本文選題：膝骨關(guān)節(jié)炎 + 高遷移率族蛋白B-1��； 參考：《新疆醫(yī)科大學(xué)》2015年博士論文

【摘要】：目的:評估原發(fā)性膝骨關(guān)節(jié)炎(OA)患者臨床癥狀、膝關(guān)節(jié)X線改變及兩者之間的關(guān)系;觀察膝OA患者膝關(guān)節(jié)滑膜細胞上高遷移率族蛋白B1(HMGB1)表達及分布情況,初步探討滑膜細胞表達的HMGB1在膝OA疾病發(fā)展中的作用;分析膝OA患者滑液HMGB1水平與臨床癥狀、滑膜病理改變之間的關(guān)系,探討膝OA患者滑液HMGB1水平能否作為反映疾病嚴重程度的生物學(xué)標記物,為早期診斷膝OA提供新方法。方法:納入滿足標準的原發(fā)性膝OA患者74例,采用WOMAC評分量表評估手術(shù)前患者膝關(guān)節(jié)疼痛、僵硬及日�；顒忧闆r;采用KL分級評估膝關(guān)節(jié)X線改變的嚴重程度。膝OA組根據(jù)KL分級分為KL2/3組(中度病變組)和KL4組(重度病變組)兩個亞組。對照組為34例同一時期因外傷引起交叉韌帶斷裂或半月板撕裂需要關(guān)節(jié)鏡下治療的患者,對照組無OA病史,膝關(guān)節(jié)影像學(xué)X檢查正常。光鏡下從襯里層增生、血管內(nèi)膜下細胞密度和炎癥細胞浸潤三個方面對滑膜病變進行評分來評價滑膜炎嚴重程度;采用免疫組化技術(shù)觀察HMGB1在滑膜細胞核內(nèi)、外的分布情況,計算核外HMGB1染色陽性的滑膜細胞比例;采用蛋白印跡法(Western Blot)測定滑膜HMGBl蛋白相對水平;采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定滑液HMGB1含量。運用SPSS21.0統(tǒng)計軟件對實驗結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果:Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)KL分級與WOMAC總分及日�；顒釉u分存在顯著相關(guān)性,與疼痛和僵硬評分無顯著相關(guān)性;HE染色顯示:對照組30例和OA組4例滑膜為正�；�;對照組4例和OA組40例滑膜為輕度滑膜炎;OA組30例滑膜為重度滑膜炎,兩組患者滑膜炎評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)�；っ庖呓M化顯示:對照組滑膜細胞HMGB1主要表達在細胞核內(nèi),而OA組滑膜細胞HMGB1則呈現(xiàn)出核內(nèi)、外及胞外表達;進一步計數(shù)發(fā)現(xiàn)HMGB1表達陽性的滑膜細胞比例OA組高于對照組(42.5%vs 39.7%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);核外HMGB1表達陽性的滑膜細胞比例OA組高于對照組(24.0%vs 5.7%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);Western Blot和ELISA結(jié)果表明OA組滑膜和滑液HMGB1水平均高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),在OA亞組中,KL2/3組滑膜和滑液HMGB1的水平均高于KL4組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)OA患者滑液HMGB1水平與滑膜炎、疼痛及日常活動評分呈顯著正相關(guān),與關(guān)節(jié)僵硬評分無顯著相關(guān)。結(jié)論:膝OA患者關(guān)節(jié)功能可能主要受到關(guān)節(jié)局部病變的影響,而膝OA疼痛和僵硬的機制復(fù)雜,可能是局部和全身多種因素共同作用的結(jié)果;膝OA患者滑膜和滑液的HMGB1均過度表達,滑膜細胞表達的HMGB1可能作為一種新的促炎因子參與了膝OA疾病的發(fā)生發(fā)展,且主要在疾病的早中期發(fā)揮作用�；褐械腍MGB1的水平可能可以作為反映膝OA嚴重程度的生物學(xué)標志物。
[Abstract]:Objective: to evaluate the clinical symptoms, X-ray changes of knee joint and the relationship between them in patients with primary knee osteoarthritis (OAA), and to observe the expression and distribution of high mobility group protein B1HMGB1 on synovial cells of knee joint in patients with knee osteoarthritis. To explore the role of HMGB1 expressed by synovial cells in the development of knee OA disease, to analyze the relationship between the level of HMGB1 in synovial fluid and clinical symptoms and pathological changes of synovial membrane in patients with knee OA. To explore whether the level of HMGB1 in synovial fluid of knee OA patients can be used as a biological marker to reflect the severity of the disease and to provide a new method for early diagnosis of knee OA. Methods: 74 patients with primary knee OA who met the criteria were assessed with WOMAC scale before operation for knee joint pain, stiffness and daily activities, and KL grade was used to evaluate the severity of knee X-ray changes. According to KL grade, OA group was divided into two subgroups: KL2/3 group (moderate lesion group) and KL4 group (severe lesion group). The control group was 34 patients with cruciate ligament rupture or meniscus tear due to trauma in the same period. The control group had no history of OA and the X ray examination of knee joint was normal. In order to evaluate the severity of synovitis, the severity of synovitis was evaluated by grading synovial lesions from three aspects of lining layer proliferation, subintimal cell density and inflammatory cell infiltration under light microscope, and the distribution of HMGB1 in and out of synovial nucleus was observed by immunohistochemical technique. The percentage of synovial cells with positive HMGB1 staining was calculated, the relative level of HMGBl protein in synovial membrane was measured by Western blot, and the HMGB1 content in synovial fluid was measured by Elisa. The experimental results were statistically analyzed by SPSS21.0 software. Results the KL grade was significantly correlated with the total score of WOMAC and the score of daily activity, but not with the score of pain and stiffness. The results of HE staining showed that 30 cases of control group and 4 cases of OA group had normal synovium. Control group (n = 4) and OA group (n = 40) had mild synovitis and OA group (n = 30) with severe synovitis. The difference of synovitis score between the two groups was statistically significant (P 0.05). The expression of HMGB1 in synovial cells of the control group was mainly in the nucleus, while in the OA group, the expression of HMGB1 in the synovial cells was nuclear, extracellular and extracellular. Further counting showed that the proportion of synovial cells positive for HMGB1 expression in OA group was higher than that in control group (42.5 vs 39.7), the difference was statistically significant (P 0.05), and the proportion of synovial cells with positive expression of HMGB1 in nucleus in OA group was higher than that in control group (24.0% vs 5.7%), and the difference was statistically significant (P 0.05). And ELISA results showed that the levels of HMGB1 in synovium and synovial fluid in OA group were higher than those in control group. The level of HMGB1 in synovium and synovial fluid of KL 2 / 3 group was significantly higher than that of KL4 group. There was a significant positive correlation between HMGB1 level of synovial fluid and synovitis, pain and daily activity score in OA patients. There was no significant correlation with joint stiffness score. Conclusion: the joint function of patients with knee OA may be mainly affected by the local pathological changes of the joint, but the mechanism of pain and stiffness of knee OA is complicated, which may be the result of the joint action of various factors of the local and the whole body. HMGB1 in synovium and synovial fluid of knee OA patients were overexpressed. HMGB1 expressed by synovial cells may be a new pro-inflammatory factor involved in the occurrence and development of knee OA disease, and mainly play a role in the early and middle stage of the disease. The level of HMGB1 in synovial fluid may be used as a biomarker to reflect the severity of knee OA.
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R684.3

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本文編號：1796220