目的:探討七氟醚預(yù)處理(Sevoflurane preconditioning,SPC)抑制TNF-α誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)與MAPK家族之間的關(guān)系。方法:實(shí)驗(yàn)分為三部分:(1)采用隨機(jī)數(shù)字表法,將體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)分成4組,每組設(shè)6個平行孔:對照組(C組)、SPC組(S組)、TNF-α處理組(T組)、SPC+TNF-α處理組(S+T組),應(yīng)用Western blot方法觀察七氟醚預(yù)處理對TNF-α誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)的影響以及MAPK家族磷酸化水平的變化;(2)結(jié)合第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果,采用隨機(jī)數(shù)字表法,將HUVEC隨機(jī)分為3組,每組設(shè)4個平行孔:TNF-α處理組(T組)、七氟醚預(yù)處理+TNF-α處理組(S+T組)、JNK抑制劑SP600125+TNF-α處理組(SP+T組),應(yīng)用Western blot技術(shù)測定各組細(xì)胞JNK磷酸化水平及ICAM-1的表達(dá)水平,觀察SPC對TNF-α誘導(dǎo)ICAM-1表達(dá)的影響與JNK激活的關(guān)系;(3)類似于第二部分實(shí)驗(yàn),采用隨機(jī)數(shù)字表法,將體外培養(yǎng)的HUVEC隨機(jī)分為3組,每組設(shè)4個平行孔:TNF-α處理組(T組)、SPC+TNF-α處理組(S+T組)、p38 MAPK抑制劑SB203580+TNF-α處理組(SB+T組),應(yīng)用Western blot技術(shù)測定各組細(xì)胞p38磷酸化水平及ICAM-1的表達(dá)量,觀察七氟醚預(yù)處理對TNF-α誘導(dǎo)ICAM-1表達(dá)的影響與p38MAPK激活的關(guān)系。結(jié)果:1.七氟醚預(yù)處理抑制TNF-α誘導(dǎo)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)與C組相比,S組臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1的表達(dá)無明顯變化(P0.05),T組ICAM-1表達(dá)則明顯增高(P0.01);與T組相比,S+T組ICAM-1表達(dá)明顯下降(P0.05)。2.七氟醚預(yù)處理抑制TNF-α誘導(dǎo)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞JNK、p38磷酸化程度的增高與C組相比,S組臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞JNK、p38、ERK1/2磷酸化水平無明顯差異(P0.05),T組JNK、p38、ERK1/2磷酸化水平明顯增高(P0.01);與T組比較,S+T組p-JNK、p-p38表達(dá)明顯降低(P0.05),ERK1/2磷酸化水平無明顯變化(P0.05)。3.七氟醚預(yù)處理抑制TNF-α誘導(dǎo)的HUVEC中ICAM-1表達(dá)與JNK的關(guān)系與T組相比,S+T組p-JNK、ICAM-1表達(dá)明顯減少(P0.05),SP+T組p-JNK、ICAM-1表達(dá)也明顯降低(P0.05)。4.七氟醚預(yù)處理抑制TNF-α誘導(dǎo)的HUVEC中ICAM-1表達(dá)與p38的關(guān)系與T組相比,S+T組p-p38、ICAM-1表達(dá)明顯減少(P0.05),SB+T組p-p38、ICAM-1表達(dá)也明顯降低(P0.05)。結(jié)論:1.七氟醚預(yù)處理后,抑制TNF-α導(dǎo)致的血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)的增高,提示SPC能夠降低內(nèi)皮細(xì)胞粘附因子的生成,表明七氟醚在減輕血管炎癥方面有著一定的作用。2.七氟醚預(yù)處理可以抑制TNF-α誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞JNK、p38MAPK磷酸化水平的增高,但是對ERK1/2的磷酸化程度沒有顯著影響,提示七氟醚預(yù)處理在血管內(nèi)皮水平的抗炎作用可能與減少JNK及p38MAPK的磷酸化激活有關(guān)。3.加入JNK及p38MAPK的特異性抑制劑后證明,TNF-α誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)可能與JNK及p38MAPK的磷酸化激活有關(guān),而SPC通過減少JNK、p38MAPK的磷酸化激活,最終使ICAM-1的表達(dá)降低,從而減輕了血管內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R614

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 陳建勇;王聰;王娟;曹禮榮;;MAPK信號通路研究進(jìn)展[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2011年08期

本文編號：1455736