本文選題：細胞老化　切入點：生長因子　出處：《中國矯形外科雜志》2017年01期

【摘要】：[目的]構建人椎間盤髓核細胞(nucleus pulposus cells,NPCs)老化模型,探討老化NPCs中生長因子的表達差異及其與椎間盤退變(intervertebral disc degeneretion,IDD)的關系。[方法]體外單層培養(yǎng)人正常NPCs系(Scien Cell 4800),連續(xù)1:2傳代培養(yǎng),誘導建立NPCs復制性老化(replication senescence cells,RS)模型;不同濃度雙氧水作用于未老化細胞,模擬椎間盤氧化應激微環(huán)境,誘導建立應激誘導過早老化(stress induced premature senescence cells,SIPS)模型。細胞衰老β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色檢測NPCs陽性表達率。流式細胞儀檢測G1期細胞比例及細胞凋亡率。CCK-8檢測不同代次細胞增殖活性。應用Agilent表達譜芯片初步篩選出正常與老化NPCs中差異性表達的生長因子,實時熒光定量PCR進一步驗證所篩選生長因子的表達差異。[結果]NPCs經連續(xù)傳代、雙氧水誘導可分別構建RS模型及SIPS模型。兩種老化模型SA-β-Gal陽性表達的細胞比例均高于70%,G1期細胞比例均高于80%,凋亡率均低于10%。Agilent表達譜芯片篩選出的堿性成纖維生長因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)與血管內皮生長因子a(vascular endothelial growth factor a,VEGF-a)在不同老化模型中,表達差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),特別是b FGF在SIPS模型中的表達顯著高于RS模型(P0.05)。兩種老化模型中的b FGF表達量顯著高于正常組(P0.05)。[結論]雙氧水誘導所引起的氧化應激可促進細胞過早老化。老化NPCs上調b FGF,且SIPS模型中的上調幅度顯著高于RS,SIPS可能比RS更加上調b FGF。不同老化誘導條件下,生長因子的表達可能存在差異,b FGF可能參與椎間盤再血管化及自我修復。
[Abstract]:[objective] to construct the aging model of pulposus cells of nucleus pulposus of human intervertebral disc, and to explore the difference of growth factor expression in aging NPCs and its relationship with intervertebral disc degeneretion (IDD). The NPCs replicating senescence cells RSs model was induced, and different concentrations of hydrogen peroxide acted on the unaged cells to simulate the oxidative stress microenvironment of the intervertebral disc. The senescence-associated 尾 -galactosidase SA- 尾 -galactosidase (SA- 尾 -galactosidase) staining was used to detect the positive expression of NPCs. Flow cytometry was used to detect the percentage of cells in G1 phase and the rate of cell apoptosis. CCK-8 was used to detect the different generations of cells. Proliferative activity. Agilent expression microarray was used to screen the differentially expressed growth factors in normal and aging NPCs. Real-time fluorescent quantitative PCR was used to further verify the difference of expression of growth factors. [results] NPCs was subcultured continuously. The ratio of SA- 尾 -Gal positive cells in both aging models was higher than that in 70 G 1 phase cells, and the percentage of apoptosis was lower than that of basic fibroblast growth screened by 10%.Agilent expression microarray. VEGF-a and a(vascular endothelial growth factor FGFs were observed in different aging models. The expression of b FGF in SIPS model was significantly higher than that in RS model P0 05. The expression of b FGF in two aging models was significantly higher than that in normal group. [conclusion] oxidative stress induced by hydrogen peroxide can be induced by hydrogen peroxide. Aging NPCs upregulated bFGFs, and the upregulation rate in SIPS model was significantly higher than that in RSS-SIPS model. There may be differences in the expression of growth factor B FGF, which may be involved in disc revascularization and self-repair.
【作者單位】： 東南大學醫(yī)學院東南大學附屬中大醫(yī)院骨科;東南大學醫(yī)學院東南大學附屬中大醫(yī)院普外科;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81272035;81572170) 青年科學基金資助項目(編號:81201423)
【分類號】：R681.53

