2-DG標(biāo)記的氧化鐵納米粒靶向橫紋肌肉瘤細(xì)胞的研究
本文選題:氧化鐵納米粒 切入點(diǎn):表面修飾 出處:《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的(1)合成Fe_3O_4@OA NPs、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs及Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs,并對(duì)納米粒子進(jìn)行表征。(2)比較橫紋肌肉瘤細(xì)胞對(duì)Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs和Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs以及4.5 g/L葡萄糖競(jìng)爭(zhēng)抑制下的Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs的吸收差異,檢測(cè)橫紋肌肉瘤細(xì)胞對(duì)Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs靶向攝取情況。方法(1)采用熱分解法合成Fe_3O_4@OA NPs,經(jīng)表面修飾后合成Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs及Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs。電鏡下觀察納米粒的形態(tài)、大小及分散性,振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)檢測(cè)其磁學(xué)性質(zhì),熱重分析儀檢測(cè)納米粒子表面修飾物的情況。(2)將0.3μmol/m L Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs及4.5g/L游離葡萄糖競(jìng)爭(zhēng)抑制下的Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs與橫紋肌肉瘤A-673細(xì)胞孵育10 min、30 min、1h、2 h時(shí),采用普魯士藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞株的靶向吸收情況,MRI掃描觀察T2WI、SWI信號(hào)強(qiáng)度和多回波序列T2值,原子吸收光譜法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鐵含量。結(jié)果(1)Fe_3O_4@OA NPs的形態(tài)似立方體,平均粒徑10.4±0.8 nm,在正己烷中呈單分散性,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs在水中分散穩(wěn)定性良好。兩者的磁飽和強(qiáng)度分別為81.2±5.3 emu/g、59.7±4.8 emu/g,沒(méi)有剩磁及矯頑力。熱重分析圖顯示,油酸及聚乙二醇連接在納米粒子表面。(2)普魯士染色結(jié)果顯示,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs與橫紋肌肉瘤A-673細(xì)胞孵育10 min、30 min時(shí),細(xì)胞對(duì)納米粒的吸收不明顯;1h時(shí),Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組細(xì)胞內(nèi)藍(lán)染顆粒稍增加;2 h時(shí),Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組細(xì)胞內(nèi)藍(lán)染顆粒顯著增加,明顯多于Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs組,并可被4.5 g/L游離葡萄糖競(jìng)爭(zhēng)抑制。(3)MRI T2WI上顯示,與橫紋肌肉瘤A-673細(xì)胞孵育10 min、30 min,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs組及競(jìng)爭(zhēng)抑制組信號(hào)下降不明顯;1h時(shí),三組信號(hào)降低,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組信號(hào)稍低于其他兩組;2 h時(shí),Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組信號(hào)顯著下降,明顯低于Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs組及競(jìng)爭(zhēng)抑制組。(4)MRI多回波序列顯示,與橫紋肌肉瘤A-673細(xì)胞孵育10 min、30 min,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組T2值和Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs組T2值、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組T2值和競(jìng)爭(zhēng)抑制組T2值比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與橫紋肌肉瘤A-673細(xì)胞孵育1h、2 h,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組T2值和Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs組T2值、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組T2值和競(jìng)爭(zhēng)抑制組T2值比較有顯著差異。(5)MRI SWI信號(hào)顯示,與橫紋肌A-673細(xì)胞孵育的Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs組及競(jìng)爭(zhēng)抑制組均隨著孵育時(shí)間的延長(zhǎng)信號(hào)逐漸呈下降趨勢(shì),并且任意時(shí)間點(diǎn)Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組信號(hào)明顯低于Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs組及競(jìng)爭(zhēng)抑制組。(6)鐵含量測(cè)定結(jié)果顯示,不同時(shí)間點(diǎn),Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組鐵吸收量明顯多于Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs組及競(jìng)爭(zhēng)抑制組,并且Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs組與其他兩組各時(shí)間點(diǎn)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論(1)納米粒表面成功包被油酸和聚乙二醇,具有較好的穩(wěn)定性和水溶性。(2)橫紋肌肉瘤細(xì)胞對(duì)Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs有明顯靶向吸收,PEG在抗細(xì)胞非特異性黏附的基礎(chǔ)上更好地實(shí)現(xiàn)了2-DG的靶向性識(shí)別作用,從而使納米粒子更精準(zhǔn)地定位于腫瘤細(xì)胞,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs有望成為新型的分子磁共振探針靶向惡性腫瘤。磁共振SWI序列對(duì)較低濃度的氧化鐵納米粒很敏感,為檢測(cè)低濃度對(duì)比劑靶向腫瘤的活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提供了有效的檢測(cè)方法。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R738.7
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1652801
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