本文關(guān)鍵詞：人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞與生物材料共混物三維打印體的體內(nèi)成骨

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【摘要】：目的:構(gòu)建人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,h ASCs)-生物材料共混物三維生物打印體,檢測其體內(nèi)成骨能力,初步建立將細(xì)胞共混物三維生物打印技術(shù)應(yīng)用于體內(nèi)成骨的技術(shù)路線。方法:以P4代h ASCs作為種子細(xì)胞,進(jìn)行成骨向誘導(dǎo),并采用堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素紅礦化結(jié)節(jié)染色檢測其成骨向分化的能力。將種子細(xì)胞加入20 g/L海藻酸鈉和80 g/L明膠混合物(細(xì)胞密度約為1×106個/m L),采用Bioplotter三維生物打印機(德國Envision公司)進(jìn)行打印,獲得細(xì)胞-海藻酸鈉-明膠共混物打印體,采用活-死細(xì)胞雙熒光染色法觀察打印體中細(xì)胞存活率,隨后對打印體進(jìn)行1周成骨誘導(dǎo)培養(yǎng),作為實驗組;另打印不含細(xì)胞、只含海藻酸鈉-明膠溶膠的三維打印體作為對照組。將實驗組和對照組打印體植入裸鼠背部皮下,于植入后6周取出樣本,采用蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色、馬松(Masson)三色法染色、免疫組織化學(xué)染色和Inveon微型CT(Micro CT)檢測打印體樣本的成骨情況。結(jié)果:打印體中細(xì)胞存活率達(dá)89%±2%,打印體植入6周后取出,對照組植入打印體大部分發(fā)生降解,形態(tài)不規(guī)則,為無定型凝膠狀,而實驗組打印體基本保持原有大小,質(zhì)地堅韌。HE染色和馬松三色法染色結(jié)果顯示,植入6周后,實驗組打印體中有類骨組織形成,并有血管長入;免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,骨鈣素抗體表達(dá)成陽性;Micro CT結(jié)果顯示,實驗組密度較高,新生骨容積為18%±1%。結(jié)論:h ASCs共混物三維生物打印體可在裸鼠體內(nèi)異位成骨,細(xì)胞共混物三維生物打印技術(shù)應(yīng)用于體內(nèi)成骨的技術(shù)路線是可行的。
【作者單位】： 北京大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院·口腔醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)數(shù)字化研究中心口腔數(shù)字化醫(yī)療技術(shù)和材料國家工程實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 骨生成 打印 三維 間充質(zhì)干細(xì)胞 脂肪組織 生物相容性材料
【基金】：教育部科學(xué)技術(shù)研究項目(113002A)資助~~
【分類號】：R783.1
【正文快照】： 由于齲病、牙周病、外傷、腫瘤等因素造成的頜面部的骨組織缺損,是口腔科醫(yī)師經(jīng)常要面對的難題,骨組織工程技術(shù)的出現(xiàn)為骨缺損的修復(fù)提供了一種應(yīng)用前景廣闊的新選擇。人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,h ASCs)作為成體間充質(zhì)干細(xì)胞的一種,具

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