去盆腔神經大鼠結腸傳輸功能變化及結腸黏膜TRPA1蛋白表達變化研究
發(fā)布時間:2018-04-16 12:02
本文選題:去盆腔神經支配 + 結腸傳輸。 參考:《第三軍醫(yī)大學》2015年碩士論文
【摘要】:目的產傷、手術或創(chuàng)傷造成的盆腔神經損傷是臨床常見的結直腸動力紊亂原因,嚴重影響病人的生活質量,臨床處理非常棘手。不管是動物實驗還是臨床上均觀察到盆腔神經損傷后結腸傳輸功能呈現一定的自適應性恢復趨勢,詳細的調控機制不清。如果能夠闡明這一適應性恢復的調控機制,就有望通過一定的干預措施加速和強化這一過程。本課題通過檢測去盆腔神經模型動物結腸傳輸功能及其黏膜TRPA1表達變化,旨在探討去盆腔神經支配后結腸傳輸功能的變化及其可能作用機制,為盆腔神經損傷后的腸動力紊亂及適應性恢復機制研究提供基礎。方法一、實驗對象及分組成年雄性Sprague Dawley大鼠96只,6周齡,體質量(200±10)g,隨機分為兩部分:結腸傳輸功能檢測部分42只,分為手術組與假手術組,各21只;TRPA1蛋白檢測部分54只,分為對照組、假手術組及手術組,各18只。二、模型制備1.手術組:取下腹正中切口,長約3cm,濕紗布隔離小腸于上腹部,解剖鏡下辨認清楚膀胱、直腸、精囊腺、前列腺,用棉簽在前列腺后下方鈍性剝離出盆腔神經,顯微剪剪斷,縫合切口,關閉腹腔。2.假手術組:假手術組模型制備僅需開腹后顯露雙側盆腔神經,不切斷,然后關腹,注意控制切口長度同手術組。3.對照組:無任何處理。4.行結腸傳輸功能檢測部分大鼠在關腹前需行盲腸置管,操作如下:術中顯露盲腸,在盲腸造口,置入一根硅膠管至近端結腸,用3-0絲線荷包縫合盲腸并固定,導管經左側腹壁穿出,經皮下隧道引至頸后并固定于皮膚上。分別在術后第1、3、7天通過導管注入鉻[51Cr]酸鈉注射液0.2mL至近端結腸。給藥3h后取出整段結腸平分為10段,同時收集3h內排出的糞便并標記為11段。測量每段的放射性通過伽瑪計數器測定。計算51cr分布的幾何中心(geometriccenter,gc),以gc值代表結腸傳輸功能。三、檢測指標1.利用放射性同位素法(51cr)測定術后第1天、第3天、第7天結腸傳輸功能。2.利用westernblotting檢測術后第1天、第3天、第7天近端及遠端結腸黏膜trpa1的表達情況。結果一、手術組與假手術組術后結腸傳輸功能變化1.手術組術后第3天與第1天相比結腸傳輸功能明顯恢復(p0.05),術后第7天與第3天相比進一步恢復(p0.05),提示手術組術后第7天結腸傳輸功能恢復。2.假手術組術后第3天與第1天相比結腸傳輸功能顯著恢復(p0.05),術后第7天與第3天相比差異無顯著性(p0.05),提示假手術組術后第3天結腸傳輸功能恢復。3.術后第1天手術組較假手術組51cr分布的幾何中心明顯降低(p0.05),表明手術組結腸傳輸延遲更為明顯。術后第3天,手術組51cr分布的幾何中心仍顯著低于假手術組(p0.05)。而術后第7天與假手術組相比,手術組51cr分布的幾何中心差異無統(tǒng)計學意義,提示手術組結腸傳輸功能術后第7天基本恢復正常,且隨時間延長呈現逐漸增高的趨勢。二、近端結腸黏膜trpa1蛋白表達變化1.對照組、假手術組和手術組近端結腸黏膜中trpa1相對表達量比較,術后第1天,差異有統(tǒng)計學意義(f值=73.497,p0.05),進一步與對照組比較,假手術組及手術組表達均顯著下調(p0.05),手術組較假手術組下調更顯著(p0.05);術后第3天,三組間差異無統(tǒng)計學意義(f值=2.087,p0.05)。術后第7天,三組間差異亦無統(tǒng)計學意義(f值=0.656,p0.05)。2.假手術組及手術組術后第1天、第3天、第7天間比較,差異均有統(tǒng)計學意義(f值=5.651、41.005,p0.05),進一步兩兩比較提示在術后第3天都明顯上調(p0.05),第7天與第3天相比則差異均無統(tǒng)計學意義(p0.05)。三、遠端結腸黏膜trpa1蛋白表達變化1.對照組、假手術組和手術組遠端結腸黏膜中trpa1相對表達量比較,術后第1天,差異有統(tǒng)計學意義(f值=58.773,p0.05),進一步與對照組比較,假手術組及手術組表達均顯著下調(p0.05),手術組較假手術組下調更顯著(p0.05);術后第3天,三組間差異有統(tǒng)計學意義(F值=8.680,p0.05),進一步兩兩比較,假手術組與對照組差異無統(tǒng)計學意義(p0.05),手術組與對照組差異顯著(p0.05),與假手術組比較,手術組下調顯著(p0.05);術后第7天,三組間差異亦無統(tǒng)計學意義(F值=1.319,p0.05)。2.假手術組術后第1天、第3天、第7天間比較,差異有統(tǒng)計學意義(F值=16.975,p0.05),進一步比較提示在術后第3天上調(p0.05),第7天與第3天相比差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。3.手術組術后第1天、第3天、第7天間比較,差異有統(tǒng)計學意義(F值=50.417,p0.05),進一步比較提示TRPA1相對表達量在術后第3天上調(p0.05),第7天與第3天相比繼續(xù)上調,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。結論1.去盆腔神經后大鼠結腸傳輸功能明顯減弱,并隨時間延長呈一明顯的恢復趨勢。2.去盆腔神經后大鼠遠端結腸黏膜TRPA1蛋白表達明顯減弱,并隨時間延長呈一明顯的恢復趨勢。3.去盆腔神經后大鼠結腸傳輸功能與遠端結腸黏膜TRPA1蛋白表達恢復趨勢高度一致。通過本課題研究,我們發(fā)現去盆腔神經后,大鼠遠端結腸黏膜TRPA1蛋白表達明顯減弱,并隨時間延長呈一明顯的恢復趨勢,此趨勢與去盆腔神經大鼠結腸傳輸功能恢復趨勢高度一致。據此,我們認為盆腔神經損傷后結腸動力的適應性恢復與遠端結腸黏膜TRPA1蛋白的表達變化有關。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:第三軍醫(yī)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R619.5
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,本文編號:1758792
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