本文關鍵詞：脫細胞纖維環(huán)基質的制備及其復合材料對纖維環(huán)源干細胞分化的調控研究

  更多相關文章： 脫細胞纖維環(huán)基質 纖維環(huán)源干細胞 復合材料 殼聚糖 聚丙烯酰胺凝膠

【摘要】：目的:制備豬源性脫細胞纖維環(huán)基質(Decellularized Annulus Fibrosus Matrix,DAFM),探究該基質對兔纖維環(huán)源干細胞(Annulus Fibrosus-derived stem cells,AFSCs)的分化行為的作用。最終制備具有不同彈性模量的脫細胞纖維環(huán)基質復合材料,考察其對兔纖維環(huán)源干細胞分化的調控作用。方法:通過豬纖維環(huán)組織制備DAFM膜,并從新西蘭大白兔獲得AFSCs后,將其接種于DAFM膜上,分別進行成脂、成骨、成軟骨三系分化誘導,以染色及RT-qPCR考察DAFM對干細胞分化行為的影響;將AFSCs種植于涂覆DAFM與涂覆I型膠原的不同彈性模量聚丙烯酰胺凝膠(Polyacrylamide Gel,PAG)上,通過RT-qPCR及Elisa比較AFSCs在兩者上的分化能力;制備不同彈性模量的DAFM與殼聚糖結合的復合材料,通過RT-qPCR,Elisa等方法測定AFSCs在其之上的分化能力。結果:制備出豬源DAFM;AFSCs在DAFM上生長良好,誘導分化結果顯示DAFM能較好維持AFSCs的干細胞分化差異性。制備出涂覆DAFM與涂覆collagen-I的PAG;實驗顯示AFSCs在兩者材料之上的增殖性能良好,但基因及蛋白檢測均顯示AFSCs于涂覆DAFM的各彈性模量PAG上的collagen I,collagen II和aggrecan基因的表達量均更高;同時collagen I表達隨基質彈性模量增大而增大,collagen II及aggrecan表達與其相反。成功制備不同彈性模量的DAFM與殼聚糖結合的復合材料,基因及蛋白檢測顯示出其AFSCs在其上的特性基因及蛋白表達隨復合材料彈性模量變化趨勢與實際纖維環(huán)組織一致。結論:DAFM有利于維持兔AFSCs的分化潛能,DAFM與殼聚糖結合的復合材料能有效調控兔AFSCs與實際纖維環(huán)各區(qū)一致的分化能力。
【關鍵詞】：脫細胞纖維環(huán)基質 纖維環(huán)源干細胞 復合材料 殼聚糖 聚丙烯酰胺凝膠
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R681.5
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-11
• 引言11-13
• 第一部分 脫細胞纖維環(huán)基質的制備及其表征13-30
• 材料與方法13-22
• 結果22-26
• 討論26-29
• 結論29-30
• 第二部分 DAFM及不同彈性模量PAG對AFSCs分化的調控30-46
• 材料與方法30-39
• 結果39-42
• 討論42-45
• 結論45-46
• 第三部分 DAFM/殼聚糖復合材料的制備及其對AFSCs的分化調控46-59
• 材料與方法46-52
• 結果52-56
• 討論56-58
• 結論58-59
• 全文總結59-60
• 綜述60-68
• 參考文獻68-78
• 中英文縮略詞對照表78-80
• 攻讀學位期間公開發(fā)表的論文80-81
• 參加學術會議情況81-82
• 主持與參與的科研項目82-83
• 致謝83-85

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