本文關(guān)鍵詞： 椎間盤 髓核細(xì)胞 器官培養(yǎng) 退變 壓應(yīng)力 凋亡 衰老　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景椎間盤退行性疾病是一種人群高發(fā)性疾病,其發(fā)病機(jī)理復(fù)雜。該疾病現(xiàn)有的臨床治療策略主要以緩解癥狀為主,不能從病因上防治椎間盤退變進(jìn)程。因此深入研究和認(rèn)識(shí)椎間盤退變機(jī)制具有重要的科學(xué)價(jià)值,將為尋找新的椎間盤退行性疾病的防治策略提供理論依據(jù)。壓應(yīng)力作用是椎間盤退變進(jìn)程中的重要外部病理因素,以往臨床觀察和基礎(chǔ)研究表明壓應(yīng)力對(duì)椎間盤退變發(fā)生率和椎間盤細(xì)胞的生物學(xué)行為具有重要的調(diào)控作用。一方面,過度壓應(yīng)力刺激可促進(jìn)椎間盤退變的發(fā)生,另一方面,特定條件的應(yīng)力刺激可逆轉(zhuǎn)椎間盤退變或維持椎間盤的健康狀態(tài)。這正反兩方面的不同效應(yīng)提示壓應(yīng)力對(duì)椎間盤細(xì)胞可能存在“窗口”式生物學(xué)效應(yīng)。此外,相關(guān)研究表明髓核細(xì)胞凋亡和衰老可能是相關(guān)病理因素導(dǎo)致椎間盤退變加速的重要原因。雖然已有研究表明高負(fù)荷壓應(yīng)力是椎間盤退變加速的重要外部病理因素,但關(guān)于高負(fù)荷壓應(yīng)力促進(jìn)椎間盤髓核細(xì)胞凋亡和衰老的作用處于初步研究階段,其機(jī)制有待深入闡明。離體椎間盤器官培養(yǎng)模型是椎間盤研究領(lǐng)域的新興模型。相對(duì)于以往動(dòng)物體內(nèi)模型和細(xì)胞培養(yǎng)模型而言,它既保留了椎間盤結(jié)構(gòu)的完整性,又可精確地控制應(yīng)力施加條件和其他理化因素。但由于難以保證椎間盤中央髓核組織充分的營養(yǎng)供應(yīng)和維持培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性,故維持髓核組織的生物活性是建立離體椎間盤器官培養(yǎng)模型的技術(shù)瓶頸。課題組前期自主研發(fā)了一種“智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng)”,該系統(tǒng)可實(shí)時(shí)反饋調(diào)控培養(yǎng)環(huán)境,并能施加不同參數(shù)的仿生應(yīng)力刺激,為建立離體椎間盤器官培養(yǎng)模型提供了技術(shù)設(shè)備支持,并使壓應(yīng)力生物學(xué)效應(yīng)的研究背景更加接近生理?xiàng)l件。因此,本研究在該智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng)的基礎(chǔ)上,通過相關(guān)策略改善椎間盤中央髓核組織營養(yǎng)供應(yīng)并優(yōu)化相關(guān)培養(yǎng)參數(shù),優(yōu)效建立了離體椎間盤器官培養(yǎng)模型;然后在該模型中,通過施加不同參數(shù)的仿生壓應(yīng)力,觀察了壓應(yīng)力對(duì)椎間盤髓核細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)“窗”;最后,深入研究了高負(fù)荷壓應(yīng)力促進(jìn)椎間盤退變的可能途徑及其機(jī)制。方法第一部分1.分離兔椎間盤,去除兩端骨性終板保留軟骨終板,隨后將離體兔椎間盤隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組中對(duì)椎間盤進(jìn)行預(yù)處理,即手術(shù)去除約1/3外層纖維環(huán)后,低濃度胰酶控制性疏松殘余外層纖維環(huán)組織;對(duì)照組中椎間盤不做該處理。2.