miR-133b對(duì)骨肉瘤細(xì)胞MG-63增殖的抑制作用及其機(jī)制
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【摘要】:目的探討miR-133b是否通過(guò)下調(diào)KLF4抑制骨肉瘤細(xì)胞系MG-63的增殖。方法將MG-63細(xì)胞分為對(duì)照組、miR-NC組和miR-133bmimic組,對(duì)照組不做干預(yù),miR-NC組轉(zhuǎn)染miR-NC,miR-133bmimic組轉(zhuǎn)染miR-133bmimic。24 h后,Western blotting法檢測(cè)MG-63細(xì)胞中與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白p21、p27、PCNA、Ki-67以及KLF4的表達(dá),12、24、48 h后,MTT法觀察細(xì)胞增殖活力,利用熒光素酶試驗(yàn)驗(yàn)證KLF4是miR-133b的靶基因;將MG-63細(xì)胞隨機(jī)分為miR-133b組、miR-133b+KLF4組、miR-133b+空質(zhì)粒組,分別轉(zhuǎn)染miR-133bmimic、miR-133bmimic+KLF4過(guò)表達(dá)質(zhì)粒、miR-133bmimic+空質(zhì)粒。檢測(cè)MG-63細(xì)胞中p21、p27、PCNA、Ki-67、KLF4的表達(dá),并觀察細(xì)胞增殖情況。結(jié)果相比于miR-NC組,miR-133bmimic組中,24、48 h MG-63細(xì)胞的增殖活力降低(P均0.01),PCNA、Ki-67、KLF4的表達(dá)減少,p21、p27表達(dá)增加(P均0.05或0.01)。熒光素酶試驗(yàn)結(jié)果顯示,miR-133b能夠顯著降低KLF4-3'-UTR質(zhì)粒的熒光素活性(P0.05);相比于miR-133b+空質(zhì)粒組,miR-133+KLF4組MG-63細(xì)胞中PCNA、Ki-67表達(dá)增加(P均0.05),p21、p27表達(dá)減少(P均0.01),細(xì)胞增殖率升高(P0.01)。結(jié)論miR-133b通過(guò)下調(diào)KLF4表達(dá)從而抑制骨肉瘤細(xì)胞系MG-63的增殖。
【作者單位】: 淄博市第一醫(yī)院;濟(jì)南市兒童醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 骨肉瘤 miRNA-b Kruppel樣因子 細(xì)胞增殖
【分類號(hào)】:R738.1
【正文快照】: 微小RNA(miRNA)是一類長(zhǎng)度為18~25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA,主要作用于靶基因3'非翻譯區(qū)(3'UTR),通過(guò)引起靶基因mRNA的降解或者抑制其翻譯,最終調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)[1]。miR-133 b已被證實(shí)是一種抑癌miRNAs,可調(diào)節(jié)多種與腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移、侵襲有關(guān)的抑癌基因或蛋白,從而發(fā)揮抑制腫瘤
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9 朱U,
本文編號(hào):1071876
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