驟同裸鼠,移植后3個(gè)月,樣本進(jìn)行組織學(xué)檢測。結(jié)果:在裸鼠皮下細(xì)胞種植實(shí)驗(yàn)中,兩個(gè)沖擊波組樣本比其余兩組體積更大,Ⅱ膠原和蛋白多糖含量更多,以3. bar壓力的沖擊波作用效果最佳。在兔膝關(guān)節(jié)軟骨損傷修復(fù)實(shí)驗(yàn)中,兩個(gè)沖擊波組的軟骨損傷區(qū)域修復(fù)組織更多,Ⅱ膠原和蛋白多糖含量更多,細(xì)胞排列更加有序,與周圍組織鏈接更加緊密,以3. bar的沖擊波作用效果最佳。結(jié)論:1.發(fā)散式?jīng)_擊波在體內(nèi)具有促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的影響。2.沖擊波的促進(jìn)成軟骨作用與能量相關(guān),壓力為3. 0bar時(shí),沖擊波的促進(jìn)成軟骨分化作用優(yōu)于2. 0bar。
[Abstract]:Objective: extracorporeal shock wave can not only increase the expression of vascular endothelial growth factor, increase myocardial perfusion and improve left ventricular remodeling, so as to improve the symptoms of patients with ischemic heart disease and treat ischemic heart disease. Moreover, bone cells can transform mechanical signals into biochemical signals and transmit them to osteoclasts and osteoblasts, which can cause bone reconstruction and treat fracture healing or nonunion, which indicates that shock wave can promote tissue regeneration. However, there are few studies on the effect of shock wave on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells. In this study, bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were stimulated with divergent shock waves with different energy to observe the effect of chondrogenesis, and to explore the effect of shock wave on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in vivo. Methods: bone marrow mesenchymal stem cells were isolated from bone marrow and cultured to P3 generation. The morphology of mesenchymal stem cells was observed by inverted microscope. The expression of surface related antigen and the ability of inducing osteogenic adipogenic differentiation were identified as bone marrow mesenchymal stem cells by flow cytometry. In order to explore the chondrogenic differentiation of stem cells regulated by shock wave, we used subcutaneous cell implantation model in nude mice and cartilage injury in knee joint in New Zealand white rabbits. At first, the nude mice were divided into four groups: control group (implanted with calcium alginate to the subcutaneous of nude mice), stem cell group (implanted with calcium alginate wrapped in stem cells), low energy shock wave group (2.0 barge 200 times 10 Hz shock wave) after stimulation of stem cells. The high energy shock wave group (3.0 bar. after 200 times 10 Hz shock wave stimulated stem cells, encapsulated in calcium alginate into nude mice subcutaneously). The samples were examined for histology 3 and 12 months after planting. Then New Zealand white rabbits were divided into 4 groups to establish the articular cartilage injury model. The cells or scaffolds were transplanted into the cartilage injury zone according to the groups. The same steps of grouping and cell processing were performed in nude mice. The samples were examined by histology 3 months after transplantation. Results: in the experiment of subcutaneous cell implantation in nude mice, the samples of the two shock wave groups were larger than those of the other two groups, and the contents of collagen and proteoglycan were more than those of the other two groups. The effect of shock wave under the pressure of 3. Bar was the best. In the rabbit knee joint cartilage repair experiment, there were more cartilage repair tissues, more collagen and proteoglycan content, more orderly cell arrangement and more close links with surrounding tissues in the two shock wave groups. The shock wave of 3. Bar is the best. Conclusion 1. Divergent shock wave has the effect of promoting the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into chondrocytes in vivo. The promotion of chondrogenesis by shock wave is related to energy, and the pressure is 3. In 0bar, the effect of shock wave on cartilage differentiation was better than that of 2. 0bar.
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R68

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 修忠標(biāo),林建華;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化生物學(xué)的影響因素[J];骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2004年08期

2 鄔波;馬旭;朱大木;劉素媛;王景續(xù);張毅;付愛民;潘梁;;胰島素樣生長因子1對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化及基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的影響[J];中國組織工程研究;2013年19期

3 陳波;張壽;;誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨分化的影響因素研究進(jìn)展[J];海南醫(yī)學(xué);2013年10期

