本文關鍵詞：不同膠原支架對髓核間充質干細胞分化的影響

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【摘要】：目的 :比較不同膠原支架中髓核間充質干細胞(NPMSCs)的細胞存活、增殖能力和分化相關基因及蛋白表達等方面的差異。方法:在體外構建Ⅰ型、Ⅰ/Ⅱ型混合和Ⅱ型膠原支架,觀察其顯微結構、孔隙率及降解特性。從健康雄性大鼠尾椎提取NPMSCs,分別采用細胞微球、Ⅰ型膠原、Ⅰ/Ⅱ型混合膠原、Ⅱ型膠原支架培養(yǎng),其中細胞微球作為對照。通過乳酸脫氫酶(LDH)檢測材料生物毒性,CCK-8測定細胞增殖,實時定量PCR和Western Blot測定SOX9、聚集蛋白聚糖、Ⅰ型膠原和Ⅱ型膠原的基因和蛋白表達水平,阿爾新藍組織學染色檢測硫酸蛋白聚糖的表達。結果:Ⅰ型、Ⅰ/Ⅱ型混合和Ⅱ型膠原支架孔隙率均為90%以上,構建21d后的降解率分別為(10.30±0.66)%、(9.87±0.71)%和(10.40±0.53)%。培養(yǎng)后7d細胞LDH檢測結果Ⅰ型、Ⅰ/Ⅱ型混合和Ⅱ型膠原支架組分別為12.24±0.65、12.13±1.03、12.67±1.15,與對照組12.50±1.32比較無顯著性差異(P0.05)。膠原支架中培養(yǎng)5d及7d的細胞CCK-8檢測結果 (Ⅰ型膠原組為0.67±0.04、1.20±0.05,Ⅰ/Ⅱ型混合膠原組為0.62±0.05、1.20±0.07,Ⅱ型膠原組為0.69±0.02、1.34±0.04)明顯高于對照組(0.53±0.03,1.02±0.02)(P0.05)。培養(yǎng)21d后,三種膠原支架組與對照組比較,SOX9、Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原及聚集蛋白聚糖的基因表達均顯著上升(P0.05),其中Ⅱ型膠原支架組上述基因表達量最高,與Ⅰ型及Ⅰ/Ⅱ型混合膠原支架組有顯著性差異(P0.05);與對照組比較,Ⅰ型膠原支架組中僅Ⅰ型膠原及聚集蛋白聚糖的蛋白表達上升(P0.05);Ⅰ/Ⅱ型混合及Ⅱ型膠原支架組中SOX9、Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原及聚集蛋白聚糖的蛋白表達有顯著上升(P0.05),其中Ⅱ型膠原支架組上述蛋白表達量最高,且與Ⅰ型及Ⅰ/Ⅱ型混合膠原支架組有顯著性差異(P0.05)。阿爾新藍組織學染色檢測硫酸蛋白聚糖在Ⅱ型膠原支架組表達明顯高于其余各組。結論:Ⅰ型膠原、Ⅰ/Ⅱ型混合膠原、Ⅱ型膠原支架均促進NPMSC的分化,而Ⅱ型膠原支架促進NPMSC成髓核細胞分化作用尤為顯著。Ⅱ型膠原是髓核組織工程學的理想生物支架材料。
【作者單位】： 浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院骨科;浙江省立同德醫(yī)院骨科;
【關鍵詞】： 椎間盤 髓核組織工程學 Ⅱ型膠原 細胞分化
【基金】：國家自然科學基金項目(編號:81171756,81472114)
【分類號】：R318.08
【正文快照】： University,Hangzhou,310009,China隨著社會老齡化的加劇,椎間盤退行性疾病已造成了愈見嚴重的醫(yī)療及經(jīng)濟負擔[1]。既往研究認為髓核退變是椎間盤退變的早期表現(xiàn)及可能的始動因素之一[2]。髓核細胞外基質成分作為潛在的組織工程學材料,其生物學特性逐漸受到關注和研究[3~7]。

【共引文獻】

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【相似文獻】

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本文編號：979751