本文選題：骨缺損 + β-磷酸三鈣�。� 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：研究背景:骨缺損通常由創(chuàng)傷、炎癥感染、腫瘤等疾病引起,治療的方法主要有自體骨、異體骨移植和骨組織工程技術(shù)等治療手段。但都存在相應(yīng)的并發(fā)癥,限制了它們的應(yīng)用。自體骨移植的來源有限、會(huì)增加病人的手術(shù)創(chuàng)傷;異體骨移植會(huì)傳播疾病和發(fā)生排斥反應(yīng);利用骨組織工程技術(shù)制造新生骨用來修復(fù)骨缺損是近年來的一大熱點(diǎn),但傳統(tǒng)的骨組織工程技術(shù)主要通過生物反應(yīng)器將種子細(xì)胞、生長(zhǎng)因子、支架材料在體外培養(yǎng)構(gòu)建新生骨。構(gòu)建的新生骨由于不具備正常骨組織的血管和組織結(jié)構(gòu),植入機(jī)體后容易導(dǎo)致骨缺損修復(fù)不全或失敗。越來越多的科研工作者和臨床醫(yī)生將目光轉(zhuǎn)向體內(nèi)骨組織工程技術(shù),體內(nèi)骨組織工程利用機(jī)體自身促骨再生能力構(gòu)建新生骨,用于骨缺損的修復(fù)。但目前的體內(nèi)骨組織工程構(gòu)建方法仍然較為繁瑣,通常需要額外應(yīng)用種子細(xì)胞和生長(zhǎng)因子,無法高效、便捷的構(gòu)建組織工程骨。因此,如何利用合適的構(gòu)建方法,如何尋找合適的解剖部位簡(jiǎn)單、高效的構(gòu)建出體內(nèi)組織工程骨是當(dāng)今骨組織工程急需解決的一大難題。目的:通過骨組織工程的原理在新西蘭大白兔體內(nèi)構(gòu)建出兩種不同的新型體內(nèi)生物反應(yīng)器模型:多功能體內(nèi)骨發(fā)生器。并對(duì)兩種多功能體內(nèi)骨發(fā)生器的新骨形成能力及支架材料降解情況進(jìn)行比較,選擇一種最優(yōu)的多功能體內(nèi)骨發(fā)生器,為其進(jìn)一步應(yīng)用于臨床大段骨缺損的修復(fù)打下基礎(chǔ)。方法:1.多功能體內(nèi)骨發(fā)生器的多孔殼式接骨板的制備:通過CAD設(shè)計(jì)多功能體內(nèi)骨發(fā)生器的多孔殼式接骨板的三維數(shù)據(jù),如孔徑大小、孔間距、長(zhǎng)度等數(shù)據(jù),利用3D打印機(jī)制備鈦合金(Ti6Al4V)的多孔殼式接骨板。2.選取成年新西蘭大白兔36只,體重3±0.5公斤,均為雌性,隨機(jī)分為A組和B組。每組設(shè)4周、8周、12周3個(gè)觀察時(shí)間節(jié)點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)分配6只新西蘭大白兔。在新西蘭大白兔的右側(cè)股骨外側(cè)作一長(zhǎng)約4cm的平行股骨長(zhǎng)軸切口,鈍性分離肌肉,暴露股骨,A組實(shí)驗(yàn)兔采用直徑為1mm的醫(yī)用電鉆制造2個(gè)貫穿股骨干的圓形缺損,間距為5mm。B組實(shí)驗(yàn)兔單純的在股骨膜上作一長(zhǎng)為7mm的切口,稍稍掀開骨膜。利用醫(yī)用鋼絲將鈦合金多孔殼式接骨板固定在股骨干周圍,多孔殼式接骨板與股骨干之間的空隙填充直徑為1.0mm-2.5mm的多孔β-磷酸三鈣(β-TCP)顆粒。觀察時(shí)間節(jié)點(diǎn)為術(shù)后的4周、8周、12周。檢測(cè)方法主要為:大體形態(tài)觀察、X線檢測(cè)、熒光雙標(biāo)、Micro-CT和組織病理學(xué)染色檢測(cè)。結(jié)果:(1)術(shù)后有一只新西蘭大白兔由于麻醉劑反應(yīng)死亡,補(bǔ)做一只作為補(bǔ)充。其余所有新西蘭大白兔均未出現(xiàn)明顯的炎癥反應(yīng),切口愈合良好。術(shù)后的X線結(jié)果顯示多功能體內(nèi)骨發(fā)生器牢固固定在股骨周圍。(2)標(biāo)本大體觀察可見纖維組織包裹多功能體內(nèi)骨發(fā)生器,并通過多功能體內(nèi)骨發(fā)生器表面的微孔向內(nèi)長(zhǎng)入,未見明顯的材料漏出。(3)影像學(xué)結(jié)果:Micro-CT通過定量的分析多功能體內(nèi)骨發(fā)生器的新骨形成發(fā)現(xiàn),隨著時(shí)間的增加,兩組的新生骨量均增加,但A組在8周、12周的新生骨量較B組多,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。材料降解方面,在4周和8周時(shí)兩組材料降解無明顯差異,在12周時(shí)A組的殘余材料量較B組少(P0.05)。(4)組織學(xué)結(jié)果:熒光雙標(biāo)結(jié)果示鈣鹽沉積首先發(fā)生在靠近股骨干處,并向多孔殼式接骨板處延伸,在12周時(shí),A組的鈣鹽沉積速率要高于B組(P0.05)。Von-Gieson染色(VG染色)顯示,A組和B組在4周時(shí)多功能體內(nèi)骨發(fā)生器的新生骨主要圍繞在股骨干周圍生長(zhǎng),靠近多孔殼式接骨板處有大量的纖維結(jié)締組織生成,隨著時(shí)間的推移,新生骨逐漸向多孔殼式接骨板處生長(zhǎng),纖維結(jié)締組織逐漸減少。在12周時(shí),A組可見新生骨長(zhǎng)滿整個(gè)多功能體內(nèi)骨發(fā)生器,無纖維結(jié)締組織生長(zhǎng),新生骨量較同時(shí)期的B組多(P0.05)。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兩種基于直徑為1mm-2.5mm的β-磷酸三鈣顆粒的多功能體內(nèi)骨發(fā)生器能夠利用機(jī)體自身的有利環(huán)境制造出新生骨,且不需要額外的應(yīng)用干細(xì)胞和生長(zhǎng)因子等物質(zhì)。通過股骨干制造貫穿型缺損構(gòu)建的多功能體內(nèi)骨發(fā)生器較單純掀開股骨骨膜構(gòu)建的多功能體內(nèi)骨發(fā)生器具有更好的骨誘導(dǎo)和骨傳導(dǎo)能力,更有利于新骨形成。
[Abstract]:In this paper , the bone tissue engineering technique is used to construct the new bone in vivo . The results were as follows : ( 1 ) There was no significant difference between the two groups of bone generators in group A and B ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R687.3

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本文編號(hào)：1828246