CXCR4基因過表達(dá)HUCB-late EPCs移植對(duì)大鼠后肢缺血組織血管新生的影響
本文關(guān)鍵詞: 趨化因子受體 后肢缺血模型 血管新生 出處:《中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志》2017年03期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的觀察轉(zhuǎn)染rAAV_6-CXCR4和rAAV_6-GFP后,初步探索其是否對(duì)HUCB-late內(nèi)皮組細(xì)胞(EPCs)的體外成血管能力及體內(nèi)缺血組織血管新生有影響。方法用rAAV_6-CXCR4、rAAV_6-GFP感染HUCB-late EPCs,Western Blot檢測(cè)CXCR4蛋白表達(dá)水平;應(yīng)用基質(zhì)膠成血管實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的體外成血管能力。構(gòu)建SD大鼠后肢缺血模型,以一側(cè)股動(dòng)脈及分支結(jié)扎、離斷的方法構(gòu)建后肢缺血模型;18只大鼠建模成功后隨機(jī)摸球法分為3組?瞻捉M:損傷后6 h于局部注射500μL EGM-2;對(duì)照組:損傷后6 h于局部注射500μL含1×10~6個(gè)HUCB-late EPCs的EGM-2;實(shí)驗(yàn)組:損傷后6 h于局部注射500μL含1×10~6個(gè)CXCR4過表達(dá)HUCB-late EPCs的EGM-2。28天后,HE染色檢測(cè)缺血后肢肌肉間、肌肉旁微小血管情況;免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)肌肉間、肌肉旁新生血管CD31陽性內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)情況,并計(jì)算CD31陽性新生微血管數(shù)量。結(jié)果 rAAV_6-CXCR4感染組HUCB-late EPCs中CXCR4蛋白的表達(dá)高于rAAV_6-GFP感染組和對(duì)照組。3組體外成血管能力差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn),與空白組、對(duì)照組比較,實(shí)驗(yàn)組新生微血管表達(dá)的CD31~+內(nèi)皮細(xì)胞明顯增多(P0.05)。結(jié)論 CXCR4過表達(dá)的HUCB-late EPCs可以促進(jìn)SD大鼠后肢缺血組織新生微血管的形成。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of rAAV_6-CXCR4 and rAAV_6-GFP transfection on the in vitro vascularization of HUCB-late endothelial cells and angiogenesis of ischemic tissues in vivo. Methods the expression of CXCR4 protein in HUCB-late EPCs was detected by rAAV6-CXCR4 and rAAV6-GFP infected with HUCB-late EPCsT Western Blot. The vascular formation ability of transfected cells in vitro was detected by matrix gelatinization experiment. The model of hindlimb ischemia was established in SD rats and was ligated by unilateral femoral artery and branches. 18 rats were randomly divided into three groups: the blank group received local injection of 500 渭 L EGM-2 at 6 h after injury, the control group received local injection of 1 脳 106 HUCB-late EPCs at 6 h after injury, and the control group was divided into 3 groups. Experimental group: after 6 hours of injury, 500 渭 L EGM-2.28 containing 1 脳 10 ~ 6 CXCR4 overexpression of HUCB-late EPCs was injected locally to detect the muscle muscle after ischemia. The expression of CD31 positive endothelial cells in neovascularization was detected by immunohistochemical staining. Results the expression of CXCR4 protein in HUCB-late EPCs of rAAV_6-CXCR4 infected group was higher than that of rAAV_6-GFP infection group and control group (P 0.05). The expression of CD31 ~ endothelial cells increased significantly in experimental group. Conclusion HUCB-late EPCs overexpression of CXCR4 can promote the formation of neovascularization in ischemic tissue of hind limb of SD rats.
【作者單位】: 湖南省人民醫(yī)院心內(nèi)科;長(zhǎng)沙市第一人民醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】:湖南省衛(wèi)生廳科研基金課題(C2012-011) 湖南省教育廳科研項(xiàng)目(15C0828)
【分類號(hào)】:R654.3
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,本文編號(hào):1515905
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