本文關(guān)鍵詞：吡非尼酮在大鼠角膜堿燒傷后瘢痕形成中的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的:通過吡非尼酮對(duì)大鼠角膜堿燒傷模型的實(shí)驗(yàn)研究,評(píng)估抗纖維化藥物吡非尼酮在大鼠角膜堿燒傷后角膜上皮修復(fù)及瘢痕形成中的作用。方法:隨機(jī)選取健康的2月齡Wistar大鼠30只,雌雄不限,體質(zhì)量200-300g,隨機(jī)選擇6只作為正常對(duì)照組,24只大鼠于右眼制作堿燒傷模型,堿燒傷模型制作成功后隨機(jī)分為A、B兩組,每組12只。堿燒傷后,實(shí)驗(yàn)組即A組予以5g/L的吡非尼酮滴眼液,對(duì)照組B組予以磷酸鹽緩沖液(PBS),每組右眼行滴眼液治療,均每天滴6次連續(xù)14天。各組分別在應(yīng)用滴眼液治療后的第1天、第4天、第7天、第14天,在裂隙燈下觀察角膜損傷面積、角膜混濁情況,并于第7天及第14天分別處死6只大鼠,取下右眼角膜。通過角膜組織的HE染色觀察各組結(jié)構(gòu)的差異,免疫組化檢測(cè)Collagen Ⅳ、α-SMA、VEGF、CD34的表達(dá)情況,利用蛋白質(zhì)免疫印跡檢測(cè)α-SMA、VEGF、PEDF、CD31、CD34、NF-κB的表達(dá)情況。結(jié)果:1、通過對(duì)大鼠角膜缺損面積和角膜混濁情況的觀察,結(jié)果顯示:在大鼠角膜缺損面積的比較中實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在堿燒傷后第7天,差異明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。角膜混濁評(píng)分比較在第7天和第14天差異顯著,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、通過對(duì)吡非尼酮實(shí)驗(yàn)組和PBS對(duì)照組大鼠角膜組織的HE染色,結(jié)果顯示:在堿燒傷后第7天及第14天,PBS對(duì)照組角膜組織中見大量炎性細(xì)胞,而吡非尼酮實(shí)驗(yàn)組中同樣也有炎性細(xì)胞形成,但數(shù)量明顯較對(duì)照組少。3、通過對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠角膜組織的免疫熒光染色,結(jié)果顯示:正常角膜組織中無α-SMA及CD34表達(dá)。VEGF在正常角膜組織中極低表達(dá),Collagen Ⅳ表達(dá)于正常角膜基質(zhì)層。堿燒傷后Collagen Ⅳ、α-SMA、VEGF、CD34均有明顯表達(dá),Collagen Ⅳ、α-SMA在第7天及第14天吡非尼酮實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組,累積光密度值(IOD)比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P0.05,VEGF、CD34則在第14天差異最為顯著。4、蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果顯示:吡非尼酮實(shí)驗(yàn)組在堿燒傷后PEDF的表達(dá)較高并維持在一定的水平,α-SMA、CD31、CD34、VEGF表達(dá)量均低于PBS對(duì)照組,且具有一定的差異。但NF-κB的表達(dá)兩組未見明顯差異。結(jié)論:1、吡非尼酮通過下調(diào)堿燒傷后大鼠角膜組織中Collagen Ⅳ、α-SMA的表達(dá),抑制角膜瘢痕形成。2、吡非尼酮能抑制堿燒傷后大鼠角膜中VEGF的表達(dá),促進(jìn)PEDF的表達(dá),提示吡非尼酮在控制角膜新生血管形成也具有一定的作用。3、吡非尼酮可減少CD34及CD31的表達(dá),促進(jìn)角膜創(chuàng)面愈合,減輕炎癥反應(yīng),具有抗炎的作用。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R644

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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本文編號(hào)：1167549