本文選題：骨肉瘤 + 腫瘤干細胞　； 參考：《細胞與分子免疫學(xué)雜志》2017年06期

【摘要】：目的確定從人骨肉瘤U2OS細胞群中分離培養(yǎng)的腫瘤干細胞中微小RNA-34a(miR-34a)的水平變化,并確定其在腫瘤干細胞成瘤性、干性維持中的作用。方法采用無血清培養(yǎng)法從U2OS細胞系中富集具有自我更新能力的腫瘤干細胞亞群,實時定量PCR檢測miR-34a的水平;轉(zhuǎn)染miR-34a模擬物(miR-34a mimics)或SOX2短發(fā)夾RNA(shRNA)后,Western blot法檢測miR-34a靶蛋白性別決定區(qū)Y盒2(SOX2)蛋白水平,腫瘤干細胞微球形成實驗檢測自我更新能力,軟瓊脂成瘤實驗檢測miR-34a對腫瘤干細胞體外成瘤能力的影響,TranswellTM遷移實驗檢測miR-34a對腫瘤干細胞遷移能力的影響。結(jié)果骨肉瘤腫瘤干細胞中miR-34a水平降低;轉(zhuǎn)染miR-34a mimics和轉(zhuǎn)染SOX2 shRNA(sh SOX2)均降低SOX2蛋白水平,并降低腫瘤干細胞的自我更新能力、體外成瘤活性及遷移能力。結(jié)論骨肉瘤腫瘤干細胞中的miR-34a具有降低干細胞自我更新能力、成瘤性和遷移能力的作用。
[Abstract]:Objective to determine the changes in the level of small RNA-34a (miR-34a) in the human osteosarcoma U2OS cell group, and to determine its role in the tumorigenicity and dry maintenance of the tumor stem cells. Methods the serum-free culture method was used to enrich the subgroup of tumor stem cells with self renewal ability from the U2OS cell line, and the quantitative PCR was quantified in real time. The level of miR-34a was detected; after transfection of miR-34a analogue (miR-34a mimics) or SOX2 short hairpin RNA (shRNA), Western blot method was used to detect Y box 2 (SOX2) protein level of miR-34a target protein, and the ability of tumor stem cell microspheres to test self renewal and the ability of tumor stem cells to be tumorigenic in vitro by soft agar test Influence, TranswellTM migration test detected the effect of miR-34a on the migration ability of tumor stem cells. Results the level of miR-34a in osteosarcoma stem cells decreased; miR-34a mimics transfected and transfected SOX2 shRNA (SH SOX2) decreased the level of SOX2 protein, and reduced the self-renewal ability of tumor stem cells, the tumor activity and migration ability in vitro. MiR-34a in sarcoma tumor stem cells can reduce the self-renewal ability, tumorigenicity and migration ability of stem cells.

【作者單位】： 重慶三峽醫(yī)藥高等�？茖W(xué)校病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;重慶三峽醫(yī)藥高等�？茖W(xué)校基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部病理學(xué)教研室;重慶三峽醫(yī)藥高等�？茖W(xué)校臨床醫(yī)學(xué)系;成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院;
【基金】：重慶三峽醫(yī)藥高等專科學(xué)校校級苗圃工程(2016mpxz19) 重慶市衛(wèi)計委中醫(yī)項目(zy201602100) 四川省科技支撐項目(2016FZ0093)
【分類號】：R738

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本文編號：1802013