4 王浩;陳森;馬雨洪;姚惟琦;;微小RNA-23a調(diào)控大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年04期

5 付勤;宮樹一;楊禮慶;賈長青;;脂質(zhì)體介導(dǎo)胰島素樣生長因子-1基因修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2008年06期

6 王廣斌;付勤;楊禮慶;付永慧;;不同分離方法對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化的影響(英文)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年38期

7 雍志軍;賈帥軍;韓林章;周翔;戶剛;郝賦;劉建;;富血小板纖維蛋白對兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化的影響[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年08期

8 郭常安,閻作勤,姚振均,霍建中,陳崢嶸;脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長因子-β_1基因修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年04期

9 楊大鑒,黃定強(qiáng),曾曉榮,胥方元;采用三維培養(yǎng)法誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年04期

10 張宇坤;楊述華;孫立;楊操;田洪濤;徐亮;;生長分化生長因子-5在誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化中的作用[J];中華創(chuàng)傷雜志;2006年12期

相關(guān)會(huì)議論文 前3條

1 劉天一;周廣東;魏嫻;陳付國;呂曉杰;劉霞;陳瑾君;崔磊;劉偉;曹誼林;;力學(xué)刺激促進(jìn)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體外軟骨分化[A];第4屆中國美容與整形醫(yī)師大會(huì)論文匯編[C];2007年

2 鄭有華;張志光;蘇凱;匡世軍;;成纖維細(xì)胞生長因子促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨和成軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];第八屆全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及（牙合）學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2011年

3 房維;肖殷;龍星;;軟骨缺損模型體內(nèi)軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];第九次全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及(牙合)學(xué)研討會(huì)論文匯編[C];2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 韓春梅;原癌基因c-myc對馬鹿茸發(fā)育調(diào)控的影響機(jī)制[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 翟志臣;Ⅰ型膠原形態(tài)對細(xì)胞軟骨分化的影響及其機(jī)理研究[D];華南理工大學(xué);2014年

3 王亮;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨及成軟骨分化中長鏈非編碼RNA的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

4 蔣超;血清纖維黏連蛋白促晚期骨關(guān)節(jié)炎患者軟骨下松質(zhì)骨祖細(xì)胞軟骨分化[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

5 楊波;MicroRNA-145在間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化中的作用及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年

6 劉姍姍;7，，8-二羥基香豆素促進(jìn)大鼠脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及成軟骨分化的研究[D];吉林大學(xué);2012年

7 白曉卉;ADAMTS-7和ADAMTS-12抑制軟骨分化的功能研究[D];山東大學(xué);2009年

8 唐仲文;骨不連細(xì)胞體外培養(yǎng)及壓應(yīng)力刺激對其成軟骨分化影響的研究[D];中南大學(xué);2014年

9 王大偉;1、GEP蛋白在骨骼肌分化過程中的功能研究 2、ADAMTS-12抑制軟骨分化的功能研究[D];山東大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊以萌;發(fā)散式?jīng)_擊波對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體內(nèi)成軟骨分化影響[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2017年

2 馮軍宇;周期性動(dòng)態(tài)壓縮應(yīng)力對海藻酸鈉立體培養(yǎng)敲減SOX9基因骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

3 昝昀;慢病毒介導(dǎo)Pannexin3基因促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

4 趙永亮;不同時(shí)期離心力對小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

5 曹學(xué)書;Toll樣受體-3和-4對干細(xì)胞成軟骨分化的影響及機(jī)制[D];江蘇大學(xué);2016年

6 汪建樣;GDF-5聯(lián)合淫羊藿素誘導(dǎo)BMSCs向類軟骨細(xì)胞分化及機(jī)制的研究[D];南昌大學(xué);2016年

7 薛婧晨;改性氨基葡萄糖誘導(dǎo)ATDC5細(xì)胞向軟骨分化的研究[D];華南理工大學(xué);2016年

8 謝金碩;Kartogenin對滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化以及兔軟骨缺損修復(fù)的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

9 王志寬;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與Buffy coat體外軟骨分化的比較分析[D];延邊大學(xué);2017年

10 張航;過量全反式視黃酸在小鼠腭裂誘發(fā)中對軟骨分化的影響及作用機(jī)制[D];鄭州大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2209765