本文選題：HPK + 過表達(dá)�。� 參考：《鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年05期

【摘要】：目的:檢測造血祖細(xì)胞激酶1(HPK1)在人非特異型浸潤性乳腺癌組織及乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá),并構(gòu)建HPK1慢病毒載體以探究HPK1過表達(dá)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響。方法:采用Western blot檢測48例乳腺癌組織和配對(duì)癌旁組織中HPK1蛋白的表達(dá),采用Western blot、RT-PCR法檢測正常乳腺上皮細(xì)胞(MCF10A)和乳腺癌MCF-7細(xì)胞中HPK1的表達(dá)水平。PCR擴(kuò)增HPK1序列,構(gòu)建慢病毒p CDH-HPK1-puro重組載體,包裝病毒、轉(zhuǎn)染MCF-7細(xì)胞(過表達(dá)組),以感染空載體病毒的MCF-7細(xì)胞作為對(duì)照組,分別采用Western blot、RT-PCR檢測2組細(xì)胞HPK1的表達(dá)水平,MTT法檢測細(xì)胞增殖能力的變化,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期。結(jié)果:與癌旁組織相比,HPK1蛋白在乳腺癌組織中低表達(dá)(P=0.036)。與MCF10A細(xì)胞相比,HPK1蛋白及mRNA在MCF-7細(xì)胞中低表達(dá);與對(duì)照組相比,過表達(dá)組中HPK1蛋白及mRNA的表達(dá)水平上調(diào),細(xì)胞增殖能力下降,細(xì)胞凋亡率升高,G0/G1期細(xì)胞比例升高(P均0.05)。結(jié)論:HPK1在乳腺癌組織及細(xì)胞中低表達(dá),HPK1過表達(dá)可抑制MCF-7細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡,并使細(xì)胞周期阻斷在G0/G1期。
[Abstract]:Aim: to detect the expression of hematopoietic progenitor cell kinase 1 (HPK1) in human non-heterogenous invasive breast cancer and breast cancer cells, and construct HPK1 lentivirus vector to investigate the effect of HPK1 overexpression on proliferation and apoptosis of human breast cancer cells. Methods: the expression of HPK1 protein was detected by Western blot in 48 breast cancer tissues and matched adjacent tissues. The expression level of HPK1 in normal breast epithelial cells (MCF10A) and breast cancer MCF-7 cells was detected by RT-PCR. The recombinant vector of lentivirus pCDH-HPK1-puro was constructed, and the vector was packaged and transfected into MCF-7 cells (overexpression group). MCF-7 cells infected with empty vector virus were used as control group. The expression level of HPK1 in the two groups was detected by Western blottin RT-PCR and the cell proliferation was detected by MTT assay. Apoptosis and cell cycle were detected by flow cytometry. Results: the expression of HPK1 protein in breast cancer tissues was lower than that in paracancerous tissues (P0. 036). Compared with MCF10A cells, the expression of HPK1 protein and mRNA in MCF-7 cells was lower than that in MCF10A cells, and the expression level of HPK1 protein and mRNA in overexpression group was up-regulated, the cell proliferation ability was decreased, and the percentage of HPK1 protein and mRNA was increased in G0 / G1 phase (P 0.05). Conclusion the overexpression of HPK1 in breast cancer tissues and cells can inhibit the proliferation and induce apoptosis of MCF-7 cells and block the cell cycle in G _ 0 / G _ 1 phase.
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院超聲科;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院生物細(xì)胞治療中心;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院綜合ICU;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部;
【基金】：科技部科技惠民計(jì)劃專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目2013GS410101 河南省重大科技專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目151100310800
【分類號(hào)】：R737.9

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本文編號(hào)：2080591