椎間盤預(yù)處理后,體外用亞甲藍(lán)擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)觀察兩組椎間盤中溶質(zhì)擴(kuò)散效率,用組織形態(tài)學(xué)染色(HE)觀察椎間盤軟骨終板和內(nèi)層纖維環(huán)的結(jié)構(gòu)變化。3.將兩組椎間盤置于智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng)中進(jìn)行灌注培養(yǎng),在第7和14天時(shí)分析兩組髓核細(xì)胞活力、組織形態(tài)學(xué)變化(甲苯胺藍(lán)和HE)、髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)代謝相關(guān)分子的基因表達(dá)、髓核組織胞外基質(zhì)大分子(aggrecan和collagen II)的表達(dá)、髓核組織中生化組分(糖胺多糖GAG和羥脯氨酸HYP)含量;另外,在第14天時(shí)將兩組椎間盤髓核組織生物活性與新鮮椎間盤髓核組織比較。第二部分1.按第一部分方法分離豬椎間盤并進(jìn)行椎間盤培養(yǎng)前預(yù)處理。2.利用該智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng),首先將豬椎間盤置于不同葡萄糖水平(低糖:1.0 g/L;普糖:2.0 g/L;高糖:4.5 g/L)、不同滲透壓水平(低滲:330 m Osm/kg,等滲:430 m Osm/kg,高滲:550 m Osm/kg)和不同血清水平(5%,10%和20%)培養(yǎng)環(huán)境中進(jìn)行灌注培養(yǎng)7天,通過檢測(cè)髓核細(xì)胞活力、髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)代謝相關(guān)分子的基因表達(dá)和髓核組織中生化組分(GAG和HYP)含量,篩選出最能維持髓核組織生物活性的葡萄糖水平、滲透壓水平和血清水平。3.將豬椎間盤在上述優(yōu)化的培養(yǎng)環(huán)境中進(jìn)一步培養(yǎng)14天后,與新鮮椎間盤髓核組織比較,分析髓核細(xì)胞活力、組織形態(tài)(阿利新藍(lán)和HE染色)、髓核細(xì)胞分布、髓核組織MRI T2加權(quán)像、髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)代謝相關(guān)分子的基因表達(dá)、髓核組織胞外基質(zhì)大分子(aggrecan和collagen II)的表達(dá)、髓核組織中生化組分(GAG和HYP)含量。第三部分1.按第一和第二部分方法進(jìn)行豬椎間盤分離和椎間盤培養(yǎng)前預(yù)處理,并建立離體豬椎間盤器官培養(yǎng)模型。2.利用該智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng)對(duì)灌注培養(yǎng)中的椎間盤進(jìn)行施力刺激7天,分別觀察不同仿生壓應(yīng)力大小(0.1 MPa、0.2 MPa、0.4 MPa、0.8 MPa和1.3 MPa,其他應(yīng)力參數(shù)為:1.0 Hz的應(yīng)力頻率,2 h每天的應(yīng)力施加時(shí)間)、不同仿生壓應(yīng)力頻率(0.1Hz、0.5 Hz、1.0 Hz、3.0 Hz和5.0 Hz,其他應(yīng)力參數(shù)為:0.4 MPa的應(yīng)力大小,2 h每天的應(yīng)力施加時(shí)間)和不同仿生壓應(yīng)力作用時(shí)間(1 h/每天、2 h/每天、4 h/每天和8 h/每天,其他應(yīng)力參數(shù)為:0.4 MPa的應(yīng)力大小,1.0 Hz的應(yīng)力頻率)對(duì)椎間盤髓核組織的生物學(xué)效應(yīng)。沒有進(jìn)行壓應(yīng)力刺激的椎間盤視作對(duì)照組。3.