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 彭岳;趙鐵建;謝海源;韋燕飛;;細胞培養(yǎng)實驗中一些細節(jié)問題的探討[J];中華中醫(yī)藥學刊;2009年06期

2 鄭麗君;夏文美;童村;;HeLa細胞的培養(yǎng)與使用[J];醫(yī)藥工業(yè);1983年10期

3 李少英;李月秋;朱金玲;;三種細胞生長狀況的觀察[J];佳木斯醫(yī)學院學報;1995年06期

4 嚴國俊;裴燕芳;朱貞宏;吳潔穎;潘金火;;實時細胞電子分析技術的應用研究進展[J];中國藥學雜志;2014年03期

5 陳必良,穆潤華,馬向東,王德堂,辛曉燕,鄭維國,嚴瑞蘭;特異性反義寡核苷酸對含HPV16的SiHa細胞的作用[J];第四軍醫(yī)大學學報;2000年03期

6 孟洪弟,戚豫,潘虹,吳希如;無線粒體DNA的ρ°206細胞的培養(yǎng)及其呼吸鏈功能損害[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2000年03期

7 何秉燕;鄧長生;鄒典定;劉湘芬;易有榮;;G-CSF對洛伐他汀誘導的K562細胞內酸堿度及凋亡的影響[J];中華血液學雜志;2006年07期

8 黃靜紅;李德如;閻國富;;蘿卜硫素對HaCaT細胞的影響研究[J];中國美容醫(yī)學;2010年11期

9 章靜波,葉祝三;保護正常組織和細胞——腫瘤化療研究中的一個動向[J];國外醫(yī)學參考資料(腫瘤學分冊);1978年01期

10 章靜波;薛新華;;細胞松弛菌素D對EC_a-109細胞的作用[J];解剖學報;1979年01期

相關會議論文 前10條

1 劉令九;趙小琳;岳立廣;徐艷玲;李淑焱;侯麗娟;隋紅;姜崴;謝寶生;李勇;劉兵;李海濱;;細胞工廠培養(yǎng)人胚肺二倍體細胞制備凍干甲型肝炎減毒活疫苗[A];2011中國生物制品年會暨第十一次全國生物制品學術研討會論文集[C];2011年

2 宋征;;應用Bhas42細胞試驗檢測22個腫瘤促長基因標志物[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學年會暨藥物非臨床安全性評價研究論壇論文摘要[C];2013年

3 谷彬;張輝;喻澤蘭;;依地福新對Jurkat細胞生長抑制機制的研究[A];2009醫(yī)學前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學術會議論文集[C];2009年

4 武冬梅;李秀娥;葛莉亞;袁星;;雙酚-A對MCF-7細胞伏安行為的影響[A];第五屆全國環(huán)境化學大會摘要集[C];2009年

5 李曉飛;呂超;吳小榮;韓慶玲;王杰;易宗春;;鉛和鋁離子對K562細胞紅系分化的影響[A];全國生化/工業(yè)與衛(wèi)生毒理學學術會議論文集[C];2010年

6 宋為民;郭波;;復方甘草酸苷對HaCaT細胞表達AQP3的影響[A];2011全國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2011年

7 劉魯明;錢華;陳震;林勝友;黃挺;;參麥注射液對腫瘤細胞環(huán)核甘酸的影響[A];全國中醫(yī)藥科研與教學改革研討會論文集[C];2000年

8 張雪玲;糜漫天;李等松;韋娜;張乾勇;楊志祥;;Lovastatin對HL-60細胞HMG-CoA還原酶mRNA表達及細胞增殖功能的影響[A];中國營養(yǎng)學會特殊營養(yǎng)第五屆學術會議論文摘要匯編[C];2002年

9 房佰俊;廖聯(lián)明;楊少光;史明霞;趙春華;;胎兒骨髓源原始干細胞分離純化及其生物學特性的初步研究[A];第九屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2003年

10 李曉軍;朱傳東;汪萍;賈麗;陳芳芳;夏欣一;陳龍邦;;人Id3基因在A549細胞中的表達及對細胞生長功能的研究[A];第六屆全國免疫學學術大會論文集[C];2008年

