本文關(guān)鍵詞：Smad7在肌腱粘連組織中的表達(dá)及對肌腱成纖維細(xì)胞纖維化的作用

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【摘要】：[目的]通過觀察人肌腱粘連組織中Smad7的表達(dá)情況,并在TGF-β1誘導(dǎo)的肌腱成纖維細(xì)胞(TDFs))中沉默或過表達(dá)Smad7,觀察細(xì)胞纖維化相關(guān)指標(biāo)的變化,討論Smad7在肌腱粘連中的作用及調(diào)控機(jī)制。[方法]收集肌腱粘連組織及正常肌腱腱周組織,Western blotting檢測Smad7蛋白含量。設(shè)計并合成針對Smad7基因編碼區(qū)的siRNA,同時構(gòu)建Smad7基因表達(dá)載體,經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染至TDFs細(xì)胞,Real Time-PCR檢測胞內(nèi)Smad7基因含量,Western-blot檢測細(xì)胞中Smad7蛋白表達(dá);使用TGF-β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染后TDFs細(xì)胞,CCK-8檢測細(xì)胞增殖活性變化,Western blotting檢測纖維化相關(guān)的蛋白指標(biāo)。[結(jié)果]與正常腱周組織比較,肌腱粘連組織中Smad7蛋白減少。siRNA及Smad7基因過表達(dá)載體轉(zhuǎn)染TDFs,可以明顯抑制或者上調(diào)細(xì)胞內(nèi)Smad7基因含量及蛋白表達(dá),與未轉(zhuǎn)染組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);TGF-β1誘導(dǎo)的TDFs細(xì)胞,可以明顯增強(qiáng)細(xì)胞增殖活性(P0.01,vs未誘導(dǎo)組),siRNA轉(zhuǎn)染后,TGF-β1誘導(dǎo)TDFs增殖活性和纖維化蛋白指標(biāo)上升的趨勢進(jìn)一步增強(qiáng),Smad7基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)染則使得TGF-β1誘導(dǎo)TDFs增殖活性和纖維化蛋白指標(biāo)增強(qiáng)的趨勢得到明顯抑制,基因干預(yù)且誘導(dǎo)組與只誘導(dǎo)組細(xì)胞活性和蛋白含量相比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]肌腱粘連組織中Smad7蛋白減少,提示肌腱粘連發(fā)生過程中Smad7表達(dá)受抑制;Smad7基因過表達(dá)可以抑制TGF-β1誘導(dǎo)TDFs細(xì)胞纖維化。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院骨科;濟(jì)南市第三人民醫(yī)院骨科;
【基金】：上海市自然科學(xué)基金項目(編號:13ZR1431000)
【分類號】：R686.1
【正文快照】： 肌腱粘連嚴(yán)重影響手部功能,是手外科領(lǐng)域亟待解決的一個難題,臨床療效的提高有賴于對其發(fā)生機(jī)制的不斷深入研究。現(xiàn)有研究表明,在眾多可能參與粘連形成的細(xì)胞因子中,轉(zhuǎn)化生長因子-β(transfor-ming growth factor-β,TGF-β)被公認(rèn)為與組織器官纖維化關(guān)系最為密切[1],而TGF-β

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1156679