培養(yǎng)結(jié)束后,分析各組中髓核細(xì)胞凋亡、組織形態(tài)學(xué)變化(阿利新藍(lán)和HE染色)、髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)代謝相關(guān)分子的基因表達(dá)、髓核組織胞外基質(zhì)大分子collagen II的蛋白表達(dá)、髓核組織中生化組分(GAG)含量。第四部分1.按第一部分方法分離大鼠椎間盤,獲取中央髓核組織后,用胰酶和I型膠原酶消化法獲取髓核細(xì)胞,采用雙相接種的方法將髓核細(xì)胞接種至支架材料上。然后將含髓核細(xì)胞的支架材料置于該智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng)中進(jìn)行灌注培養(yǎng)5天。同時(shí),每天對(duì)髓核細(xì)胞施加不同負(fù)荷的壓應(yīng)力刺激4 h,具體分組為無應(yīng)力對(duì)照組、低負(fù)荷壓應(yīng)力(2%壓縮形變)組和高負(fù)荷壓應(yīng)力(20%壓縮形變)組,壓應(yīng)力頻率為1.0 Hz。同時(shí),在高負(fù)荷壓應(yīng)力組中,利用通路抑制劑SB203580和清除劑NAC觀察p38 MAPK通路和胞內(nèi)活性氧(ROS)蓄積在高負(fù)荷壓應(yīng)力對(duì)髓核細(xì)胞影響中的作用。培養(yǎng)結(jié)束后,分析各組髓核細(xì)胞增殖情況、衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶活性、G 1期細(xì)胞周期阻滯比例、衰老相關(guān)標(biāo)志物(p16和p53)的基因和蛋白表達(dá)、端粒酶活性、胞內(nèi)ROS蓄積情況、髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)代謝和p38 MAPK通路活性。2.分離大鼠椎間盤后,利用該智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng),建立大鼠離體椎間盤器官培養(yǎng)模型。對(duì)離體大鼠椎間盤組織進(jìn)行施力灌注培養(yǎng)10天,分組為:無壓應(yīng)力對(duì)照組、低負(fù)荷壓應(yīng)力(0.1 MPa)組和高負(fù)荷壓應(yīng)力(1.3 MPa)組,壓應(yīng)力施加頻率為1.0 Hz,每天施加時(shí)間為4 h。培養(yǎng)結(jié)束后,分析各組髓核細(xì)胞衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶活性、衰老相關(guān)標(biāo)志物(p16和p53)的基因和蛋白表達(dá)、端粒酶活性、胞內(nèi)ROS蓄積情況、髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)代謝和p38 MAPK通路活性。第五部分1.按第一部分分離大鼠椎間盤,獲取中央髓核組織后,用胰酶和I型膠原酶消化法獲取髓核細(xì)胞,采用雙相接種的方法將髓核細(xì)胞接種至支架材料上。2.將含髓核細(xì)胞的支架材料置于該智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng)中進(jìn)行灌注培養(yǎng)5天。同時(shí),每天對(duì)髓核細(xì)胞施加不同負(fù)荷的壓應(yīng)力刺激4 h,具體分組為無應(yīng)力對(duì)照組、低負(fù)荷壓應(yīng)力(2%壓縮形變)組和高負(fù)荷壓應(yīng)力(20%壓縮形變)組,壓應(yīng)力頻率為1.0Hz。施力培養(yǎng)結(jié)束后,分析髓核細(xì)胞凋亡情況、Caspase 3活性、凋亡相關(guān)分子(Bcl-2,Bax,Caspase 3)的基因表達(dá)、凋亡相關(guān)分子(Bcl-2,Bax,Cleaved-caspase 3)的蛋白表達(dá)、N-CDH的基因和蛋白表達(dá),PI3K/Akt通路活性及下游GSK-3β的活性。3.將髓核細(xì)胞進(jìn)行N-CDH過表達(dá)處理后接種至支架材料上,然后給予高負(fù)荷壓應(yīng)力刺激,并進(jìn)行上述指標(biāo)檢測(cè)。