本文選題：Nrf　切入點：泛素-蛋白酶系統(tǒng)　出處：《醫(yī)學研究生學報》2016年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的 Nrf2是重要的神經(jīng)保護因子,泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin proteasome system,UPS)作為一種高度特異性的細胞內(nèi)蛋白降解途徑,在維持基因和蛋白正常功能上發(fā)揮著重要的作用。文中初步研究腦外傷模型中Nrf2與UPS的關系。方法 42只健康雄性ICR小鼠隨機數(shù)字表法分為3組:對照組,外傷+溶劑組,外傷+萊菔硫烷組,每組14只;12只Nrf2基因敲除小鼠為外傷+敲除組。外傷組采用自由落體法制備閉合性小鼠腦損傷模型,對照組僅切開頭皮。外傷+萊菔硫烷組于造模后5 min予以腹腔注射萊菔硫烷5 mg/kg;外傷+溶劑組于造模后5 min予以腹腔注射同等體積的10%玉米油;造模24 h后取腦皮層,Western blot檢測Nrf2、泛素化蛋白含量,同時用免疫組化、電鏡分別觀察Nrf2和泛素化蛋白的變化。結果與對照組相比,外傷+溶劑組中Nrf2核蛋白與泛素化蛋白表達含量均增高[(0.66±0.09)vs(0.09±0.02),(10.58±0.75)vs(3.27±0.21)],差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);與外傷+溶劑組相比,外傷+萊菔硫烷組中核蛋白Nrf2表達明顯增高[(1.22±0.14)vs(0.66±0.09)],泛素化蛋白含量則明顯降低[(6.97±0.86)vs(10.58±0.75)],差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);而外傷+敲除組中核蛋白Nrf2表達明顯低于外傷+溶劑組[(0.17±0.02)vs(0.66±0.09)],泛素化蛋白含量則顯著高于外傷+溶劑組[(14.35±0.65)vs(10.58±0.75)],差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。免疫組化和電鏡也觀察到相應的泛素化蛋白的變化。結論腦外傷模型中Nrf2可能通過調(diào)節(jié)UPS來發(fā)揮保護作用。
[Abstract]:Objective Nrf2 is an important neuroprotective factor. Ubiquitin proteasome system is a highly specific intracellular protein degradation pathway. In this paper, the relationship between Nrf2 and UPS in brain trauma model was studied. Methods 42 healthy male ICR mice were randomly divided into three groups: control group, trauma solvent group. In traumatic sulforaphane group, 14 Nrf2 gene knockout mice in each group were used as trauma knockout group. The rats in the traumatic sulforaphane group were intraperitoneally injected with sulforaphane (5 mg / kg) 5 min after the model, and the trauma solvent group received intraperitoneal injection of 10% corn oil of the same volume at 5 min after the establishment of the model. After 24 hours, the contents of Nrf2 and ubiquitin protein were detected by Western blot, and the changes of Nrf2 and ubiquitin protein were observed by immunohistochemistry and electron microscope. The expression of Nrf2 nucleoprotein and ubiquitin protein in traumatic solvent group were all increased [0.66 鹵0.09 鹵0.09 鹵0.02] (10.58 鹵0.75 vs 3.27 鹵0.21), and the difference was statistically significant compared with that in trauma solvent group. In traumatic sulforaphane group, the expression of nucleoprotein Nrf2 was significantly increased [1.22 鹵0.14 vs 0.66 鹵0.09], while the content of ubiquitin was significantly decreased [6.97 鹵0.86 vs 10.58 鹵0.75], and the expression of nucleoprotein Nrf2 in traumatic knockout group was significantly lower than that in trauma solvent group [0.17 鹵0.02vsl 0.66 鹵0.09], and the expression of ubiquitin in trauma knockout group was significantly lower than that in trauma solvent group [0.17 鹵0.02vsl 0.66 鹵0.09]. The content of chemical protein was significantly higher than that of traumatic solvent group (14.35 鹵0.65 vs 10.58 鹵0.75), and the difference was statistically significant (P 0.05). The changes of ubiquitin protein were also observed by immunohistochemistry and electron microscope. Conclusion Nrf2 may play a protective role by regulating UPS in traumatic brain injury model.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學金陵醫(yī)院(南京軍區(qū)南京總醫(yī)院)神經(jīng)外科;
【基金】：國家自然科學基金(81371357)
【分類號】：R651.15;R-332

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本文編號：1600414