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減重步行訓(xùn)練對脊髓損傷大鼠腳橋核及巨細胞網(wǎng)狀核的可塑性影響

發(fā)布時間:2018-03-10 11:24

  本文選題:不完全脊髓損傷 切入點:減重步行訓(xùn)練 出處:《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】:研究背景及目的脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是一種高致殘率的疾病,常導(dǎo)致患者損傷平面以下的運動、感覺、自主神經(jīng)及括約肌等的功能障礙;不僅給患者及其家庭帶來災(zāi)難性的影響,而且極大地增加社會的經(jīng)濟負擔(dān)。因此,世界各地學(xué)者們都在積極尋找有效的治療方法,幫助SCI患者早日康復(fù)。目前尚未能找到一種可以完全恢復(fù)SCI后患者各方面功能的治療方法。超過50%SCI患者存在運動功能障礙,其中步行能力障礙對患者的影響尤為明顯。.減重步行訓(xùn)練(Body Weight Support Treadmill Training,BWSTT)是一種針對下肢功能障礙,提高、改善步行能力的新的康復(fù)治療技術(shù),動物研究顯示這一康復(fù)治療技術(shù)可增強脊髓步行中樞模式發(fā)生器(central pattern generator,CPG)可塑性。然而,BWSTT對脊髓上神經(jīng)中樞的影響卻鮮有文獻報道,本研究將針對大鼠腳橋核和巨細胞網(wǎng)狀核這兩個特殊脊髓上神經(jīng)中樞結(jié)構(gòu)進行探索,旨在1、明確BWSTT對不完全脊髓損傷大鼠中腦腳橋核和巨細胞網(wǎng)狀核可塑性的影響;2、中腦腳橋核和巨細胞網(wǎng)狀核可塑性在不完全脊髓損傷大鼠運動功能恢復(fù)中的作用。方法本研究包括兩部分實驗:1.實驗一 BWSTT對不完全脊髓損傷大鼠中腦運動區(qū)腳橋核可塑性變化:將3月齡雌性SD大鼠30只,體重250-280g,分為BWSTT組、未訓(xùn)練組和假手術(shù)組,每組10只,用美國NYU脊髓沖擊損傷儀制作大鼠T10脊髓不完全損傷模型。采用正電子發(fā)射型電子計算機斷層顯像結(jié)合X射線計算機斷層成像技術(shù)(positron emission tomography/computed tomography,PET/CT)、免疫熒光染色及 Basso Beattie Bresnahan Locomotor Rating Scale(BBB 評分)觀察BWSTT對不完全脊髓損傷大鼠中腦運動區(qū)腳橋核可塑性變化和后肢運動功能的改善,以及兩者之間的關(guān)系。2.實驗二BWSTT對脊髓損傷大鼠延髓巨細胞網(wǎng)狀核可塑性變化:將45只雌性SD大鼠,體重為250-280g,分為假手術(shù)組、BWSTT組和未訓(xùn)練組。繼續(xù)利用NYU脊髓打擊器制作不完全脊髓損傷模型,對BWSTT組利用電動跑臺進行減重步行訓(xùn)練干預(yù)6周,并采用免疫熒光染色、蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,HE)、尼氏染色及BBB運動功能評分觀察BWSTT對不完全脊髓損傷大鼠延髓巨細胞網(wǎng)狀核的可塑性變化,以及運動評分與該核團可塑性變化的關(guān)系。結(jié)果第一部分實驗結(jié)果:1.各組大鼠BBB評分BWSTT組大鼠的后肢運動功能BBB評分在造模后4周、7周兩個時間點的分值均較未訓(xùn)練組高(P0.05)。假手術(shù)組大鼠在造模后1周、4周、7周三個時間點的BBB評分值(分別為20.67±0.52、21.00、21.00)均明顯高于訓(xùn)練組(分別為1.50±0.55、8.42±0.80、12.92±0.66)和未訓(xùn)練組(分別為 1.83±0.75、7.17±0.41、10.08±0.58;P0.01)。2.各組大鼠腳橋核代謝雖然訓(xùn)練組18F-氟脫氧葡萄糖([18F]fluoro-2-deoxy-D-glucose,18F-FDG)的標(biāo)準(zhǔn)攝取值(standard uptake value,SUV)的平均值(1.94±0.63)較未訓(xùn)練組(1.82±0.19)增高,而且假手術(shù)組的SUV值(2.20±0.60)最高,但三組SUV值的差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.