4.高負(fù)荷壓應(yīng)力刺激下,用通路抑制劑LY294002抑制N-CDH過表達(dá)髓核細(xì)胞中PI3K/Akt通路活性后,再次進(jìn)行上述指標(biāo)檢測(cè)。結(jié)果第一部分1.椎間盤器官培養(yǎng)前經(jīng)該預(yù)處理方法處理后,內(nèi)層纖維環(huán)和上下端軟骨終板沒有明顯結(jié)構(gòu)性破壞,并且溶質(zhì)分子更加容易擴(kuò)散至椎間盤髓核組織。2.培養(yǎng)周期中,與對(duì)照組椎間盤相比,實(shí)驗(yàn)組椎間盤髓核組織細(xì)胞活力明顯增高、胞外基質(zhì)大分子的基因和蛋白表達(dá)升高、胞外基質(zhì)降解酶的基因表達(dá)下調(diào)、髓核組織主要胞外基質(zhì)組分的含量明顯升高。3.培養(yǎng)14天后,與新鮮椎間盤比較時(shí),實(shí)驗(yàn)組中椎間盤髓核組織在細(xì)胞活力和胞外基質(zhì)代謝方面更加接近新鮮椎間盤髓核組織。第二部分1.椎間盤在不同葡萄糖水平、不同滲透壓水平和不同血清水平培養(yǎng)7天后,發(fā)現(xiàn)高糖(4.5 g/L)、等滲(430 m Osm/kg)和10%血清的培養(yǎng)條件能較好地維持椎間盤髓核組織細(xì)胞活力、胞外基質(zhì)大分子及基質(zhì)降解酶抑制因子的基因表達(dá)、胞外基質(zhì)主要生化組分(GAG和HYP)的含量,同時(shí)這些培養(yǎng)條件可一定程度上降低基質(zhì)降解酶的基因表達(dá)。2.與新鮮髓核組織比較,椎間盤在該優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境中(高糖、等滲、10%血清)培養(yǎng)14天后,髓核組織在細(xì)胞活力、細(xì)胞形態(tài)及分布、組織親水性,和胞外基質(zhì)合成代謝方面仍保持較好的生物活性。第三部分1.各壓應(yīng)力組間比較,在1.3 MPa組、5.0 Hz組和8 h組中,椎間盤髓核組織中細(xì)胞凋亡率明顯增高,胞外基質(zhì)大分子表達(dá)降低,基質(zhì)降解酶的表達(dá)升高,髓核組織GAG的含量下降,髓核組織collagen II蛋白表達(dá)降低。2.與無壓應(yīng)力對(duì)照組比較,其他壓應(yīng)力大小(0.1-0.4 MPa)組、壓應(yīng)力頻率(0.1-3.0Hz)組和壓應(yīng)力作用時(shí)間(1-4 h)組在髓核細(xì)胞活力、髓核組織胞外基質(zhì)代謝相關(guān)分子的表達(dá)和髓核組織GAG含量上可保持相對(duì)“健康”的狀態(tài)。第四部分1.髓核細(xì)胞三維培養(yǎng)模型和椎間盤器官培養(yǎng)模型中,相對(duì)于低負(fù)荷壓應(yīng)力組和對(duì)照組而言,高負(fù)荷壓應(yīng)力可增加髓核細(xì)胞衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶活性,抑制髓核細(xì)胞增殖活性和端粒酶活性,上調(diào)衰老相關(guān)標(biāo)志物(p16和p53)的表達(dá),降低髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)生物合成能力。同時(shí),高負(fù)荷壓應(yīng)力可顯著增加胞內(nèi)ROS蓄積,并增加p38 MAPK通路活性。2.髓核細(xì)胞三維培養(yǎng)模型中,在高負(fù)荷壓應(yīng)力下,加入ROS清除劑NAC后,發(fā)現(xiàn)衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶活性降低,髓核細(xì)胞增殖活性和端粒酶活性增加,衰老相關(guān)標(biāo)志物(p16和p53)的表達(dá)下調(diào),髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)生物合成能力也有增強(qiáng)。