本文關(guān)鍵詞： miR- 骨肉瘤 垂體瘤轉(zhuǎn)化基因　出處：《中國腫瘤生物治療雜志》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:探討miR-186對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲能力的影響,并探討其可能機(jī)制。方法:實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)骨肉瘤細(xì)胞HOS、U2-OS、Saos-2及成骨細(xì)胞NHOst中miR-186表達(dá),并運(yùn)用人工合成的miR-186模擬片段及對(duì)照scramble mimic轉(zhuǎn)染至人骨肉瘤HOS及U2-OS細(xì)胞內(nèi),運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中miR-186的表達(dá)水平;分別運(yùn)用CCK-8法、流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)及Transwall體外侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)miR-186對(duì)HOS及U2-OS細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲能力的影響;運(yùn)用Western blotting及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)miR-186過表達(dá)對(duì)細(xì)胞中垂體瘤轉(zhuǎn)化基因1(pituitary tumor transforming gene 1,PTTG1)的蛋白及m RNA表達(dá)水平的影響。結(jié)果:骨肉瘤細(xì)胞中miR-186呈現(xiàn)低表達(dá);轉(zhuǎn)染人工合成的miR-186片段可上調(diào)HOS及U2-OS細(xì)胞中miR-186的表達(dá);miR-186過表達(dá)組細(xì)胞的增殖能力較scramble組明顯下降(P0.01),轉(zhuǎn)染組HOS[(16.9±2.1)%vs(10.4±1.6)%,P0.05]及U2-OS[(22.6±2.9)%vs(14.1±2.2)%,P0.05]細(xì)胞的凋亡比例明顯高于scramble組,轉(zhuǎn)染組HOS及U2-OS細(xì)胞的穿膜數(shù)明顯低于scramble組(P0.01);轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中PTTG1的蛋白及m RNA表達(dá)水平均明顯下降(P0.01),而scramble組無明顯變化(P0.05);結(jié)論:miR-186能夠抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖及侵襲并促進(jìn)細(xì)胞凋亡,其作用機(jī)制可能與抑制PTTG1表達(dá)相關(guān)。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of miR-186 on the proliferation, apoptosis and invasion of osteosarcoma cells and its possible mechanism. MiR-186 was expressed in Saos-2 and NHOst of osteoblasts. Human osteosarcoma HOS and U2-OS cells were transfected with synthetic miR-186 mimic fragment and control scramble mimic. The expression of miR-186 in transfected cells was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. CCK-8 assay, flow cytometry and Transwall invasion assay were used to detect the proliferation of HOS and U2-OS cells by overexpression of miR-186. The effect of apoptosis and invasion ability; Western blotting and real-time fluorescence quantitative PCR were used to detect the effect of miR-186 overexpression on pituitary tumor transforming gene 1 (1). Pituitary tumor transforming gene 1. Results: the expression of miR-186 was low in osteosarcoma cells. The expression of miR-186 in HOS and U2-OS cells was up-regulated by transfection of synthetic miR-186 fragments. The proliferative ability of miR-186 overexpression group was significantly lower than that of scramble group, and HOS in transfection group was significantly lower than that in scramble group. [(16.9 鹵2.1 vs 10.4 鹵1.6) and U2-OS. [The percentage of apoptosis in VSN 14.1 鹵2.2mb (P 0.05) was significantly higher than that in scramble group (P < 0.05). The transmembrane number of HOS and U2-OS cells in transfection group was significantly lower than that in scramble group (P 0.01). The expression of PTTG1 protein and m RNA in the transfected cells decreased significantly, while in the scramble group there was no significant change in P0.05. Conclusion: miR-186 can inhibit the proliferation and invasion of osteosarcoma cells and promote the apoptosis of osteosarcoma cells. The mechanism may be related to the inhibition of PTTG1 expression.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院骨科;南昌大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81502329) 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院院內(nèi)課題資助項(xiàng)目(No.YCZQN201514)~~
【分類號(hào)】：R738.1
【正文快照】： 微小RNA(micro RNAs,mi RNA/mi R)是一類內(nèi)源HOS、U2-OS及Saos-2細(xì)胞株用RPMI 1640完全性、非編碼的小RNA分子。通過與靶基因的3’-UTR培養(yǎng)基(含有10%胎牛血清、100 U/ml青霉素和100區(qū)完全或不完全的結(jié)合,mi RNAs能夠參與靶基因的μg/ml鏈霉素),5%CO2及90%飽和濕度的條件下培

【參考文獻(xiàn)】

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9 朱U，

本文編號(hào)：1472713