本文關(guān)鍵詞：FGF-2單獨(dú)以及與TGF-beta聯(lián)合對(duì)人間充質(zhì)干細(xì)胞向髓核樣細(xì)胞分化的影響

  更多相關(guān)文章： 間充質(zhì)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)化生長因子-beta 成纖維細(xì)胞生長因子-2 分化 髓核樣表型

【摘要】：目的：據(jù)報(bào)道人間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs)在特定條件下有向髓核樣細(xì)胞定向分化的能力。轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factor, TGF)-beta是目前使用最廣泛的促進(jìn)MSCs向髓核樣表型分化的生長因子,其他如成纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast growth factor, FGF)-2使用也較為廣泛。然而到目前為止,FGF-2單獨(dú)以及與TGF-beta聯(lián)合對(duì)MSCs的影響尚不明確,因此,本課題旨在探究與明確這些影響。方法：以包含F(xiàn)GF-2或TGF-beta/FGF-2的培養(yǎng)基對(duì)MSCs進(jìn)行培養(yǎng),并與基礎(chǔ)培養(yǎng)組或只含有TGF-beta的培養(yǎng)組進(jìn)行比較。在第7天,14天和21天對(duì)細(xì)胞樣本進(jìn)行收集,并進(jìn)行CCK-8,二甲基亞甲基藍(lán)(dimethyl methylene blue, DMMB),聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction, PCR)和免疫印跡等檢測以分析各組間的區(qū)別。結(jié)果：添加FGF-2的實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)顯示細(xì)胞增值率上升。功能基因標(biāo)志物以及髓核細(xì)胞標(biāo)志物在含有FGF-2的實(shí)驗(yàn)組表達(dá)下調(diào),功能蛋白的表達(dá)與基因一致。我們還發(fā)現(xiàn)GAG的合成在添加FGF-2的組中明顯下降。磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pho-extracellular signal-regulated kinase, pho-ERK) 1/2和磷酸化Smad3 (pho-smad3)表達(dá)在目標(biāo)實(shí)驗(yàn)組差異明顯。結(jié)論：所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示FGF-2單獨(dú)或與TGF-beta協(xié)同均可促進(jìn)MSCs的增殖。然而FGF-2在軟骨內(nèi)穩(wěn)態(tài)中呈負(fù)性調(diào)節(jié)作用,我們也認(rèn)為FGF-2不僅在MSCs定向分化為髓核樣細(xì)胞過程中無促進(jìn)作用,且抑制了TGF-beta的正向調(diào)節(jié)作用。
【關(guān)鍵詞】：間充質(zhì)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)化生長因子-beta 成纖維細(xì)胞生長因子-2 分化 髓核樣表型
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R681.5
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 1 引言10-12
• 2 材料與方法12-18
• 2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑12-13
• 2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器13-14
• 2.3 試驗(yàn)方法14-17
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析17-18
• 3 結(jié)果18-26
• 3.1 細(xì)胞增殖18
• 3.2 GAG含量測定18-19
• 3.3 基因表達(dá)分析19-22
• 3.4 免疫印跡結(jié)果分析22-26
• 4 討論26-29
• 5 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-36
• 綜述36-53
• 參考文獻(xiàn)44-53
• 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果53-55

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本文編號(hào)：1102205