相關重要報紙文章 前10條

1 記者 吳春燕 通訊員 寧習源 吳劍鵬;人類情緒可影響干細胞生長[N];光明日報;2014年

2 馮衛(wèi)東;老化干細胞可轉變成年輕干細胞[N];科技日報;2012年

3 常麗君;科學家闡明核內周期運作機制[N];科技日報;2011年

4 本版編輯邋杜華斌 邰舉 毛文波 顧鋼 陳超 何屹 毛黎;2007年世界科技發(fā)展回顧(六)[N];科技日報;2008年

5 通訊員 李靜;廈大教授發(fā)現(xiàn)細胞防癌“玄機”[N];廈門日報;2009年

6 永誠;美發(fā)現(xiàn)控制細胞生長的蛋白質[N];中國醫(yī)藥報;2000年

7 記者 張孟軍;加找到刺激干細胞生長分子[N];科技日報;2001年

8 張?zhí)锟?干細胞研究精彩紛呈[N];中國醫(yī)藥報;2011年

9 邵薇/編譯;T細胞的非凡能力[N];北京科技報;2003年

10 經天;控制細胞生長的蛋白質[N];中藥事業(yè)報;2000年

相關博士學位論文 前10條

1 蔣淵;缺氧肝癌細胞中HIF-1和NF-κB的相互作用及其分子機制的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

2 張廣;肝星狀細胞在肝癌細胞惡性行為中的作用及機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2015年

3 付托;活性氧族在CHO細胞補料批次培養(yǎng)中的作用、機制及調控研究[D];第二軍醫(yī)大學;2016年

4 楊小超;陽離子配體修飾的納米金用于細胞轉運和微囊自組裝研究[D];重慶大學;2010年

5 葉玲玲;基于生物素誘導表達系統(tǒng)的HEK293細胞多基因代謝工程改造[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

6 梁國斌;產朊假絲酵母生產谷胱甘肽過程控制與優(yōu)化[D];江南大學;2008年

7 楊海虹;鈣池操縱性鈣內流在人肺腺癌A549細胞中的研究[D];南方醫(yī)科大學;2012年

8 常玉娟;基于Nrf2/ARE通路辛開苦降方胃康寧對人胃粘膜上皮細胞SOD2、GSTP1相關調控機制的研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2015年

9 楊麗君;人Fcα/μR的表達與功能的初步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

10 李曼;DRC3f及eRF3b在肝病發(fā)生發(fā)展中作用機制的初步研究[D];河北醫(yī)科大學;2011年

相關碩士學位論文 前10條

1 柯自立;硫酸鎂對6-羥基多巴胺損傷的SH-SY5Y細胞的保護作用[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 李婷婷;細胞穿透肽VP22對抑癌蛋白PTEN體外抗腫瘤作用影響的研究[D];川北醫(yī)學院;2015年

3 王靜;環(huán)氧化物酶抑制劑NS-398聯(lián)合奧沙利鉑對宮頸癌Hela細胞增殖和凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學;2015年

4 鄭祿祿;番茄紅素對轉染SOD1-G93A的PC12細胞線粒體的保護作用[D];河北醫(yī)科大學;2015年

5 宋晨源;氯化銨對人正常肝細胞系changliver中二氫乳清酸脫氫酶表達的影響[D];鄭州大學;2015年

6 張莉;白藜蘆醇體外抑制腸道病毒71型的作用機制研究[D];蘇州大學;2015年

7 高華武;富硒芪云抗腫瘤作用及其機制的實驗研究[D];安徽中醫(yī)藥大學;2015年

8 宋加奎;丹參對人胃癌SGC-7901細胞化療敏感性的影響[D];安徽中醫(yī)藥大學;2015年

9 許雅鑫;尼古丁對NCI-H1975和NCI-H460細胞促進增殖作用及對PI3K/Akt通路的影響研究[D];山西醫(yī)科大學;2015年

10 高娜;加減駐景方含藥血清對二氯化鈷誘導后ARPE-19細胞表達VEGF及HIF-1α的影響[D];青海大學;2015年

，

本文編號：1660888