各組大鼠腳橋核免疫熒光染色神經(jīng)元特異性核抗原(neuron-specific nuclear,NeuN)免疫熒光染色檢測顯示訓(xùn)練組、未訓(xùn)練組、假手術(shù)組三組間大鼠腳橋核的神經(jīng)元數(shù)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而腳橋核2型囊泡膜谷氨酸轉(zhuǎn)運體(vesicular glutamate transporter 2,VGLUT2)的積分光密度值(integrated optical density,IOD)比較,假手術(shù)組IOD表達最高,訓(xùn)練組較未訓(xùn)練組明顯增強(P0.01)。4.腳橋核與運動功能的相關(guān)分析不完全脊髓損傷大鼠腳橋核VGLUT2的IOD值與BBB評分之間存在明顯的相關(guān)性(r=0.989,P0.01),BWSTT組大鼠的后肢運動功能隨中腦腳橋核谷氨酸能神經(jīng)遞質(zhì)表達增強而提高。第二部分實驗結(jié)果:1.減重步行訓(xùn)練對各組大鼠BBB評分的影響造模后第28天,BWSTT組大鼠BBB評分(8.38±0.74)與未訓(xùn)練組(6.67±0.58)比較出現(xiàn)顯著差異(P0.05),訓(xùn)練組的后肢運動功能恢復(fù)明顯優(yōu)于未訓(xùn)練組,假手術(shù)組大鼠四肢、軀干及尾部運動功能完全正常。2.脊髓HE染色損傷段脊髓切片HE染色發(fā)現(xiàn),假手術(shù)組脊髓切片腹、背側(cè)解剖結(jié)構(gòu)完整,脊髓灰、白質(zhì)中細胞形態(tài)正常,無明顯神經(jīng)元水腫、萎縮;未訓(xùn)練組大鼠損傷段脊髓背側(cè)解剖結(jié)構(gòu)紊亂,存在出血和空洞,背側(cè)和腹側(cè)脊髓灰質(zhì)中神經(jīng)細胞萎縮、水腫,背側(cè)較明顯;BWSTT組大鼠脊髓解剖結(jié)構(gòu)較完整,仍可見局部出血和空洞,但程度較未訓(xùn)練組輕。3.延髓巨細胞網(wǎng)狀核尼氏染色延髓巨細胞網(wǎng)狀核尼氏染色觀察到,假手術(shù)組(161.71 ±9.55)、BWSTT 組(167.14±7.65)和未訓(xùn)練組(164.71± 13.03)三組間在神經(jīng)元數(shù)量上未見統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),三組間巨細胞網(wǎng)狀核神經(jīng)元形態(tài)也未見顯著變化。4.延髓巨細胞網(wǎng)狀核免疫熒光染色此核團VGLUT2免疫熒光染色顯示,假手術(shù)組的IOD(3138.88±312.45)最高,BWTT組(1944.23±376.51)次之,未訓(xùn)練組(977.38±246.36)最低,三組之間的比較都存在顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。5.延髓巨細胞網(wǎng)狀與運動功能的相關(guān)分析不完全脊髓損傷大鼠巨細胞網(wǎng)狀核IOD值與BBB評分之間存在明顯的相關(guān)性(r=0.975,P0.01)。結(jié)論1.不完全脊髓損傷后,中腦運動區(qū)腳橋核和延髓巨細胞網(wǎng)狀核神經(jīng)元可塑性降低。2.BWSTT能夠促進不完全性脊髓損傷大鼠后肢運動功能恢復(fù);3.BWSTT可提高中腦運動區(qū)腳橋核和延髓巨細胞網(wǎng)狀核神經(jīng)元可塑性,促進VGLUT2表達;4.BWSTT促進不完全性脊髓損傷大鼠后肢運動功能恢復(fù)機制與中腦運動區(qū)腳橋核和延髓巨細胞網(wǎng)狀核神經(jīng)元可塑性增強有關(guān),中腦運動區(qū)腳橋核和延髓巨細胞網(wǎng)狀核神經(jīng)元可能通過對脊髓CPG的調(diào)控來促進脊髓損傷大鼠后肢運動功能恢復(fù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R651.2

【參考文獻】

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本文編號:1593132

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