本文關(guān)鍵詞：不同預(yù)處理對(duì)機(jī)械通氣大鼠肺PAI-1表達(dá)的影響

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【摘要】：第一部分不同機(jī)械通氣條件下大鼠肺PAI-1表達(dá)的變化目的:觀察不同機(jī)械通氣條件下大鼠肺PAI-1表達(dá)的變化情況。方法:清潔級(jí)成年雄性SD大鼠72只,重量250?300克,按照隨機(jī)數(shù)字表分為C、S、R、L四組(n=18):對(duì)照組(C組,自主呼吸組),小潮氣量組(S組,VT=6ml/kg),常規(guī)潮氣量組(R組,VT=10ml/kg),大潮氣量組(L組,VT=40ml/kg),各組按機(jī)械通氣時(shí)間(2h、4h、6h)再隨機(jī)分為3個(gè)亞組(n=6)。C、S、R、L組作氣管切開插管處理后,C組保留自主呼吸,S、R、L組接小動(dòng)物呼吸機(jī)給予機(jī)械通氣,呼吸機(jī)參數(shù)均設(shè)置為RR 70次/分,Fi O2 21%、PEEP 0 cm H2O。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死大鼠,快速剖開胸腔取右肺組織稱重后測(cè)定濕重/干重比值(W/D),測(cè)定肺組織細(xì)胞凋亡率(TUNEL法),肺組織經(jīng)HE染色后光鏡下進(jìn)行肺損傷評(píng)分。比較不同潮氣量、不同機(jī)械通氣時(shí)間下大鼠肺PAI-1表達(dá)情況。同時(shí)收集大鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF),測(cè)定PAI-1和IL-8的表達(dá)情況。應(yīng)用Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)大鼠肺組織中PAI-1m RNA的表達(dá)。結(jié)果:與C組比較,L組機(jī)械通氣2h光鏡下可見肺組織內(nèi)彌散存在出血點(diǎn),機(jī)械通氣4h肺組織內(nèi)可見大量散在出血點(diǎn),肺泡間隔增寬,肺泡腔滲液較多,機(jī)械通氣6h肺組織結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,光鏡下可見極少量完整肺泡組織,肺組織功能基本喪失。肺組織損傷評(píng)分、肺濕重/干重比值(W/D)及肺組織細(xì)胞凋亡率隨著通氣時(shí)間的延長(zhǎng)均顯著性升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),C組與S組比較肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)無區(qū)別,S組機(jī)械通氣6h未出現(xiàn)明顯的肺損傷表現(xiàn)。與C組比較R組機(jī)械通氣2h、4h時(shí)間點(diǎn)肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)無明顯的肺損傷表現(xiàn),通氣6h光鏡下可見肺泡腔內(nèi)輕度滲液,但肺組織結(jié)構(gòu)正常。與C組比較L組肺PAI-1、IL-8和PAI-1m RNA隨著通氣時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)逐漸上調(diào)(P0.05),與S、R組中2h、4h、6h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較,L組機(jī)械通氣2h時(shí)間點(diǎn)測(cè)出PAI-1、IL-8和PAI-1 m RNA表達(dá),4h時(shí)間點(diǎn)表達(dá)上調(diào)明顯,6h時(shí)間點(diǎn)表達(dá)達(dá)到頂點(diǎn),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。C組與S組比較各指標(biāo)之間無差異。與C組比較R組2h、4h時(shí)間點(diǎn)未見PAI-1、IL-8和PAI-1 m RNA表達(dá),6h時(shí)間點(diǎn)時(shí)PAI-1可見少量表達(dá)。C組與S組內(nèi)2h、4h、6h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較PAI-1、IL-8和PAI-1 m RNA表達(dá)沒有上調(diào),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。R組內(nèi)通氣6h PAI-1、IL-8和PAI-1 m RNA少量表達(dá)。L組內(nèi)2h、4h、6h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)肺PAI-1、IL-8、PAI-1 m RNA隨通氣時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)明顯上調(diào),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:大潮氣量機(jī)械通氣可誘發(fā)大鼠肺組織及肺泡灌洗液中PAI-1表達(dá)上調(diào),機(jī)械通氣2h即可測(cè)出肺PAI-1表達(dá),機(jī)械通氣4h時(shí)PAI-1顯著上調(diào),6h時(shí)PAI-1表達(dá)達(dá)到高峰。第二部分不同預(yù)處理對(duì)機(jī)械通氣大鼠肺PAI-1表達(dá)的影響目的:探討小潮氣量機(jī)械預(yù)處理和七氟醚預(yù)處理對(duì)機(jī)械通氣大鼠肺PAI-1、LI-8和PAI-1m RNA表達(dá)的影響及與肺損傷之間的關(guān)系。方法:清潔級(jí)成年雄性SD大鼠18只,重量250?300克,按照隨機(jī)數(shù)字表分三組(n=6):L組(大潮氣量通氣組,VT=40ml/kg)、P1組(七氟醚預(yù)處理組,2%七氟醚)、P2組(機(jī)械通氣預(yù)處理組,VT=6ml/kg)。P1組大潮氣量通氣前30分鐘吸入2%七氟醚預(yù)處理,P2組給予VT=6ml/kg機(jī)械通氣預(yù)處理30分鐘,P1組和P2組預(yù)處理結(jié)束后給予VT=40ml/kg機(jī)械通氣。L、P1、P2組均行氣管切開插管后接小動(dòng)物呼吸機(jī)給予機(jī)械通氣4h,呼吸機(jī)參數(shù)均設(shè)置為RR 70次/分,Fi O2 21%、PEEP 0 cm H2O。機(jī)械通氣結(jié)束即刻靜脈注射戊巴比妥(100mg/kg)處死大鼠,留取右肺組織測(cè)定濕重/干重比值(W/D),測(cè)定肺組織細(xì)胞凋亡率,肺組織經(jīng)HE染色后光鏡下進(jìn)行肺損傷評(píng)分。采集大鼠支氣管肺泡灌洗液,測(cè)定PAI-1和IL-8的表達(dá)情況。應(yīng)用Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)大鼠肺組織中PAI-1m RNA的表達(dá)。結(jié)果:L組光鏡下肺形態(tài)學(xué)改變可見肺泡膜明顯增厚,肺內(nèi)散在大量出血點(diǎn),肺泡發(fā)生融合,P1組肺組織結(jié)構(gòu)基本完整,肺泡內(nèi)滲出液明顯。P2組肺泡壁增厚,但未見透明膜形成,肺組織結(jié)構(gòu)完整。與L組比較P1組、P2組機(jī)械通氣4h肺損傷評(píng)分、肺濕重/干重比值(W/D)及肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。P1組與P2組比較肺損傷評(píng)分、肺濕重/干重比值(W/D)及肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與L組比較P1組、P2組肺泡灌洗液(BALF)中PAI-1、IL-8及肺組織中PAI-1m RNA的表達(dá)明顯下調(diào),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。P2組與P1組比較肺泡灌洗液(BALF)中PAI-1、IL-8及肺組織中PAI-1m RNA的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:大潮氣量、長(zhǎng)時(shí)間機(jī)械通氣誘發(fā)大鼠肺PAI-1高表達(dá),小潮氣量機(jī)械通氣和七氟醚預(yù)處理使機(jī)械通氣大鼠肺PAI-1、LI-8、PAI-1m RNA的表達(dá)下調(diào)。提示PAI-1可能與機(jī)械通氣誘發(fā)肺損傷相關(guān),小潮氣量及七氟醚可能對(duì)肺損傷有保護(hù)作用,其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R614

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本文編號(hào)：1257209