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3-羥基苯甲醛抑制兔自體移植靜脈橋內(nèi)膜增生的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-10 16:14

  本文選題:3-羥基苯甲醛 + 靜脈橋 ; 參考:《廣西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:研究背景及目的心血管疾病是最常見(jiàn)的疾病病種,冠心病是心血管疾病重要的組成部分,也是心血管疾病中最常見(jiàn)的死因。對(duì)于嚴(yán)重的冠心病,冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)是其主要的治療方法。外科手術(shù)常用的取材有兩種:左乳內(nèi)動(dòng)脈和大隱靜脈。相較于乳內(nèi)動(dòng)脈血管橋的較好的遠(yuǎn)期通暢率,大隱靜脈血管橋遠(yuǎn)期通暢率不容樂(lè)觀。3-羥基苯甲醛(3-HBA)是一種原兒茶醛的前體,有研究表明原兒茶醛類(lèi)物質(zhì)有心血管保護(hù)作用。但并無(wú)3-HBA對(duì)靜脈橋作用的研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究3-HBA對(duì)人大隱靜脈血管平滑肌細(xì)胞及兔自體移植靜脈橋內(nèi)膜增生的影響,以其尋找一種新的能夠防治冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)后靜脈橋狹窄的藥物。研究方法1.人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),設(shè)立對(duì)照組,以及藥物梯度組(25,50,100μmol/L),作用人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞24h后,用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,Transwell小室法檢測(cè)細(xì)胞遷移情況,流式細(xì)胞儀(Flow Cytometry,FCM)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,Western Blot檢測(cè)p-AKT蛋白表達(dá)情況。2.選取24只健康的實(shí)驗(yàn)用新西蘭兔,不限雌雄,體重在2000g-2500g之間,編號(hào),計(jì)算機(jī)隨機(jī)法分成實(shí)驗(yàn)組A組和對(duì)照組B組,每組再均分為兩個(gè)亞組,即A1、A2組和B1、B2組,每個(gè)亞組6只兔子,建立同側(cè)頸外靜脈移植到頸總動(dòng)脈的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,A組動(dòng)物從耳緣靜脈注射3-HBA 100mg/(kgd),B組動(dòng)物給予同劑量生理鹽水以作對(duì)照。給藥時(shí)間一直持續(xù)至取材前一天。A1、B1組動(dòng)物于模型建立后的第2周采集移植靜脈橋,A2、B2組動(dòng)物于模型建立后4周采集移植靜脈橋,計(jì)算機(jī)圖形軟件計(jì)算靜脈橋內(nèi)膜厚度,并用蛋白印記法(Western Blot)對(duì)各組移植靜脈橋中AKT蛋白的磷酸化情況進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果1.藥物干預(yù)人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞24h后,相比于對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖與遷移能力均受到明顯抑制,并呈現(xiàn)一定的劑量依賴(lài)性,流式細(xì)胞儀凋亡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其中晚期凋亡細(xì)胞比例明顯增加,Western blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)p-AKT表達(dá)明顯減少,p0.05,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.24只兔子行搭橋模型成功,無(wú)明顯的手術(shù)切口感染。術(shù)后2周時(shí),實(shí)驗(yàn)組A1組靜脈橋內(nèi)膜厚度為76.57±6.76μm,而同期對(duì)照組B1組靜脈橋內(nèi)膜厚度為87.32±6.89μm,實(shí)驗(yàn)組組靜脈橋內(nèi)膜厚度較對(duì)照組已經(jīng)稍有減小,p=0.123,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;到4周時(shí),實(shí)驗(yàn)組A2內(nèi)膜厚度為45.39±9.41μm,對(duì)照組B2組內(nèi)膜厚度為134.07±18.80μm,p0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。無(wú)論2周或者4周時(shí),p-AKT的表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組組均較對(duì)照組均明顯降低,p0.05,差異有統(tǒng)計(jì)意義。結(jié)論3-羥基苯甲醛能抑制實(shí)驗(yàn)用新西蘭兔自體移植靜脈橋內(nèi)膜增生,可能與其抑制AKT的磷酸化從而抑制平滑肌細(xì)胞增殖遷移以及促進(jìn)VSMC凋亡有關(guān)。
[Abstract]:Background and objective Cardiovascular disease is the most common disease. Coronary heart disease is an important part of cardiovascular disease and the most common cause of death in cardiovascular disease.Coronary artery bypass grafting is the main treatment for severe coronary heart disease.There are two commonly used materials for surgery: the left internal mammary artery and the great saphenous vein.But there was no study of the effect of 3-HBA on venous bridge.The aim of this study was to investigate the effects of 3-HBA on intimal hyperplasia of vascular smooth muscle cells of human saphenous vein and autograft vein graft in rabbits in order to find a new drug to prevent and treat the stenosis of vein graft after coronary artery bypass grafting (CABG).Method 1.Human saphenous vein smooth muscle cells were cultured in vitro. Control group and drug gradient group (2550100 渭 mol / L) were used to detect cell proliferation and cell migration by MTT assay.Flow Cytometry (FCM) was used to detect apoptosis. Western Blot was used to detect the expression of p-AKT protein.Twenty-four healthy New Zealand rabbits were randomly divided into experimental group A and control group B, each group was divided into two subgroups: A1A 2 group and B 1 B 2 group, with 6 rabbits in each subgroup.An experimental animal model of ipsilateral external jugular vein transplantation to the common carotid artery was established. The animals of group A were injected with 3-HBA 100mg / kg / kg 3-HBA from the auricular margin to control the rats in group B with the same dose of normal saline.The administration time lasted until the first day before the drug was taken. Group A _ (1) B _ (1) collected the grafted vein grafts 4 weeks after the establishment of the model, and the thickness of the vein grafts was calculated by computer graphics software, and the thickness of the vein grafts was calculated by computer graphics software in the second week after the establishment of the model.The phosphorylation of AKT protein in vein grafts was detected by Western blot.Result 1.Compared with the control group, the proliferation and migration ability of the experimental group were significantly inhibited after 24 hours of drug intervention, and in a dose-dependent manner.The proportion of late apoptotic cells was significantly increased by flow cytometry. Western blot assay showed that the expression of p-AKT decreased significantly (P 0.05), and the difference was statistically significant. 2.24 rabbits were successful in bypass grafting model, and there was no obvious wound infection.At 2 weeks after operation, the intimal thickness of venous grafts was 76.57 鹵6.76 渭 m in group A1 and 87.32 鹵6.89 渭 m in group B1, respectively.The intimal thickness of experimental group A2 was 45.39 鹵9.41 渭 m, and that of control group B2 was 134.07 鹵18.80 渭 m (p0.05).The expression of p-AKT in the experimental group was significantly lower than that in the control group at 2 or 4 weeks, and the difference was statistically significant.Conclusion 3-hydroxybenzaldehyde can inhibit the proliferation of autografted vein graft intima in New Zealand rabbits, which may be related to the inhibition of AKT phosphorylation, the inhibition of smooth muscle cell proliferation and migration, and the promotion of VSMC apoptosis.
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R654.2

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本文編號(hào):1731963

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