發(fā)布時(shí)間：2017-11-03 09:12

  本文關(guān)鍵詞：Genistein延緩大鼠椎間盤退變的初步研究

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【摘要】：目的:建立一種簡單有效,可重復(fù)性強(qiáng)的椎間盤退變動物模型,并應(yīng)用受體酪氨酸酶抑制劑(Genistein)對該椎間盤退變動物模型進(jìn)行干預(yù)研究,以此研究Genistein在治療椎間盤退行性疾病中存在的治療價(jià)值。方法:第一部分:三月齡清潔級雄性SD大鼠24只,以數(shù)字表法隨機(jī)分成4組:空白組和3個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每組6只。定位Co7/8、Co8/9及Co9/10椎間隙,分別用16G、18G及26G注射針頭分別穿刺,以纖維環(huán)穿刺法建立椎間盤退變模型,實(shí)驗(yàn)組分別于術(shù)后1周、2周和4周隨機(jī)選取6只大鼠,行磁共振T2像矢狀位掃描,根據(jù)椎間盤信號計(jì)算Thompson評分。檢查完畢后處死大鼠,取Co7/8、Co8/9及Co9/10椎間盤行HE染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色,根據(jù)HE染色計(jì)算組織學(xué)評分,并觀察髓核組織Ⅱ型膠原蛋白陽性表達(dá)趨勢。第二部分:三月齡清潔級雄性SD大鼠30只,以數(shù)字表法隨機(jī)分成5組:正常組、空白組和3個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每組6只�？瞻捉M為造模組,且不予Genistein注射;實(shí)驗(yàn)組造模后按Genistein的注射劑量(5mg/ml、10mg/ml和20mg/ml)分3組。MRI掃描、HE染色及Ⅱ型膠原免疫組化染色同第一部分。結(jié)果:第一部分:Co7/8椎間盤信號在穿刺后一周開始下降,而Co8/9、Co9/10信號仍呈現(xiàn)為高信號,兩周后Co7/8椎間盤信號進(jìn)一步降低,呈現(xiàn)出“Dark disc”,且椎間隙變小,Co8/9椎間盤信號開始降低,呈退變表現(xiàn),觀察期間Co9/10始終呈高信號,Co7/8在穿刺一周后的Thompson評分與正常椎間盤相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);在穿刺2周后,18G穿刺組的Thompson評分降低出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,Co9/10椎間盤在穿刺4周后,信號略微下降,但與正常組相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);穿刺一周后,Co7/8椎間盤髓核體積縮小,甚至消失,纖維環(huán)結(jié)構(gòu)紊亂,有的呈破損狀,且纖維環(huán)與髓核分界不清,髓核體積隨穿刺時(shí)間逐漸縮小,在穿刺四周時(shí),髓核組織被纖維組織代替,呈纖維化表現(xiàn),Co8/9椎間盤在穿刺兩周時(shí),髓核開始縮小,纖維環(huán)扭曲,呈退變表現(xiàn);四周時(shí),髓核細(xì)胞進(jìn)一步減少,纖維環(huán)結(jié)構(gòu)紊亂,Co9/10椎間盤造模觀察期間,僅在四周時(shí)出現(xiàn)髓核細(xì)胞少量減少,纖維環(huán)輕度破壞,根據(jù)組織學(xué)評分標(biāo)準(zhǔn),Co7/8椎間盤在造模一周后的組織學(xué)評分與正常椎間盤相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且評分隨時(shí)間逐漸升高;Co8/9椎間盤的評分在造模兩周時(shí)出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;Co9/10椎間盤的組織學(xué)評分無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);Co7/8椎間盤在穿刺后一周時(shí)Ⅱ型膠原染色顏色變淺,且隨時(shí)間增加,陽性染色逐漸減少,Co8/9椎間盤中Ⅱ型膠原蛋白陽性染色在兩周時(shí)開始變淡,且陽性染色區(qū)域變小,Co9/10椎間盤的Ⅱ型膠原免疫組化與正常椎間盤相比,無明顯差異,可見在髓核組織中呈廣泛的黃色或黃棕色染色。第二部分:造模后一周干預(yù)組與空白組相比,椎間盤信號有不同程度改善,藥物干預(yù)后的椎間盤信號強(qiáng)度隨藥物劑量的增加而增加,但隨著時(shí)間的增加,椎間盤信號逐漸降低,藥物干預(yù)一周時(shí),5mg/ml劑量注射組椎間盤Thompsom評分與空白組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),10mg/ml劑量注射組及20mg/ml劑量注射組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),在藥物干預(yù)四周時(shí),20mg/ml劑量注射組與空白組相比,差異仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);5mg/ml劑量注射組的組織學(xué)評分與空白組相比,在各時(shí)間點(diǎn)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),10mg/ml劑量注射組及20mg/ml劑量注射組的組織學(xué)評分在干預(yù)一周時(shí)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但在藥物干預(yù)四周時(shí),10mg/ml劑量注射組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,20mg/ml劑量注射組與空白組相比,差異仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);5mg/ml劑量注射組干預(yù)一周后,髓核中Ⅱ型膠原蛋白染色呈淡黃色,隨著時(shí)間增加,顏色逐漸變淡,在干預(yù)四周時(shí),髓核中基本無陽性染色可見;10mg/ml劑量注射組及20mg/ml劑量注射組在干預(yù)一周后,髓核組織中陽性染色區(qū)域較多,且呈黃色或棕黃色,在干預(yù)兩周時(shí),10mg/ml劑量注射組的陽性染色開始變淡,20mg/ml劑量注射組僅在干預(yù)四周時(shí)出現(xiàn)陽性染色區(qū)稍變小。結(jié)論:1.針刺纖維環(huán)法是一種方便可行的椎間盤退變模型的造模方法,且18G針頭最適合于造模,26G針頭適用于椎間注射藥物。2.Genistein能延緩大鼠椎間盤退變,但不能阻止退變的發(fā)生。3.Genistein的療效與藥物濃度相關(guān),藥物濃度越大,療效越明顯。4.Genistein在椎間盤退變的預(yù)防中存在一定應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：椎間盤退變 動物模型 大鼠 Genistein
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R681.53
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-12
• 引言12-14
• 第一部分 新型針刺法建立大鼠尾椎間盤退變的模型研究14-26
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料和方法14-17
• 2. 結(jié)果17-21
• 3. 討論21-24
• 4.參考文獻(xiàn)24-26
• 第二部分Genistein對大鼠椎間盤退變模型的影響研究26-37
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料和方法26-28
• 2. 結(jié)果28-33
• 3. 討論33-34
• 4.參考文獻(xiàn)34-37
• 結(jié)論37-38
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文38-39
• 綜述39-52
• 參考文獻(xiàn)45-52
• 致謝52-54

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4 劉q，

本文編號：1135540