本文關(guān)鍵詞： 無菌性松動(dòng) 骨溶解 磨損顆粒 單核細(xì)胞 細(xì)胞因子　出處：《濱州醫(yī)學(xué)院》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：目前公認(rèn)的人工關(guān)節(jié)假體無菌性松動(dòng)主要是由于磨損顆粒誘導(dǎo)骨溶解導(dǎo)致。為更好地研究臨床常見磨損顆粒誘發(fā)骨溶解反應(yīng)初始階段的特征,我們觀察分析Ti6A14V, PMMA, UHMWPE和 Co-Cr等四種磨損顆粒對(duì)體外培養(yǎng)人外周血單核細(xì)胞的影響并了解其功能生物學(xué)活性的差異,進(jìn)一步探討各種磨損顆粒誘導(dǎo)骨溶解反應(yīng)引起無菌性松動(dòng)可能的作用機(jī)理。方法：選取15例健康志愿者,每人采集外周循環(huán)血40m1。采用密度梯度離心法分離單核細(xì)胞,分別同Ti6A14V, PMMA, UHMWPE和Co-Cr等四種磨損顆粒進(jìn)行共培養(yǎng)。采用臺(tái)盼藍(lán)染液檢測(cè)細(xì)胞存活率。根據(jù)添加磨損顆粒種類的不同分為四組,A組：單核細(xì)胞+Ti6A14V顆粒組；B組：單核細(xì)胞+PMMA顆粒組；C組：單核細(xì)胞+JHMWPE顆粒組；D組：單核細(xì)胞+Co-Cr顆粒組。每組根據(jù)顆粒/細(xì)胞比值為0、0.1、1、10、100、1000等不同比例添加磨損顆粒,培養(yǎng)72小時(shí)后提取細(xì)胞上清液。采用ELISA法檢測(cè)上清液中細(xì)胞因子TNF-α、IL-1和IL-6的表達(dá)水平。各組組內(nèi)比較觀察磨損顆粒濃度變化對(duì)單核細(xì)胞的影響；組間比較采用顆粒/細(xì)胞比值為10、100、1000時(shí)進(jìn)行觀察磨損顆粒理化性質(zhì)對(duì)單核細(xì)胞的影響。結(jié)果：我們發(fā)現(xiàn)所有組在加入不同濃度的顆粒前單核細(xì)胞存活率均大于95%。共培養(yǎng)72h后發(fā)現(xiàn)僅有D組顆粒/細(xì)胞比值為1000時(shí)單核細(xì)胞的存活率降至87%,其它各組單核細(xì)胞存活率仍大于95%。四種磨損顆粒均可激活單核細(xì)胞,促使其合成分泌不同水平的TNF-α、IL-1和IL-6等細(xì)胞因子。當(dāng)顆粒/細(xì)胞比值10、100或1000時(shí),活化的單核細(xì)胞分泌TNF-α、IL-1和IL-6的水平與原始幼稚的單核細(xì)胞(顆粒/細(xì)胞比值為0時(shí))相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各組組內(nèi)比較顯示A、B、C和D組中四種磨損顆粒不同的濃度對(duì)人外周血單核細(xì)胞分泌TNF-α、IL-1和IL-6具有不同的影響。A組、B組和C組中磨損顆粒對(duì)單核細(xì)胞分泌TNF-α、IL-1和IL-6的影響,伴隨顆粒濃度的增加出現(xiàn)不同程度地增強(qiáng)。TNF-α、IL-1和IL-6的表達(dá)水平與顆粒濃度呈正相關(guān)。但D組中當(dāng)顆粒/細(xì)胞比值達(dá)到1000時(shí)卻出現(xiàn)TNF-α、IL-1和IL-6的表達(dá)水平降低。組間比較四種磨損顆粒對(duì)TNF-α、IL-1和IL-6表達(dá)水平的影響顯示在骨溶解反應(yīng)的初始階段中Ti6Al4V顆粒的功能生物學(xué)活性最強(qiáng),其次是Co-Cr顆粒和PMMA顆粒,UHMWPE顆粒的功能生物學(xué)活性最低。結(jié)論：臨床常見四種磨損顆粒具有不同功能生物學(xué)活性,在骨溶解反應(yīng)初始階段對(duì)單核細(xì)胞的影響存在劑量依賴性。Ti6A14V顆粒較強(qiáng)功能生物學(xué)活性和Co-Cr顆粒存在一定的細(xì)胞毒性提示可能是影響骨溶解反應(yīng)初始階段的關(guān)鍵因素,日益積聚難以降解的PMMA和UHMWPE顆�？赡茉诩袤w周圍骨溶解反應(yīng)終末階段和形成假性肉芽腫過程中具有重要的作用。
[Abstract]:Objective: at present, the aseptic loosening of artificial joint prosthesis is mainly caused by wear particles inducing osteolysis. We observed and analyzed the effects of Ti6A14V, PMMA, UHMWPE and Co-Cr on human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) cultured in vitro. To further explore the possible mechanism of aseptic loosening induced by various wear particles. Methods: 15 healthy volunteers were selected to collect peripheral circulating blood 40m1.Monocytes were isolated by density gradient centrifugation. Four kinds of wear particles were co-cultured with Ti6A14V, PMMA, UHMWPE and Co-Cr, respectively. The cell survival rate was measured by trypan blue staining. According to the different types of wear particles added, they were divided into four groups: monocyte Ti6A14V particle group: monocyte Ti6A14V particle group: monocyte group: mononuclear cells. Group C of cell PMMA