本文關(guān)鍵詞：低溫3D打印聯(lián)合冷凍干燥技術(shù)制備組織工程骨支架的研究

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【摘要】：目的探討采用低溫3D打印聯(lián)合冷凍干燥技術(shù)制備組織工程骨支架的方法,評(píng)價(jià)支架細(xì)胞相容性。方法取新鮮牛肌腱及家蠶生絲分別制備膠原蛋白(collagen,COL)、絲素蛋白(silk fibroin,SF)。采用計(jì)算機(jī)輔助軟件Solid Works2014設(shè)計(jì)大小為9 mm×9 mm×3 mm、孔徑為500μm的支架模型,以質(zhì)量比9∶3∶2的COL、SF和納米羥基磷灰石(nano-hydroxyapatite,n HA)混合物為原料,采用低溫3D打印聯(lián)合冷凍干燥技術(shù)構(gòu)建COL/SF/n HA復(fù)合支架。大體觀察結(jié)合掃描電鏡觀測(cè)支架形態(tài)及表面結(jié)構(gòu);采用力學(xué)試驗(yàn)機(jī)測(cè)量支架壓縮位移、壓縮應(yīng)力及彈性模量,分析力學(xué)性能;將支架與MC3T3-E1細(xì)胞共培養(yǎng)1、7、14、21 d,倒置顯微鏡及掃描電鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,RT-PCR及Western blot檢測(cè)MC3T3-E1細(xì)胞COLⅠ、ALP及骨鈣素(osteocalcin,OCN)基因及蛋白表達(dá)情況。結(jié)果低溫3D打印聯(lián)合冷凍干燥技術(shù)成功制備COL/SF/n HA復(fù)合支架,掃描電鏡示支架為大孔及微孔共存的3D多孔徑立體結(jié)構(gòu)。支架彈性模量為(344.783 07±40.728 55)k Pa,壓縮應(yīng)力為(0.062 15±0.007 15)MPa,壓縮位移為(0.958 41±0.000 84)mm。共培養(yǎng)后倒置顯微鏡、掃描電鏡觀察及MTT檢測(cè)均顯示,隨時(shí)間延長(zhǎng),支架表面大量細(xì)胞黏附,伸展充分,大孔孔壁上細(xì)胞生長(zhǎng)良好,數(shù)量逐漸增多。RTPCR及Western blot檢測(cè)示,MC3T3-E1細(xì)胞COLⅠ、ALP及OCN基因及蛋白均表達(dá)。結(jié)論低溫3D打印聯(lián)合冷凍干燥技術(shù)可精確控制支架微觀結(jié)構(gòu),得到大孔、微孔共存的組織工程骨支架,且細(xì)胞相容性良好,為下一步骨缺損修復(fù)研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生裝備研究所;天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院骨科;首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院血液科;
【關(guān)鍵詞】： 骨組織工程 支架材料 低溫D打印技術(shù) 冷凍干燥技術(shù) 細(xì)胞相容性
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31370942,31470935,11432016)~~
【分類號(hào)】：R318.08
【正文快照】： 1 Graduate School of Tianjin Medical University,Tianjin,300070,P.R.China;2 Military Academy of Medical Sciences Institute of MedicalEquipment;3 Department of Orthopedics,the General Hospital of Tianjin Medical University;4 Department of Hematology,Xuanwu

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 廖銀琳;高度有序多孔絲素蛋白材料的制備方法研究[D];蘇州大學(xué);2012年

2 牟星;甲醇、戊二醛交聯(lián)劑對(duì)絲素蛋白/明膠冷凍干燥多孔支架的性能影響[D];蘭州大學(xué);2014年

3 唐旭;SPS制備多孔HA骨修復(fù)材料的孔隙特征與力學(xué)性能研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 王耀祥;;冷凍干燥技術(shù)的進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)藥.合成藥.生化藥.制劑分冊(cè);1983年06期

2 林東海;;冷凍干燥技術(shù)在藥學(xué)上的應(yīng)用[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;1985年10期

3 于亞云;段姚堯;崔穎;;蛋白類藥物冷凍干燥技術(shù)的研究進(jìn)展[J];武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年01期

4 耿錕錕;熊非;朱家壁;顧寧;;用于藥物制劑的冷凍干燥技術(shù)及相關(guān)影響因素[J];藥學(xué)進(jìn)展;2011年03期

5 陳怡,羅順德;注射用中藥凍干粉研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥師;2003年11期

6 閆家福;仝燕;王錦玉;張鍇鑌;馬振山;王琳;王智民;;冷凍干燥技術(shù)及其在中藥研究中的應(yīng)用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2006年12期

7 張?zhí)烀?邊玲;;評(píng)《冷凍干燥技術(shù)與凍干機(jī)》[J];中國(guó)生化藥物雜志;2005年06期

8 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

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2 鄭賢德;林秀誠(chéng);趙鶴皋;;中國(guó)冷凍干燥技術(shù)進(jìn)展[A];第七屆全國(guó)冷凍干燥學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2002年

3 鄭賢德;趙鶴皋;湯有為;;冷凍干燥技術(shù)的進(jìn)展[A];全國(guó)第五屆冷凍干燥學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];1997年

4 ;冷凍干燥技術(shù)的發(fā)展[A];第九屆全國(guó)冷凍干燥學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2008年

5 鄭賢德;林秀誠(chéng);趙鶴皋;;我國(guó)冷凍干燥技術(shù)進(jìn)展[A];中國(guó)食品冷藏鏈新設(shè)備、新技術(shù)論壇論文集[C];2003年

6 ;前言[A];全國(guó)第五屆冷凍干燥學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];1997年

7 康景隆;;連續(xù)式食品冷凍干燥技術(shù)[A];中國(guó)制冷學(xué)會(huì)第十七次團(tuán)體會(huì)員大會(huì)暨第五屆全國(guó)食品冷藏鏈大會(huì)論文集[C];2004年

8 蘇秀榕;向怡卉;董明敏;;水發(fā)刺參的冷凍干燥技術(shù)研究[A];2007年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨水產(chǎn)微生態(tài)調(diào)控技術(shù)論壇論文摘要匯編[C];2007年

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本文編號(hào)：998271