本文選題：大骨節(jié)病 + 硒元素��； 參考：《西北大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：大骨節(jié)病是一種地方性、變形性骨關(guān)節(jié)病,對(duì)兒童的生長(zhǎng)和發(fā)育有嚴(yán)重的影響,具有相當(dāng)高的患病率和致殘率,目前其病因假說(shuō)主要集中于環(huán)境因素探討,包括真菌毒素中毒說(shuō)、低硒學(xué)說(shuō)等,具體致病機(jī)制目前還不清楚。本實(shí)驗(yàn)采用從青海大骨節(jié)病區(qū)穗期小麥中分離出的優(yōu)勢(shì)內(nèi)生鐮刀菌,聯(lián)合硒對(duì)鐮刀菌的影響,將不同硒水平下培養(yǎng)鐮刀菌得到的發(fā)酵產(chǎn)物作用于體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞,通過(guò)MTT法、甲苯胺藍(lán)和免疫組化染色法、RT-PCR法檢測(cè)軟骨細(xì)胞病變的相關(guān)生理指標(biāo)。結(jié)果顯示,三株鐮刀菌發(fā)酵產(chǎn)物均能明顯降低細(xì)胞存活率；同時(shí)也顯著減少Ⅱ型膠原和蛋白聚糖的合成及抑制其mRNA的轉(zhuǎn)錄水平；適宜濃度硒條件下培養(yǎng)菌株所獲發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)蛋白聚糖和Ⅱ型膠原蛋白合成的抑制作用比無(wú)硒的小。對(duì)于5-5-1菌株和6-5-1菌株,當(dāng)硒濃度高于0.5mg/L時(shí)抑制反而增大；對(duì)于1-8-B菌株,硒濃度高于0.5mg/L時(shí),相比較低硒濃度時(shí),發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)這兩種蛋白合成的抑制作用大,但相比無(wú)硒的抑制作用略小。取上述三株菌中產(chǎn)T-2毒素的5-5-1菌株,將不同濃度的T-2毒素和5-5-1菌株發(fā)酵產(chǎn)物作用于體外培養(yǎng)的兔軟骨細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,二者均能降低軟骨細(xì)胞存活率,明顯抑制蛋白聚糖和Ⅱ型膠原的合成及其mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。相比純T-2毒素,含有類(lèi)似T-2毒素含量的5-5-1菌株發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞存活率、抑制蛋白聚糖和Ⅱ型膠原的合成及mRNA的轉(zhuǎn)錄水平的抑制作用更大。結(jié)果顯示三株實(shí)驗(yàn)菌的發(fā)酵產(chǎn)物都能夠使軟骨細(xì)胞發(fā)生類(lèi)似大骨節(jié)病的病變特征,相比無(wú)硒條件培養(yǎng)的鐮刀菌,添加適宜濃度硒培養(yǎng)菌株得到的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)軟骨細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)的抑制作用相對(duì)較小,且含有同樣T-2毒素含量的5-5-1菌株發(fā)酵產(chǎn)物比純T-2毒素對(duì)軟骨細(xì)胞的抑制作用更大,結(jié)果提示,適宜濃度硒可能抑制了菌株的產(chǎn)毒能力,從而減輕其發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞的毒性作用；鐮刀菌毒素對(duì)軟骨細(xì)胞的毒害可能是多種真菌毒素綜合作用的結(jié)果。
[Abstract]:Kashin Beck disease is a local, deformable osteoarthropathy, which has a serious influence on the growth and development of children. It has a high morbidity and disability rate. At present, the hypothesis of etiology is mainly focused on the environmental factors, including the theory of mycotoxin poisoning, the theory of low selenium and so on. The pathogenesis of the disease is not yet clear. This experiment was used from Qinghai. The predominant endophytic Fusarium in the ear stage of the Kaschin Beck disease area, combined with the effect of selenium on the Fusarium, acted on the cultured chondrocytes cultured in vitro by the fermentation products obtained from different selenium levels, by MTT method, toluidine blue and immunohistochemical staining, and RT-PCR method to detect the related physiological indexes of chondrocyte disease. The results showed that the fermentation products of three Fusarium strains could obviously reduce the cell survival rate, and also significantly reduce the synthesis of type II collagen and proteoglycan and inhibit the transcriptional level of mRNA. The inhibitory effect of fermentation products on the synthesis of proteoglycan and type II collagen egg white under the suitable concentration of selenium condition is smaller than that of the selenium free. For 5- 5-1 strains and 6-5-1 strains, when the selenium concentration is higher than 0.5mg/L, the inhibition increases; for the 1-8-B strain, the selenium concentration is higher than the 0.5mg/L, when the selenium concentration is higher than the selenium concentration, the inhibition effect of the fermentation product on the two proteins is large, but the inhibition effect is slightly smaller than that of the selenium free. The 5-5-1 strain of the T-2 toxin of the three strains of the above three strains will have different concentrations. The fermentation products of T-2 toxin and 5-5-1 strain acted on the rabbit chondrocytes cultured in vitro. The results showed that the two groups could reduce the survival rate of cartilage cells, inhibit the synthesis of proteoglycan and type II collagen and the transcriptional level of mRNA. Compared with pure T-2 toxin, the fermentation products containing 5-5-1 strain, similar to T-2 toxin, survived the cell survival. Rate, inhibition of the synthesis of proteoglycan and type II collagen and the inhibition of the transcriptional level of mRNA, the results showed that the fermentation products of three strains of experimental bacteria could make chondrocytes similar to the disease characteristics of Kaschin Beck disease. Compared with the selenium free Fusarium, the fermentation products with suitable concentration selenium culture strain were fine to the cartilage. The inhibitory effects of cell related indexes were relatively small, and the fermentation products containing the same T-2 toxin content were more inhibited than the pure T-2 toxin on chondrocytes. The results suggest that the suitable concentration of selenium may inhibit the toxicity of the strain, thus reducing the toxicity of the fermentation products to the cells, and the Fusarium toxin is fine to the cartilage. Cytotoxicity may be the result of the combined action of various mycotoxins.

【學(xué)位授予單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R684.1

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3 張e，

本文編號(hào)：1858211