granules: monocyte JHMWPE granules group D: monocyte Co-Cr granule group. Wear particles were added to each group according to the ratio of 0 0. After 72 hours of culture, the supernatant was extracted. The expression of cytokine TNF- 偽 -1 and IL-6 in the supernatant was detected by ELISA assay. The effect of the concentration of wear particles on monocytes was observed comparatively in each group. The effects of physical and chemical properties of wear particles on monocytes were observed at 1000. Results: we found that the survival rate of monocytes was higher than 95% in all groups before adding different concentrations of particles. After 72 hours of culture, it was found that the survival rate of monocytes in group D was reduced to 87 when the ratio of particles / cells was 1000, and the survival rate of monocytes in other groups was still greater than 95.The four kinds of wear particles could activate monocytes. When the granulosa / cell ratio was 10,100 or 1000, the activated monocytes secreted TNF- 偽 IL-6 and IL-1 compared with the original immature monocytes (the granulosa / cell ratio was 0:00). The difference was statistically significant (P 0.05). The results showed that the different concentrations of four kinds of wear particles in group C and D had different effects on the secretion of TNF- 偽 偽 -1 and IL-6 by human peripheral blood monocytes. Group A, group B and group C had different effects of wear particles on mononuclear cells. The effect of TNF- 偽 on the secretion of IL-1 and IL-6, With the increase of particle concentration, the expression levels of IL-1 and IL-6 were positively correlated with the particle concentration, but the expression level of IL-1 and IL-6 decreased when the ratio of granule to cell reached 1000 in group D. The effects of four kinds of wear particles on the expression of IL-1 and IL-6 of TNF- 偽 showed that the functional biological activity of Ti6Al4V particles was the highest in the initial stage of osteolysis. Secondly, the functional biological activities of Co-Cr and PMMA particles were the lowest. Conclusion: four kinds of wear particles have different functional biological activities. In the initial stage of osteolysis reaction, there were dose-dependent effects of Ti6A14V particles on monocytes and cytotoxicity of Co-Cr particles in the initial stage of osteolysis, suggesting that these factors may be the key factors affecting the initial stage of osteolysis reaction. The accumulation of undegradable PMMA and UHMWPE particles may play an important role in the end stage of osteolysis and the formation of pseudogranulomatous granuloma around the prosthesis.
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R687.4

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本文編號(hào)：1536306