本文選題：硫化氫 + 燒傷��； 參考：《青海大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的通過建立燒傷模型(大鼠),提取燒傷后皮膚基底的巨噬細(xì)胞,加入外源性H2S,用免疫印跡(Western blotting,WB)法測定體外培養(yǎng)巨噬細(xì)胞中的p-ERK、p-p38、p-JNK的蛋白含量的變化,探究硫化氫對(duì)體外培養(yǎng)皮膚巨噬細(xì)胞p-ERK、p-p38、p-JNK的影響,探究H2S參與創(chuàng)面愈合的一些機(jī)制。方法本實(shí)驗(yàn)的研究對(duì)象是燒傷大鼠創(chuàng)面皮膚基底提取的巨噬細(xì)胞。在30只大鼠中選取5只,正常飼養(yǎng);其余25只做燙傷處理,從5只正常大鼠中隨機(jī)選取1只大鼠作為正常組,25只燒傷大鼠中隨機(jī)選取12只分為燒傷組、格列本脲(GLBN)組、Na HS+GLBN和Na HS組,每組3只大鼠。其中燒傷組和正常組加入等量PBS,格列本脲組加入格列本脲(調(diào)整終濃度至200umol/L),分別作用1、6、12小時(shí)。Na HS組加入Na HS(調(diào)整終濃度至200umol/L),分別作用1、6、12小時(shí)。Na HS+GLBN組加入Na HS+GLBN(二者調(diào)整終濃度均為200umol/L),作用1小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)。在達(dá)到作用時(shí)間后通過免疫印跡法分別測定巨噬細(xì)胞細(xì)胞中p-PERK、p-p38、p-JNK的蛋白含量。結(jié)果(1)p-ERK蛋白相對(duì)表達(dá)量比較(P0.05):(1)燒傷組與空白對(duì)照組p-ERK量做相應(yīng)檢驗(yàn),分析結(jié)果有意義。(2)在同一時(shí)間,Na HS組與各組別p-ERK相對(duì)量進(jìn)行相應(yīng)分析,認(rèn)為分析結(jié)果有意義。(3)Na HS+GLBN組與GLBN組p-ERK蛋白量進(jìn)行相應(yīng)分析,結(jié)果有一定的差別,有統(tǒng)計(jì)意義。(4)GLBN組與燒傷組p-ERK蛋白相對(duì)量進(jìn)行相應(yīng)分析,分析所得到的結(jié)果有意義。(2)p-JNK蛋白相對(duì)表達(dá)量比較(P0.05):各組間比較:(1)燒傷組和空白組p-JNK蛋白表達(dá)量進(jìn)行對(duì)比,結(jié)果經(jīng)相應(yīng)方法檢驗(yàn)后,得出兩組結(jié)果有差異,其結(jié)果有意義。(2)在同一時(shí)相點(diǎn),Na HS組與其他組p-JNK表達(dá)量之間進(jìn)行相應(yīng)統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn),結(jié)果有意義。(3)Na HS+GLBN組與GLBN組p-JNK蛋白表達(dá)量結(jié)果比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)GLBN組與燒傷組p-JNK蛋白量之間進(jìn)行相應(yīng)檢驗(yàn),得出的結(jié)果有差異。(3)p-p38蛋白表達(dá)量之間比較(p0.05):(1)燒傷組與空白對(duì)照組p-p38相對(duì)表達(dá)量經(jīng)過相應(yīng)的檢驗(yàn)后,認(rèn)為結(jié)果有一定的意義。(2)同一時(shí)間比較,Na HS組和其他各組別p-p38蛋白相對(duì)量經(jīng)比較后認(rèn)為差別之間比較有意義。(3)Na HS+GLBN組與GLBN組p-p38蛋白表達(dá)量結(jié)果比較有統(tǒng)計(jì)意義。(4)GLBN組與燒傷組行相應(yīng)對(duì)比,p-p38蛋白相對(duì)量進(jìn)行相應(yīng)的檢驗(yàn)分析,認(rèn)為結(jié)果有意義。結(jié)論外源性硫化氫可以影響燒傷后大鼠體外培養(yǎng)皮膚巨噬細(xì)胞MAPK傳導(dǎo)通路,表現(xiàn)為促進(jìn)p-ERK的表達(dá),抑制p-JNK和p-p38的表達(dá)。
[Abstract]:Objective to establish a burn model (rat model) by extracting macrophages from skin base after burn, adding exogenous H _ 2s, and using Western blotting method to determine the protein content of p-ERK _ (38) P _ (38) P _ (-JNK) in cultured macrophages in vitro.To explore the effect of hydrogen sulfide on the skin macrophage p-ERKN p-p38 p-JNK in vitro and to explore the mechanism of H2S involved in wound healing.Methods macrophages were extracted from the skin of burn rats.Five of the 30 rats were fed normally, the remaining 25 rats were scalded, and one of the 5 normal rats was randomly selected as the normal group. 12 of the 25 burn rats were randomly divided into burn group.There were 3 rats in each group in NaHS GLBN and NaHS groups.The burn group and the normal group added the same amount of PBSs, the glibenclamide group added glibenclamide (adjust the final concentration to 200umol / L), and the NaHS group added NaHS (adjusted final concentration to 200umolp / L), respectively. The NaHS GLBN group added NaHS GLBNs.Both adjusted final concentrations were 200umol / L ~ (-1), 1 h ~ 6 h / L ~ (-1) and 12 h ~ (-1).The protein contents of p-PERKN p-p38 + p-JNK in macrophages were determined by Western blotting after the action time was reached.Results the relative expression of p-ERK protein was compared between the burn group and the blank control group (P0.05: 1) the p-ERK content of the burn group and the blank control group was tested. The results were significant. 2) at the same time, the relative amount of p-ERK between the Na-HS group and the different groups was analyzed.The results showed that the p-ERK protein content in the HS GLBN group and the GLBN group was significantly higher than that in the GLBN group, and there was some difference between the two groups. There was statistical significance in the analysis of the relative amount of p-ERK protein between the GLBN group and the burn group.The results showed that the relative expression of p-JNK protein was compared between the burn group and the blank group. The results showed that there were differences between the two groups.The results were significant. (2) the corresponding statistical test was carried out between the p-JNK expression of NaHS group and other groups at the same time point. The results showed that the expression of p-JNK protein in Na-HS GLBN group and GLBN group was significantly higher than that in GLBN group, and the expression of p-JNK protein in Na-HS group was compared with that in GLBN group at the same time.There was a significant difference in the p-JNK protein expression between the burn group and the burn group. The results showed that the relative expression of p-p38 in the burn group and the blank control group was compared with that in the control group, and the relative expression of p-p38 in the burn group was compared with that in the blank control group.The relative amount of p-p38 protein was compared with that of burn group.Think the result makes sense.Conclusion exogenous hydrogen sulfide can affect the MAPK conduction pathway of skin macrophages cultured in vitro in burn rats, which can promote the expression of p-ERK and inhibit the expression of p-JNK and p-p38.
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R644

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本文編號(hào)：1770247