本文關(guān)鍵詞：動(dòng)態(tài)力學(xué)刺激對構(gòu)建取向性絲素蛋白組織工程纖維環(huán)的影響

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【摘要】：目的:1.以絲素蛋白溶液為原料,采用濕仿法技術(shù),制備環(huán)形取向性絲素蛋白(SF)組織工程纖維環(huán)支架,并評(píng)估其理化性能。2.分離培養(yǎng)兔纖維環(huán)細(xì)胞,接種到該絲素蛋白纖維環(huán)支架,體外構(gòu)建組織工程纖維環(huán)并評(píng)估其理化性能。3.利用自行研制的生物反應(yīng)器研究力學(xué)刺激對體外構(gòu)建組織工程纖維環(huán)的影響。方法:1.以絲素蛋白溶液為原料,采用濕仿法制備環(huán)形取向性SF組織工程纖維環(huán)支架。采用體視顯微鏡、掃描電鏡(SEM)觀察支架觀察支架表面形態(tài)、纖維直徑。測定支架的孔徑、孔隙率、吸水率。微材料力學(xué)性能測試機(jī)測定支架壓縮彈性模量。2.分離培養(yǎng)兔纖維環(huán)(AF)細(xì)胞并接種至SF支架上,體外培養(yǎng)一段時(shí)間。通過體視顯微鏡觀察細(xì)胞-支架復(fù)合物的大體形態(tài),SEM、Live/dead染色觀察細(xì)胞在支架上的黏附、活性和增殖情況。組織工程纖維環(huán)分別于體外培養(yǎng)3、7、14天行組織學(xué)染色觀察,并行總DNA定量分析及蛋白多糖、膠原生化定量分析,同時(shí)檢測其力學(xué)性能的變化。3.利用自行研制的循環(huán)灌流力學(xué)加載儀對培養(yǎng)的組織工程纖維環(huán)進(jìn)行壓縮力學(xué)刺激。頻率1Hz,壓縮幅度分別為組織工程纖維環(huán)高度的5%、10%、15%、20%。刺激時(shí)間分別為3、7、14天,2小時(shí)/天。固定后行組織學(xué)切片染色觀察,并對總DNA、蛋白多糖和Ⅰ、Ⅱ行膠原進(jìn)行定量分析,檢測不同組之間壓縮彈性模量及組織工程椎間盤高度的變化。結(jié)果:1.體式顯微鏡和掃描電鏡示支架呈乳白色,中空環(huán)形,內(nèi)徑43，

本文編號(hào)：1158592