發(fā)布時(shí)間：2017-10-15 19:36

  本文關(guān)鍵詞：miR146通過(guò)靶向Notch 1促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向髓核樣細(xì)胞分化

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【摘要】：目的探討miR146在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)向髓核樣細(xì)胞分化中的作用及其機(jī)制。方法從SD大鼠中分離培養(yǎng)BMSC,傳至第3代用于本實(shí)驗(yàn)。以TGFβ1(轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1)誘導(dǎo)BMSC向髓核樣細(xì)胞分化為模型。檢測(cè)TGFβ1誘導(dǎo)BMSC后蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型膠原蛋白(COLⅡ)和SOX 9的蛋白及mRNA表達(dá)水平;RT-PCR檢測(cè)miR146的表達(dá)水平。隨后通過(guò)上調(diào)或下調(diào)miR146水平,檢測(cè)ACAN、COLⅡ和SOX 9的蛋白及mRNA表達(dá)水平;雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)驗(yàn)證miR146的靶基因,并上調(diào)或下調(diào)miR146水平后檢測(cè)靶基因的蛋白表達(dá)水平;過(guò)表達(dá)靶基因并檢測(cè)其與miR146 mimic共轉(zhuǎn)染對(duì)ACAN、COLⅡ和SOX 9表達(dá)的影響。最后,上調(diào)或下調(diào)靶基因后,檢測(cè)miR146表達(dá)水平的變化。結(jié)果 TGFβ1誘導(dǎo)BMSC向髓核樣細(xì)胞分化后ACAN、COLⅡ、SOX 9和miR146高表達(dá)。上調(diào)miR146后,ACAN、COLⅡ和SOX 9的表達(dá)升高;下調(diào)miR146后ACAN、COLⅡ和SOX 9的表達(dá)降低。雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)證實(shí),Notch1是miR146的靶基因,miR146通過(guò)抑制Notch1的表達(dá)上調(diào)ACAN、COLⅡ和SOX 9的表達(dá)水平。上調(diào)Notch1后miR146表達(dá)下調(diào),下調(diào)Notch1后miR146表達(dá)上調(diào)。結(jié)論 miR146通過(guò)靶向Notch1促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向髓核樣細(xì)胞分化,Notch1對(duì)miR146亦具有負(fù)向調(diào)控作用。
【作者單位】： 河南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 髓核樣細(xì)胞 miR Notch
【基金】：河南省科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(No.102102310277)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R681.5
【正文快照】： 椎間盤(pán)退變(intervertebral disc degeneration,IDD)是中老年人的常見(jiàn)病及多發(fā)病,其病因主要是因?yàn)槔w維環(huán)和髓核的含水量、蛋白多糖和膠原等逐漸減少、彈性和韌性降低、張力下降、椎間隙變窄等[1]。常見(jiàn)的治療方法是手術(shù)治療和非手術(shù)治療,然而都不能從根本上修復(fù)椎間盤(pán)退變的，

本文編號(hào)：1038239