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過表達miR-200c對人髓核細胞凋亡的影響及其機制

發(fā)布時間:2018-04-23 08:54

  本文選題:微小RNA-c + 人髓核細胞; 參考:《山東醫(yī)藥》2017年22期


【摘要】:目的觀察過表達miR-200c對人髓核細胞(HNPCs)凋亡的影響,并探討其可能的作用機制。方法體外培養(yǎng)HNPCs,將HNPCs分為觀察組、陰性組和空白組,觀察組轉(zhuǎn)染hsa-miR-200c mimics,陰性組轉(zhuǎn)染陰性對照mimics-NC,空白組未經(jīng)任何干預。轉(zhuǎn)染后24 h,采用real-time PCR法檢測3組細胞miR-200c的表達,流式細胞儀測算細胞凋亡率,ELISA平板計數(shù)法檢測Caspase3/7活性,Western blotting法檢測3組細胞酪氨酸蛋白激酶受體B(Trk B)蛋白。結(jié)果觀察組、陰性組和空白組細胞miR-200c相對表達量分別為8.11±0.21、1.07±0.04、0.99±0.05,細胞凋亡率分別為23.6%±3.1%、1.5%±0.2%、1.6%±0.1%,Caspase3/7活性分別為299.237±24.245、119.476±10.657、117.317±11.317,Trk B蛋白相對表達量分別為0.48±0.11、0.50±0.12、0.15±0.06,觀察組與陰性組、空白組比較,P均0.01。結(jié)論過表達miR-200c能夠促進HNPCs的凋亡,其機制可能與調(diào)控Trk B的表達有關。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of overexpression of miR-200c on apoptosis of human nucleus pulposus cells (HNPCs) and its possible mechanism. Methods HNPCs were cultured in vitro. HNPCs was divided into observation group, negative group and blank group. The hsa-miR-200c mimicswere transfected into the observation group and the negative control group was transfected with mimics-NC.The blank group had no intervention. 24 hours after transfection, the expression of miR-200c was detected by real-time PCR assay. The apoptosis rate was measured by flow cytometry and the activity of Caspase3/7 was detected by Elisa plate counting method. The protein of tyrosine protein kinase receptor B(Trk B was detected by Western blotting assay. Results the relative expression of miR-200c and apoptosis were 8.11 鹵0.21 鹵1.07 鹵0.04 鹵0.99 鹵0.05 and 299.237 鹵24.24519.476 鹵10.617117.317 鹵11.3170.15 鹵0.06 respectively in the observation group, negative group and blank group, and the apoptotic rate was 23.6% 鹵3.21% 鹵0.21.6% 鹵0.1% 鹵0.21% 鹵0.1% in the blank group, respectively. The relative expression of the miR-200c protein was 0.48 鹵0.110.50 鹵0.120.15 鹵0.06in the control group and the control group, respectively. The relative expression level of the miR-200c protein was 0.48 鹵0.110.50 鹵0.120.15 鹵0.06in the control group compared with the control group, and the relative expression of the miR-200c protein was 299.237 鹵24.24519.476 鹵10.657117.317 鹵11.317tTrk B protein in the control group. Conclusion overexpression of miR-200c can promote the apoptosis of HNPCs, and its mechanism may be related to the regulation of Trk B expression.
【作者單位】: 廣東醫(yī)科大學附屬佛山禪城醫(yī)院;
【基金】:廣東省佛山市衛(wèi)生和計劃生育局醫(yī)學科研課題(20160148)
【分類號】:R681.53

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