本文選題：抗生素鎖 + 導(dǎo)管相關(guān)感染　； 參考：《長江大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：中心靜脈置管術(shù)以其操作簡單、留置時間長等優(yōu)點廣泛應(yīng)用于臨床,成為急危重病救護(hù)的必要手段之一。但由置管引發(fā)的感染率也呈逐年增加的趨勢,其中表皮葡萄球菌的分離概率高達(dá)60%-80%。導(dǎo)管相關(guān)感染與細(xì)菌容易形成生物膜有很大關(guān)系,生物膜的形成使全身用藥療效較差,患者被迫拔管的機(jī)率大大增加,使患者的治愈率降低,死亡率增加�？股劓i技術(shù)(Antibiotic Lock Technique, ALT)是將高濃度的抗生素注入導(dǎo)管內(nèi),有效清除細(xì)菌生物膜,達(dá)到保留導(dǎo)管目的的一種技術(shù)。但是針對該技術(shù)治療表皮葡萄球菌引起的導(dǎo)管相關(guān)感染的基礎(chǔ)研究相對較少,其使用的有效性、使用時是否產(chǎn)生負(fù)作用以及合適的使用濃度和時間都有待于進(jìn)一步探討。為了揭示這些問題,我們將最易引起導(dǎo)管相關(guān)感染的表皮葡萄球菌產(chǎn)膜陽性菌株ATCC35984作為實驗菌株,常用抗生素頭孢他啶作為ALT抗菌溶液做相關(guān)性研究,希望能為今后臨床開展此技術(shù)治療導(dǎo)管相關(guān)感染提供科學(xué)的理論依據(jù)。目的：第一：通過動物實驗比較ALT與全身用藥治療表皮葡萄球菌引起的導(dǎo)管相關(guān)感染的效果,同時觀測使用ALT是否產(chǎn)生細(xì)菌耐藥、對局部血管有無損傷,由此來確認(rèn)該技術(shù)能否作為治療導(dǎo)管相關(guān)感染的常規(guī)療法。第二：在常規(guī)的藥物濃度范圍內(nèi)和常用的鎖定時間內(nèi),找到滅菌效果最好的藥物溶液濃度和最有效的鎖定時間,為以后臨床使用該技術(shù)提供理論依據(jù)。方法：第一階段：將形成表皮葡萄球菌生物膜的導(dǎo)管植入動物體內(nèi),將動物隨機(jī)分為三組：全身用藥組(A組)每天全身使用頭孢他啶,劑量為100mg/kg×體重,導(dǎo)管內(nèi)注入無菌生理鹽水；導(dǎo)管注藥組(B組)在導(dǎo)管內(nèi)注入0.3m1頭孢他啶-肝素混合液,劑量為7.2mg/ml;聯(lián)合用藥組(C組)既進(jìn)行全身用藥又進(jìn)行導(dǎo)管注藥。三組動物干預(yù)8天后停止干預(yù),三天后拔管。這期間分別在置管后第2、4、6、8、11天采集導(dǎo)管血和外周血。采用稀釋平板計數(shù)法進(jìn)行細(xì)菌定量培養(yǎng),銀染法檢測管腔生物膜情況,比較三種方法清除細(xì)菌生物膜的效果；應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法測定外周血血管性假性血友病因子(von Wilebrand Factor, vWF)的含量比較三組方法對血管內(nèi)皮損傷程度,同時做細(xì)菌定性培養(yǎng)判斷動物是否發(fā)生全身感染；采用紙片擴(kuò)散法對動物體內(nèi)分離出的表皮葡萄球菌做藥敏實驗,判斷細(xì)菌是否對抗生素產(chǎn)生耐藥性。第二階段：采用置片法將含有細(xì)菌生物膜的硅膠薄膜按藥物干預(yù)的不同濃度隨機(jī)分成300倍最低抑菌濃度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)、600倍MIC、900倍MIC三個濃度組,每組在干預(yù)至6h、12h、18h、24h四個時間點取出處理后,通過稀釋平板計數(shù)法進(jìn)行細(xì)菌計數(shù)定量培養(yǎng),交叉比較出ALT最有效的使用時間和使用濃度。所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計均采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件,細(xì)菌計數(shù)結(jié)果使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,統(tǒng)計學(xué)分析的數(shù)據(jù)應(yīng)用LSD-t檢驗、獨立樣本t檢驗,P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：(1)導(dǎo)管血計數(shù)結(jié)果：在干預(yù)期間,B組和C組細(xì)菌計數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異,但與A組之間有顯著性差異,p均0.000；停止干預(yù)時,A組計數(shù)仍居高不下,B組和C組共有9只動物計數(shù)結(jié)果為0(其中B組4只占66.67%,C組5只占83.3%)；停止干預(yù)后,B組和C組在停止干預(yù)時計數(shù)結(jié)果為0的9只動物在停止干預(yù)后仍為0。