TLR7對(duì)瘢痕疙瘩形成中Smad信號(hào)通路的調(diào)控作用研究
本文選題:瘢痕疙瘩 + Toll樣受體 ; 參考:《浙江大學(xué)》2016年碩士論文
【摘要】:目的研究Smads與TLR7的相關(guān)性,探討TLR7對(duì)癜痕疙瘩形成中Smad信號(hào)通路的調(diào)控作用,以及對(duì)瘢痕疙瘩形成的影響。方法體外培養(yǎng)人成纖維細(xì)胞,使用TLR7激動(dòng)劑Gardiquimod激動(dòng)人成纖維細(xì)胞TLR7受體后,采用Western Blot方法檢測(cè)Smad通路主要相關(guān)蛋白,即Smad4、7蛋白表達(dá)變化情況。通過向裸鼠皮下移植瘢痕疙瘩組織構(gòu)建瘢痕疙瘩裸鼠模型,在動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)水平,使用TLR7激動(dòng)劑Gardiquimod皮下注射處理后,采用Western Blot方法檢測(cè)Smad4,7蛋白表達(dá)變化情況,Western Blot各組凝膠印跡成像相對(duì)灰度值采用單因素方差分析、LSD-t檢驗(yàn)、SNK-q檢驗(yàn),P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)移植物處理后樣本進(jìn)行組織學(xué)觀察,切片染色主要采用蘇木精-伊紅染色法(HE)染色和Masson染色。結(jié)果與對(duì)照組相比,人成纖維細(xì)胞體外使用TLR7激動(dòng)處理后,Smad4、7蛋白表達(dá)未見明顯改變。與對(duì)照組相比,在瘢痕疙瘩裸鼠模型中使用TLR7激動(dòng)處理后,瘢痕疙瘩內(nèi)Smad4蛋白表達(dá)未見明顯改變;但是Smad7蛋白表達(dá)明顯增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);組織學(xué)觀察顯示:與對(duì)照組相比,瘢痕疙瘩裸鼠模型使用TLR7激動(dòng)處理抑制了瘢痕疙瘩組織在裸鼠體內(nèi)的萎縮。結(jié)論在體外細(xì)胞培養(yǎng)中,激動(dòng)成纖維細(xì)胞TLR7并不直接影響Smad4、7蛋白的表達(dá);在瘢痕疙瘩裸鼠模型中,激動(dòng)TIR7不影響瘢痕疙瘩Smad4蛋白表達(dá),但可上調(diào)瘢痕疙瘩Smad7的表達(dá),同時(shí)對(duì)瘢痕疙瘩的萎縮具有抑制作用。
[Abstract]:Objective to study the relationship between Smads and TLR7, and to investigate the regulation of Smad signal pathway in the formation of keloid and the effect of TLR7 on keloid formation. Methods Human fibroblasts were cultured in vitro. Human fibroblast TLR7 receptor was stimulated by TLR7 agonist Gardiquimod. The expression of Smad4P7 protein was detected by Western Blot method. Keloid model of nude mice was established by subcutaneous transplantation of keloid into nude mice. The experimental level of keloid was treated by subcutaneous injection of TLR7 agonist Gardiquimod in vivo. The expression of Smad4T7 protein was detected by Western Blot method. There was significant difference in relative grayscale value of gel blotting imaging in each group with single factor analysis of variance (ANOVA) and SNK-q test (P0.05). Histopathological observation was carried out on the grafts. The sections were stained mainly by hematoxylin-eosin staining and Masson staining. Results compared with the control group, the expression of Smad4 F7 protein in human fibroblasts treated with TLR7 in vitro did not change significantly. Compared with the control group, the expression of Smad4 protein in keloid was not significantly changed after TLR7 stimulation, but the expression of Smad7 protein was increased significantly in keloid nude mice. The histological observation showed that compared with the control group, keloid nude mice model treated with TLR7 inhibited the atrophy of keloid tissue in nude mice. Conclusion in vitro cell culture, TLR7 does not directly affect the expression of Smad4F7 protein in keloid nude mice, but agitated TIR7 does not affect the expression of keloid Smad4 protein, but can up-regulate the expression of keloid Smad7 in keloid nude mice. At the same time, it can inhibit the atrophy of keloid.
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R622
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,本文編號(hào):1862559
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