兔人工膝關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染診斷的血清學(xué)指標(biāo)及二期翻修時(shí)機(jī)選擇的實(shí)驗(yàn)研究
本文關(guān)鍵詞:兔人工膝關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染診斷的血清學(xué)指標(biāo)及二期翻修時(shí)機(jī)選擇的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】:目的:通過(guò)建立兔人工膝關(guān)節(jié)置換術(shù)后金黃色葡萄球菌感染模型,一方面對(duì)潛在診斷感染的相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)進(jìn)行探索,另一方面對(duì)膝關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體周?chē)腥径诜迺r(shí)機(jī)的選擇作一實(shí)驗(yàn)研究。方法:(1)設(shè)計(jì)并定制兔人工膝關(guān)節(jié)假體;(2)建模:選取體重3kg左右的成年雄性健康新西蘭大白兔42只,分為ABCDEFG七組,每組6只,左膝均行兔人工膝關(guān)節(jié)置換術(shù),其中A組作為對(duì)照組,術(shù)中給予關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射0.9%的生理鹽水0.5ml;BCDEFG組作為實(shí)驗(yàn)組,術(shù)中給予關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射濃度為2×106 CFU/ml的金黃色葡萄球菌(簡(jiǎn)稱(chēng)金葡菌)ATCC25923 0.5ml.(3)一期清創(chuàng):接種4周待實(shí)驗(yàn)組均成功感染后,所有患膝行膝關(guān)節(jié)感染翻修一期清創(chuàng),放置載萬(wàn)古霉素的骨水泥間隔;(4)二期處死:根據(jù)清創(chuàng)術(shù)后骨水泥間隔放置時(shí)長(zhǎng)的不同,分別于清創(chuàng)術(shù)后2周(B組),4周(C組),6周(D組),8周(E組),10周(F組),12周(G組)處死實(shí)驗(yàn)組兔子。(5)實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目:1.血清學(xué)檢查:分別于造模前1天,造模后1,3,5,7,10,14天及清創(chuàng)后1,3,5,7,10,14天等時(shí)間點(diǎn)測(cè)定各組兔血清中紅細(xì)胞沉降率(ESR), C反應(yīng)蛋白(CRP),白介素-6(IL-6),降鈣素原(PCT), Toll樣受體2(TLR2),核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域2(NOD2),腫瘤壞死因子受體1 (TNFR1)等的水平;2.細(xì)菌學(xué)檢查:各組分別于清創(chuàng)術(shù)中及處死時(shí)取患膝假體周?chē)M織行細(xì)菌學(xué)檢查;3.病理學(xué)觀察:分別于清創(chuàng)術(shù)中及處死時(shí)取患膝假體周?chē)M織,石蠟包埋,切片,HE染色后顯微鏡下觀察。4.PCR:分別于清創(chuàng)術(shù)中及處死時(shí)取患膝假體周?chē)M織行16srRNA PCR檢測(cè);結(jié)果:1.血清學(xué)檢查(1)造模后,實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物各時(shí)間節(jié)點(diǎn)的TLR2.NOD2.TNFR1值與與對(duì)照組相比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)清創(chuàng)后,實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物TLR2、NOD2、TNFR1值在2周內(nèi)快速下降,4-6周恢復(fù)至正常水平,與CRP、IL6、PCT等的變化趨勢(shì)具有一致性。(3) Pearson相關(guān)系數(shù)計(jì)算:TLR2與CPR和IL6的相關(guān)系數(shù)分別為r=0.892、r =0.947; NOD2與CPR和IL6的相關(guān)系數(shù)分別為r=0.998、r=0.755;TNFR1與CPR和IL6的相關(guān)系數(shù)分別為r=0.981、r=0.863。2.細(xì)菌學(xué)檢查:(1)一期清創(chuàng)術(shù)中實(shí)驗(yàn)組6組36例膝關(guān)節(jié)所取組織標(biāo)本細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)結(jié)果均為陽(yáng)性,感染陽(yáng)性率為100%。(2)二期處死時(shí),實(shí)驗(yàn)組BCDEFG組的感染率分別為:B組33.3%(2/6)、C組16.7%(1/6)、D組0%(0/6)、E組0%(0/6)、F組0%(0/6)、G組0%(6/6)。3.病理學(xué)檢查(1)一期清創(chuàng)術(shù)中所取假體周?chē)M織標(biāo)本,顯微鏡下觀察均顯示呈感染炎癥表現(xiàn)。(2)二期處死時(shí)所取的組織標(biāo)本在顯微鏡下觀察顯示:B(2周組)、C(4周組)感染控制不佳;D(6周組)、E(8周組)、F(10周組)、G(12周組)等感染控制較好。4.PCR檢測(cè)16srRNA(1)一期清創(chuàng)術(shù)中,實(shí)驗(yàn)組6組36例膝關(guān)節(jié)所取組織標(biāo)本行16srRNA PCR檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性,感染陽(yáng)性率為100%。(2)二期處死時(shí),實(shí)驗(yàn)組BCDEFG組的PCR陽(yáng)性率分別為:B組50%(3/6)、C組33%(1/6)、D組0%(0/6)、E組0%(0/6)、F組0%(0/6)、G組0%(6/6)。結(jié)論:(1)TLR2、NOD2和TNFR1三者對(duì)于關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染的診斷具有良好的敏感性,且與CRP、ESR、IL6等指標(biāo)具有良好的相關(guān)性。(2)綜合CRP、ESR等指標(biāo)的變化水平,以及組織培養(yǎng)、病理、PCR等的檢測(cè)結(jié)果,建議可于一期清創(chuàng)術(shù)后6-8周行二期翻修術(shù)。
【學(xué)位授予單位】:南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R687.4
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1251651
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