促紅細(xì)胞生成素對脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞分化能力的影響
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【摘要】:目的探討成體大鼠脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)在促紅細(xì)胞生成素(EPO)的作用下體外分化的形態(tài)學(xué)表現(xiàn),為成體脊髓源性NSCs移植治療脊髓損傷提供理論基礎(chǔ)。方法利用無血清懸浮培養(yǎng),體外分離培養(yǎng)SD大鼠脊髓源性NSCs,隨后以含血清培養(yǎng)基貼壁誘導(dǎo)分化培養(yǎng)7 d,行免疫細(xì)胞化學(xué)染色,以抗巢蛋白(Nestin)鑒定NSCs,以抗微管相關(guān)蛋白2(MAP2)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色檢測NSCs的分化情況。選取第3代NSCs,向培養(yǎng)基中添加EPO,使EPO的終濃度為10 IU/ml,并設(shè)不添加EPO的對照組,免疫熒光共聚焦顯微鏡下分別觀察并計數(shù)各組神經(jīng)元/細(xì)胞總數(shù)得出百分率。結(jié)果 SD大鼠脊髓組織體外懸浮培養(yǎng)可獲得大量神經(jīng)球,所獲得的神經(jīng)球均表達Nestin蛋白,以含血清培養(yǎng)基貼壁誘導(dǎo)分化培養(yǎng),可檢測出MAP2和GFAP陽性細(xì)胞;EPO組誘導(dǎo)分化后,表達MAP2陽性細(xì)胞較對照組顯著提高(P0.05)。結(jié)論 SD大鼠脊髓體外培養(yǎng)可獲得NSCs,EPO可促進成體脊髓源性NSCs向神經(jīng)元方向分化。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科;安徽醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院骨科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(編號:81171173)
【分類號】:R651.2
【正文快照】: 2015-09-30接收脊髓損傷是骨科臨床工作中一種常見損傷,隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展和進步,其死亡率已經(jīng)明顯降低,但致殘率仍很高,主要原因是損傷后神經(jīng)功能的恢復(fù)目前醫(yī)學(xué)界仍沒有行之有效的治療措施。神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)是能夠自我更新、增殖和分化的一類細(xì)胞,有產(chǎn)生神
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