(2)外周血定性培養(yǎng)結(jié)果：未進(jìn)行干預(yù)前,三組外周血定性培養(yǎng)均為陰性；干預(yù)第2天,A組3例陽性、B組和C組無陽性；干預(yù)第4天,A組4例陽性、B組1例陽性、C組無陽性；干預(yù)第6天,A組5例陽性、B組1例陽性、C組無陽性。干預(yù)停止時A組全部呈現(xiàn)陽性、B組2例陽性、C組無陽性；在停止干預(yù)后,B組仍然2例陽性、C組出現(xiàn)1例陽性。(3)導(dǎo)管處理結(jié)果：計數(shù)結(jié)果顯示：B組和C組的共有9個標(biāo)本的細(xì)菌計數(shù)結(jié)果為0(其中B組4個C組5個,總計75%),其余標(biāo)本平均計數(shù)結(jié)果則達(dá)到51ogcfu/ml；銀染結(jié)果顯示：A組的留置針管腔內(nèi)呈現(xiàn)出黑色相連的絮狀物與菌膜分界不清；B組和C藥組中未完全清除生物膜的導(dǎo)管內(nèi)可見明顯的斑塊和少量聚集成團(tuán)的絮狀物；已完全清除生物膜的導(dǎo)管內(nèi)沒有明顯的黑色團(tuán)塊和斑點。(4)vWF結(jié)果：置管后第2天,A組vWF含量顯著高于B、C組,隨著置管時間延長,三組vWF含量均逐漸升高,且A組vWF含量仍然顯著高于B、C組,差異性有統(tǒng)計學(xué)意義,p0.001；停止干預(yù)后,A、B、C組vWF含量持續(xù)升高,三組之間vWF含量均有統(tǒng)計學(xué)差異,p0.001。(5)耐藥性檢測：三組都沒有出現(xiàn)耐藥。(6)不同濃度下最有效時間：300倍MIC干預(yù)下的硅膠薄膜細(xì)菌計數(shù)與對照組無顯著差異；600倍MIC干預(yù)下的硅膠薄膜細(xì)菌在18h的計數(shù)結(jié)果出現(xiàn)顯著性差異,P0.001；900倍MIC干預(yù)下的硅膠薄膜細(xì)菌在12h的計數(shù)結(jié)果出現(xiàn)顯著性差異,P0.001。(7)不同時間下最有效濃度：在相同的鎖定時間內(nèi),經(jīng)300倍MIC干預(yù)后的硅膠薄膜細(xì)菌計數(shù)結(jié)果最高,其次是600倍MIC,900倍MIC干預(yù)后的硅膠薄膜細(xì)菌計數(shù)結(jié)果最低,三組之間均有顯著性差異,P均0.001。結(jié)論：根據(jù)以上研究結(jié)果可得到如下結(jié)論：(1)僅全身用藥不能有效清除細(xì)菌生物膜里的細(xì)菌,而導(dǎo)管注藥和聯(lián)合用藥均能有效地清除生物膜細(xì)菌,即：使用ALT可有效清除生物膜。(2)使用ALT可降低全身感染的發(fā)生,但要合理控制注藥的量以及注意注藥的方法。(3)在ALT的臨床使用過程中,配合全身用藥可更加有效的防治全身感染。(4)若導(dǎo)管內(nèi)細(xì)菌生物膜已完全被清除,在短期內(nèi)不會引起再次感染,若導(dǎo)管內(nèi)細(xì)菌生物膜未被完全清除,在停止干預(yù)后仍然有復(fù)發(fā)的可能。(5)在正確使用ALT的前提下,不會損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞,在短期內(nèi)且不會引起細(xì)菌耐藥。(6)300倍MIC作為ALT溶液不能有效清除細(xì)菌生物膜,而600倍和900倍MIC的溶液均具有良好的清除細(xì)菌生物膜的作用。且在相同的鎖定時間內(nèi),濃度越高,其清除生物膜的能力越強,效果越好。(7)600倍MIC作為ALT溶液,鎖定18小時效果最好；900倍MIC作為ALT溶液,鎖定12小時效果最好。因此,在今后的臨床應(yīng)用中,若以600倍和900倍MIC作為ALT溶液,在治療允許的情況下建議分別鎖定18小時和12小時,以最大程度的清除細(xì)菌生物膜。
[Abstract]:In order to reveal these problems , we can find out whether the technology can be used as a conventional therapy for treating catheter - related infections .