另外,NAC可有效地減少髓核細(xì)胞胞內(nèi)ROS蓄積,但NAC對(duì)p38 MAPK通路的活性無明顯影響。3.髓核細(xì)胞三維培養(yǎng)模型中,在高負(fù)荷壓應(yīng)力下,加入抑制劑SB203580抑制p38MAPK通路后,發(fā)現(xiàn)髓核細(xì)胞胞內(nèi)ROS蓄積減少,衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶活性和衰老相關(guān)標(biāo)志物(p16和p53)的表達(dá)降低,髓核細(xì)胞增殖活性、端粒酶活性和髓核細(xì)胞胞外基質(zhì)生物合成能力增加。第五部分1.相對(duì)于對(duì)照組和低負(fù)荷壓應(yīng)力組而言,高負(fù)荷壓應(yīng)力下髓核細(xì)胞凋亡率和Caspase 3活性明顯增加,抗凋亡分子Bcl-2的表達(dá)降低,促凋亡分子(Bax和Caspase3/Cleaved-caspase 3)的表達(dá)增加。同時(shí)發(fā)現(xiàn)高負(fù)荷壓應(yīng)力下,N-CDH的表達(dá)和PI3K/Akt通路活性明顯降低,但GSK-3β蛋白活性增強(qiáng)。2.高負(fù)荷壓應(yīng)力下,髓核細(xì)胞過表達(dá)N-CDH后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡率和Caspase 3活性降低、抗凋亡分子Bcl-2的表達(dá)升高,促凋亡分子(Bax和Caspase 3/Cleaved-caspase3)的表達(dá)下降,同時(shí)PI3K/Akt通路活性增加,但GSK-3β蛋白活性減弱。3.高負(fù)荷壓應(yīng)力下,LY294002抑制N-CDH過表達(dá)的髓核細(xì)胞中PI3K/Akt通路活性后,發(fā)現(xiàn)髓核細(xì)胞凋亡率和Caspase 3活性增加,抗凋亡分子Bcl-2的表達(dá)降低,促凋亡分子(Bax和Caspase 3/Cleaved-caspase 3)的表達(dá)增加。同時(shí)發(fā)現(xiàn)GSK-3β蛋白活性增強(qiáng),但N-CDH的表達(dá)不受抑制劑LY294002的影響。結(jié)論1.本研究建立了一種椎間盤培養(yǎng)前預(yù)處理方法,該預(yù)處理方法可促進(jìn)溶質(zhì)分子擴(kuò)散至椎間盤中央髓核髓核組織;在14天的離體椎間盤器官灌注培養(yǎng)周期中,該方法能保持較穩(wěn)定的髓核細(xì)胞活力和胞外基質(zhì)合成。2.本研究在智能化仿生組織培養(yǎng)系統(tǒng)的基礎(chǔ)上,優(yōu)化了椎間盤體外培養(yǎng)時(shí)的培養(yǎng)基條件,發(fā)現(xiàn)高糖(4.5 g/L)、等滲(430 m Osm/kg)和10%血清組合的優(yōu)化培養(yǎng)條件能使椎間盤髓核組織保持與新鮮髓核組織相近的生物活性。3.本研究中證明高強(qiáng)度、高頻率及長時(shí)間的壓應(yīng)力刺激均可促進(jìn)離體椎間盤髓核組織中細(xì)胞凋亡并破壞胞外基質(zhì)的自穩(wěn)態(tài);但一定范圍的壓應(yīng)力大小(0.1-0.4 MPa)、壓應(yīng)力頻率(0.1-3.0 Hz)和壓應(yīng)力作用時(shí)間(1-4 h)可使離體椎間盤髓核組織保持相對(duì)“健康”的生物活性。4.高負(fù)荷壓應(yīng)力可能通過激活p38 MAPK通路后增加胞內(nèi)ROS蓄積,進(jìn)而促進(jìn)椎間盤髓核細(xì)胞衰老。這一機(jī)制可能是高負(fù)荷壓應(yīng)力加速椎間盤退變的可能途徑。5.高負(fù)荷壓應(yīng)力可通過下調(diào)N-CDH表達(dá)降低PI3K/Akt通路活性,繼而增加下游GSK-3β的活性,后者可促進(jìn)髓核細(xì)胞經(jīng)線粒體途徑發(fā)生凋亡。這一機(jī)制可能是高負(fù)荷壓應(yīng)力加速椎間盤退變的另一可能途徑。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R681.53

