本文關(guān)鍵詞：IL-17對小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞相關(guān)炎性因子及A20、NF-κB蛋白表達(dá)影響的研究

  更多相關(guān)文章： 白介素17 星形膠質(zhì)細(xì)胞 炎性因子 A20 NF-κB

【摘要】：中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中,星形膠質(zhì)細(xì)胞對維持神經(jīng)系統(tǒng)功能的穩(wěn)定以及正常的信息傳遞具有極其重要的作用；同時在免疫反應(yīng)以及神經(jīng)疾病的病理生理過程中,參與神經(jīng)免疫及神經(jīng)組織的發(fā)育與再生修復(fù),并發(fā)揮重要作用。目前,中樞神經(jīng)損傷的治療依然十分困難,比如脊髓損傷(SCI)的治療。一方面是因?yàn)?中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織損傷之后,其再生和修復(fù)的能力較弱,因而在受到損傷后若要恢復(fù)正常比較困難；另一方面則是,損傷后的一些病理改變可以促進(jìn)并加劇了損傷部位相關(guān)的炎性反應(yīng),從而最終影響了脊髓功能的正�；謴�(fù)。研究表明,SCI后一系列細(xì)胞炎性因子誘導(dǎo)的繼發(fā)炎性反應(yīng)可加重SCI程度,如水腫、炎癥反應(yīng)、局部缺血、再灌注損傷及過氧化集團(tuán)異常變化等,從而對脊髓的正常生理功能造成嚴(yán)重?fù)p傷。在正常的脊髓中,星形膠質(zhì)細(xì)胞為神經(jīng)元的代謝提供支持,但在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后,損傷部位的星形膠質(zhì)細(xì)胞被激活,這些活化后的星形膠質(zhì)細(xì)胞又被稱為反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞,它們可分泌多種炎性因子,如腫瘤壞死因子(TNF)、白細(xì)胞介素(IL)、干擾素(IFN)等。這些改變進(jìn)一步促進(jìn)了更多的星形膠質(zhì)細(xì)胞被激活,同時又可造成大量膠質(zhì)瘢痕的形成。因此,研究相關(guān)炎性因子對星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響及作用機(jī)制可以為未來SCI的臨床治療提供理論依據(jù),具有重要意義。為深入研究IL-17對小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生炎性因子及調(diào)控蛋白的作用機(jī)制,本研究通過以下兩個方面進(jìn)行探討研究。第一部分 白介素17對小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)相關(guān)炎性因子的影響目的：研究白介素17對小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生相關(guān)炎性因子的表達(dá)。方法：首先,在體外培養(yǎng)小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞。之后,使用不同濃度的IL-17(10、20、50、100、200 ng/ml)刺激體外培養(yǎng)小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞,并于不同時間點(diǎn)(3h、6h、12h、24h和48h)行酶聯(lián)免疫吸附檢測(ELISA)法和qRT-PCR檢測IL-6、TNF-α、MIP-2、MCP-1/5的表達(dá)。結(jié)果：與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞在IL-17刺激6h和12h時間點(diǎn)上,IL-6、TNF-α、MCP-1/5和MIP-2所對應(yīng)的mRNA和蛋白的表達(dá)水平分別顯著升高(p0.05)。結(jié)論：IL-17刺激小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞之后,可以促進(jìn)其產(chǎn)生和表達(dá)相關(guān)炎性因子,而且還具有明顯的時效性。第二部分 白介素17對小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)A20、NF-κB調(diào)控蛋白的影響目的：研究白介素17對小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)A20、NF-κB調(diào)控蛋白的影響。方法：首先,在體外培養(yǎng)小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞。之后,使用IL-17(50ng/ml)刺激體外培養(yǎng)小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞,并于不同時間點(diǎn)(3h、6h、12h、24h和48h)行蛋白質(zhì)免疫印跡法(WB)和qRT-PCR檢測A20、NF-κB的表達(dá)。結(jié)果：與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞在IL-17刺激6h和12h時時間點(diǎn)上,NF-κB mRNA和蛋白的表達(dá)水平分別顯著升高(p0.05),與炎性趨化因子IL-6、TNF-α、MCP-1/5和MIP-2的表達(dá)趨勢一致；A20蛋白在12h時表達(dá)量顯著減少(p0.05),與p-NF-κB蛋白呈相反趨勢,但其mRNA的表達(dá)呈逐漸減少趨勢。結(jié)論：IL-17刺激小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞后,NF-κB的產(chǎn)生與上述炎性因子與趨化因子之間存在相關(guān)聯(lián)系,可能起著促進(jìn)作用；與此同時,A20與這些炎性因子和趨化因子的表達(dá)之間呈現(xiàn)出了相反的趨勢,可能與其負(fù)向調(diào)控的作用有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：白介素17 星形膠質(zhì)細(xì)胞 炎性因子 A20 NF-κB
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R651.2
【目錄】：

• 個人簡歷3-6
• 摘要6-9
• ABSTRACT9-13
• 前言13-20
• 參考文獻(xiàn)18-20
• 第一部分 白介素17對小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)相關(guān)炎性因子的影響20-41
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料20-21
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法21-28
• 3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理28
• 4. 結(jié)果28-34
• 5. 討論34-37
• 6. 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 第二部分 白介素17對小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)A20、NF-κB調(diào)控蛋白的影響41-60
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料41-44
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法44-48
• 3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理48
• 4. 結(jié)果48-52
• 5. 討論52-56
• 6. 結(jié)論56-57
• 參考文獻(xiàn)57-60
• 英漢縮略詞對照表60-62
• 綜述一62-70
• 參考文獻(xiàn)67-70
• 綜述二70-83
• 參考文獻(xiàn)78-83
• 致謝83-84
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄84

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1 樸春麗;于淼;姜U，

本文編號：1069134