The catheter blood and peripheral blood were collected in three groups after 8 days of intervention and three days later . The results of bacterial quantitative culture , silver staining and silver staining were used to detect the biofilm in the lumen and the effect of three methods on bacterial biofilm was compared .
Using enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) to determine the vascular endothelial cell damage degree , the degree of vascular endothelial injury was determined by three groups of methods , while bacterial qualitative training was used to determine whether systemic infection occurred in animals .
The results were as follows : ( 1 ) The results were as follows : ( 1 ) The results showed that : ( 1 ) There was no statistical difference between group B and C group during the intervention period , but there was significant difference between group B and group C , p = 0.000 ;
When the intervention was stopped , the count of group A remained high , there were 9 animal counts in group B and C group ( 66.67 % in group B and 83.3 % in group C ) .
After stopping the intervention , 9 animals in group B and group C counted as 0 after stopping intervention were still 0 . ( 2 ) peripheral blood qualitative culture results after stopping intervention : before intervention , all three groups of peripheral blood were negative ;
in group A , 3 were positive , group B and C were not positive in group A ;
The 4th day of intervention , 4 positive in group A , 1 in group B and no positive in group C ;
At the 6th day of intervention , 5 cases were positive in group A , 1 in group B and no positive in group C . All groups were positive in group A and 2 in group B were positive in group B .
After stopping the intervention , there were 2 positive cases in group B and 1 positive in group C . ( 3 ) The results showed that the bacterial count of 9 specimens in group B and C was 0 ( 5 of 4 C groups in group B and 75 % in total ) , and the average count of remaining samples reached 51ogcfu / ml ;
The results of silver staining showed that the black - connected flocs in the indwelling needle lumen of group A were not clear .
In group B and group C , there were obvious plaques and small aggregates of flocs in the catheter without completely clearing the biofilm ;
There were no significant black lumps and spots in the catheter which had completely cleared the biofilm . ( 4 ) The results were as follows : ( 4 ) There was a significant difference in the levels of the levels of the levels in the group A and the group C after the treatment . The content in group A was significantly higher than that in group B and C , and the content of the A in group A was still significantly higher than that in group B and C . The difference was significant , p 0.001 ;
There was no significant difference between the two groups . ( 6 ) There was no significant difference between the bacterial count of silica gel membrane and the control group at the different concentration .
The results showed that there was a significant difference in the bacterial count of silica gel membrane bacteria at 600 times MIC intervention ( P < 0.01 ) .
The results showed that : ( 1 ) In the course of clinical use of ALT , the bacterial biofilm could not be effectively removed by using ALT .
As an ALT solution , 900 - fold MIC was best used to lock the 12 - hour effect . Therefore , in future clinical applications , if 600 - fold and 900 - fold MIC were used as ALT solutions , it was recommended to lock for 18 and 12 hours , respectively , in the case of treatment , to minimize bacterial biofilm .
【學(xué)位授予單位】：長江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R654.3

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本文編號：1949481