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 任龍喜;焦守國;尹建;韓正鋒;白秋鐵;;吲哚菁綠染色對(duì)980nm半導(dǎo)體激光消融髓核組織效果的影響[J];中國脊柱脊髓雜志;2009年04期

2 宋若先,宮良泰,許復(fù)郁,袁震;游離型腰椎髓核組織再吸收及縮小的可能機(jī)制[J];中國臨床康復(fù);2004年08期

3 王志偉;元虎;;新西蘭大白兔髓核組織在自身椎管內(nèi)巨噬細(xì)胞浸潤的動(dòng)態(tài)變化及其意義[J];中國矯形外科雜志;2011年09期

4 王紅霞;趙娜克;楊英;;經(jīng)皮激光椎間盤汽化減壓術(shù)治療腰椎間盤突出癥103例護(hù)理體會(huì)[J];齊魯護(hù)理雜志;2007年10期

5 向選平,劉憲華,陳波;胸_(11～12)椎間盤突出1例報(bào)告[J];頸腰痛雜志;2000年03期

6 周愛平,周玲;經(jīng)皮腰椎間盤切吸術(shù)護(hù)理體會(huì)[J];河南外科學(xué)雜志;2000年03期

7 西永明,胡有谷;椎間盤退行性改變的病因及發(fā)病機(jī)制[J];齊魯醫(yī)學(xué)雜志;2003年01期

8 王國文,陳凌云;腰5骶1極外側(cè)型椎間盤突出一例報(bào)告[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2004年01期

9 李現(xiàn)林;椎間盤內(nèi)外注射配合藥物治療椎間盤源性下腰痛[J];中醫(yī)正骨;2004年10期

10 徐新文;孫莉萍;王群;;椎間盤學(xué)校在預(yù)防腰椎間盤突出癥復(fù)發(fā)中的作用探討[J];護(hù)理研究;2007年32期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 徐偉明;恩和;陳阿梅;;急性損傷和退變椎間盤髓核組織超微結(jié)構(gòu)觀察[A];中國解剖學(xué)會(huì)2013年年會(huì)論文文摘匯編[C];2013年

2 徐軍;;椎間盤內(nèi)破裂的診斷和治療[A];繼往開來 與時(shí)俱進(jìn)——2003年康復(fù)醫(yī)學(xué)發(fā)展論壇暨慶祝中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會(huì)成立20周年學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

3 劉燕玲;;別亂動(dòng)我的椎間盤[A];第四屆中國整脊學(xué)學(xué)術(shù)交流大會(huì)論文集[C];2008年

4 馮建華;;椎間盤突出的調(diào)養(yǎng)與康復(fù)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 吳毅文;吳紹偉;王斌;;突出的椎間盤能還納嗎?[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會(huì)頸椎病專業(yè)委員會(huì)第十次學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

6 童國海;陸勇;丁曉毅;顏凌;陳克敏;;半導(dǎo)體激光氣化椎間盤突出的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國放射學(xué)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2006年

7 姜宏;劉錦濤;王擁軍;;破裂型椎間盤突出重吸收機(jī)理的研究[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會(huì)頸椎病專業(yè)委員會(huì)第十次學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

8 姜宏;劉錦濤;;大鼠破裂型椎間盤突出模型的建立及其重吸收機(jī)理的研究[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國頸椎病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

9 李旭輝;呂有望;王喜彬;;經(jīng)皮自動(dòng)式椎間盤初級(jí)吸儀治療腰椎間盤突出癥附20例報(bào)告[A];全國第六屆骨科微創(chuàng)手術(shù)與多種針刀手術(shù)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

10 柳健;;探討椎間盤微創(chuàng)治療的臨床體會(huì)[A];首屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨科微創(chuàng)學(xué)術(shù)交流會(huì)暨專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)論文匯編[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 李博;運(yùn)動(dòng)預(yù)防椎間盤突出[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2001年

