本文選題：生長板 + 軟骨細胞��； 參考：《華中科技大學》2015年博士論文

【摘要】：目的： 1.探討不同強度下張應力對生長板軟骨細胞的作用,對增值和凋亡的影響。并初步研究周期性張應力對生長板軟骨細胞Hippo信號通路的影響。 2.檢驗大鼠跑臺裝置造大鼠骨關節(jié)炎模型,同時于對照組給予口服環(huán)孢素A觀察藥物干預組能否改善骨關節(jié)炎病變的程度。檢測凋亡相關基因及蛋白的變化 3.建立大鼠運動動物模型,觀察不同強度的運動量對生長板軟骨的影響。 方法： 1.取大鼠生長板軟骨細胞的分離培養(yǎng),采用四點彎曲張力儀給予生長板軟骨細胞不同強度應力刺激。用Annexxin V-FITC/PI染色免疫熒光觀察細胞凋亡,并行流式細胞學檢測細胞凋亡。行Real-time PCR和Western blot檢測增殖和凋亡相關基因的表達和蛋白的變化。 2.采用大鼠跑臺建立骨關節(jié)炎模型并同時設組給予免疫抑制劑CSA干預,用MR和microCT檢測和評估骨關節(jié)炎模型,HE切片觀察骨關節(jié)炎改變,Real-time PCR檢測骨關節(jié)炎相關基因的表達,Western blot檢測骨關節(jié)炎相關蛋白的表達。 3.采用大鼠跑臺建立大鼠運動增殖模型,用microCT檢測運動模型并用HE切片觀察軟骨增殖改變。行.Real-time PCR和Western blot檢測增殖相關基因的表達和蛋白的變化。 結(jié)果 1.在較低的力學強度(2000μ)下生長板軟骨細胞軟骨細胞表達COL2基因以及COL2和SOX9蛋白表達量明顯增加,而RUNX2基因和蛋白表達增加不明顯。中等力學強度時(3000μ、4000μ),生長板軟骨細胞RUNX基因和蛋白的表達量明顯增加,而COL2基因以及COL2和SOX9蛋白表達量較未刺激細胞相比減少。在很高的力學強度刺激時(5000μ、6000μ)細胞MMP13及caspase9的基因表達上調(diào),同時活化的caspase9蛋白表達量也增加。起保護作用的BCL2蛋白表達明顯減少。隨著應力刺激強度的不斷增加,生長板軟骨細胞凋亡不斷增加。同時檢測出在增殖和凋亡時YAP基因和蛋白的高表達。 2.高強度的跑臺運動(大于30km)模型動物可檢測出影像學早期的骨關節(jié)炎改變,HE切片測量軟骨厚度減少,CASPASE9、MMP13、COL2、SOX9基因上調(diào),活化CASPASE9蛋白表達增加,COL2、SOX9以及BCL2蛋白表達減少。CSA可減輕OA影像學表現(xiàn),減輕骨關節(jié)炎程度。同時可降低凋亡相關蛋白的表達。 3.運動可以增加Ki67基因的表達量以及PCNA的基因和蛋白的表達量,并同時上調(diào)SOX9基因的表達和增加SOX9和COL2蛋白的表達量, 結(jié)論 1.較低的力學強度(2000μ)下生長板軟骨細胞分化主要以軟骨增殖趨勢為主。而中等力學強度時(3000μ、4000μ),生長板軟骨細胞主要以成骨分化趨勢為主。很高的力學強度刺激時(5000μ、6000μ)細胞凋亡明顯增加。生長板軟骨細胞的增殖和凋亡可能與YAP的表達相關。 2.高強度的跑臺運動(大于30km)可通過增加關節(jié)軟骨機械應力導致大鼠OA的發(fā)生,骨關節(jié)炎的發(fā)生與軟骨細胞凋亡密切相關。CSA對細胞凋亡有抑制作用,可降低凋亡相關蛋白的表達,減輕骨關節(jié)炎程度。 3.運動可以促進生長板軟骨細胞的增殖,并且在適當?shù)倪\動強度下,隨著運動強度的增加,促進軟骨細胞增殖的作用也在增加。
[Abstract]:Objective:
1. to investigate the effect of tensile stress on growth plate chondrocytes at different intensities, to influence the increment and apoptosis, and to investigate the effect of periodic tensile stress on the Hippo signaling pathway of growth plate chondrocytes.
2. the rat model of rat osteoarthritis was built by the rat running device. At the same time, the control group was given oral cyclosporine A to observe whether the drug intervention group could improve the degree of osteoarthritis. The changes of apoptosis related genes and proteins were detected.
3. a rat model of animal movement was established to observe the effect of different intensity of exercise on growth plate cartilage.
Method錛，

本文編號：1958015