2 張震行;游泳有助預(yù)防椎間盤突出[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

3 中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)整脊分會(huì)主任委員 韋以宗;運(yùn)用中醫(yī)原創(chuàng)思維 反思“椎間盤學(xué)說”[N];健康報(bào);2012年

4 海濤;椎間盤突出調(diào)養(yǎng)藥膳[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2005年

5 劉燕玲;“別亂動(dòng)我的椎間盤”[N];健康報(bào);2007年

6 通訊員　 那偉 高樹灼;第一醫(yī)院推出“椎間盤超市”[N];廈門日?qǐng)?bào);2006年

7 記者 馮立中;椎間盤突出治療應(yīng)首選絕對(duì)臥床[N];健康報(bào);2010年

8 通訊員 李春梅;椎間盤突出切莫盲目手術(shù)[N];家庭醫(yī)生報(bào);2009年

9 記者 牟春麗;創(chuàng)新技術(shù) 立足椎間盤醫(yī)學(xué)前沿[N];西安日?qǐng)?bào);2006年

10 記者 牟春麗;創(chuàng)新技術(shù) 立足椎間盤醫(yī)學(xué)前沿[N];西安日?qǐng)?bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李培;離體椎間盤模型中壓應(yīng)力對(duì)髓核組織的生物效應(yīng)及促退變機(jī)制的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2017年

2 王飛;兩種腰椎手法對(duì)椎間盤和關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)應(yīng)力應(yīng)變的作用比較[D];中國中醫(yī)科學(xué)院;2016年

3 方向前;去細(xì)胞同種椎間盤：使退變椎間盤再生的天然生物材料[D];浙江大學(xué);2016年

4 肖文豐;3T MR腰骶神經(jīng)成像顯示椎間盤突出位置與神經(jīng)根壓迫及體征的相關(guān)性[D];山東大學(xué);2016年

5 張宏軍;神經(jīng)生長相關(guān)蛋白-43在大鼠椎間盤炎癥模型中的表達(dá)及意義[D];浙江大學(xué);2007年

6 趙新剛;重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7基因腺病毒載體轉(zhuǎn)染對(duì)兔受損椎間盤影響的體內(nèi)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

7 李鋼;椎間盤器官整體培養(yǎng)條件下髓核組織的變化[D];浙江大學(xué);2010年

8 劉超;糖尿病對(duì)椎間盤和終板退變的影響：臨床觀察和實(shí)驗(yàn)研究[D];浙江大學(xué);2011年

9 李長青;傷生髓核組織工程細(xì)胞支架的構(gòu)建和性能研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 辛洪奎;組織工程化同種異體椎間盤移植的體外及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 孟飛;MMP-3、MMP-9在退變椎間盤髓核組織中的表達(dá)及相關(guān)性研究[D];鄭州大學(xué);2015年

2 趙菲;醫(yī)用臭氧對(duì)腰椎間盤突出癥患者髓核組織的結(jié)構(gòu)以及NO和IL-6表達(dá)的影響[D];山東大學(xué);2015年

3 黃震;基質(zhì)金屬蛋白酶-28在人退變腰椎間盤組織中的表達(dá)及意義[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2015年

4 張煉;NDRG2在退變椎間盤髓核組織中的表達(dá)及其與髓核細(xì)胞衰老關(guān)系的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 楊洋;腰椎間盤纖維環(huán)縫合的生物力學(xué)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 楊曉靜;犬胸腰段椎間盤突出的診斷與治療[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年

7 周嘉駿;大鼠尾部椎間盤在異�；《认碌耐诵行愿淖兗坝邢拊治鯷D];蘇州大學(xué);2016年

8 劉湘;椎間盤不對(duì)稱切除對(duì)小關(guān)節(jié)壓力及腰椎穩(wěn)定性的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

9 張斌;椎間盤的同步輻射成像研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

10 顧蕊;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在活體兔椎間盤內(nèi)存活狀態(tài)觀察[D];青島大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：1519132