本文關(guān)鍵詞：一種雙層人工血管支架的構(gòu)建及其生物相容性研究

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【摘要】：在臨床應(yīng)用中,雖然小直徑血管(≤6咖)的需求量較大,但是在小直徑(6mm)血管移植中,很多人工合成的組織工程血管支架的中遠(yuǎn)期效果并不好,常因其在低血流下缺乏內(nèi)膜功能,形成血栓、動(dòng)脈瘤、內(nèi)膜增生而以失敗告終。因此,尋找一種可以長(zhǎng)期維持其在體內(nèi)正常生理功能的組織工程血管支架的制作方法,成了目前小直徑組織工程血管所需解決的一個(gè)重要問(wèn)題,,而天然脫細(xì)胞血管的優(yōu)勢(shì)正是在于,除去細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)具有如下特征：①為支架提供生物力學(xué)性能,并能夠維持一定的強(qiáng)度和特定形狀；②作為一個(gè)可供細(xì)胞增殖和遷移的生物活性支架；③可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的表型及細(xì)胞行為產(chǎn)生調(diào)控；④作為一個(gè)錨定位點(diǎn),為生長(zhǎng)因子及各種酶或蛋白,提供特定的反應(yīng)位點(diǎn)。本課題在實(shí)驗(yàn)室前期制備的RGD-蛛絲蛋白(Recombinant spider silk protein, pNSR32)、聚合物聚己內(nèi)酯(polycaprolactone,PCL)、明膠(Gelatin, Gt)共同制備pNSR32/PCL/Gt小直徑血管支架的基礎(chǔ)上,引入生物相容性良好的天然細(xì)胞外基質(zhì),構(gòu)建的脫細(xì)胞血管-(PCL/Gt/pNSR32)雙層血管支架,以去垢劑處理法,蛋白酶處理法,去垢劑-酶聯(lián)合處理法以及反復(fù)凍融法為基礎(chǔ),分別考察其對(duì)細(xì)胞的去除效果,通過(guò)冰凍切片,然后分別用蘇木精-伊紅染色,DAPI染色,DNA殘留率測(cè)定等方法檢測(cè)其脫細(xì)胞效率。結(jié)合本室已制備的RGD-蛛絲蛋白/PCL/Gt靜電紡絲支架的基礎(chǔ)上,應(yīng)用靜電紡絲技術(shù)制備pNSR32/PCL/Gt(5:85:10)電紡膜,同時(shí),由含有0.25%戊二醛的10mmol/L的醋酸溶液與制備的脫細(xì)胞血管支架交聯(lián),分別交聯(lián)6h、12h、24h(分別命名A、B、C組),構(gòu)成層次明顯,功能明顯的雙層血管支架材料�？紫堵式Y(jié)果顯示交聯(lián)制備的各組支架的孔隙率均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),大于80%,與交聯(lián)時(shí)間呈負(fù)相關(guān)性。同時(shí)支架的接觸角也隨著交聯(lián)時(shí)間的增長(zhǎng)而增大,說(shuō)明其親水性逐漸下降。另外,雙層血管支架的縫合強(qiáng)度也隨著交聯(lián)時(shí)間的增加而增加,但是支架的斷裂伸長(zhǎng)率隨著交聯(lián)時(shí)間的增加而降低。最后對(duì)血液相容性的考察發(fā)現(xiàn)溶血實(shí)驗(yàn)中A組、B組、C組支架的溶血率分別為1.299%、1.818%、3.247%,均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中溶血率小于5%的溶血要求：各實(shí)驗(yàn)組的雙層血管支架的溶血率均低于4%,分別A組、B組、C組為1.299%、1.818%、3.247%,滿足血管組織工程對(duì)于支架材料的溶血要求；復(fù)鈣化凝血時(shí)間A、B兩組更為優(yōu)秀,且組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異, A組支架與B組支架對(duì)于內(nèi)源性凝血途徑的抗凝性能相似,均優(yōu)于C組支架；動(dòng)態(tài)凝血時(shí)間測(cè)定實(shí)驗(yàn)與血小板黏附實(shí)驗(yàn)結(jié)果與前兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)一致。綜上可知,A組支架是三個(gè)實(shí)驗(yàn)組中抗凝血性能最為優(yōu)良的支架。脫細(xì)胞血管支架一(PCL/Gt/RGD-蛛絲蛋白)雙層血管支架的血液相容性隨著戊二醛反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)而下降。總之,脫細(xì)胞血管支架/(PCL/Gt/RGD-蛛絲蛋白)雙層血管支架抗凝血能力優(yōu)異,具有較好的血管組織工程支架應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：雙層血管支架 RGD-蛛絲蛋白 脫細(xì)胞 戊二醛 靜電紡絲 生物相容性
【學(xué)位授予單位】：福建師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R318.11
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-6
• 中文文摘6-11
• 緒論11-19
• 第一章 天然脫細(xì)胞血管支架的制備19-33
• 第一節(jié) 材料、儀器與試劑19-20
• 第二節(jié) 天然脫細(xì)胞血管支架制備方法20-21
• 第三節(jié) 脫細(xì)胞血管支架制備的脫細(xì)胞效果的評(píng)價(jià)21-22
• 第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-29
• 第五節(jié) 討論29-30
• 第六節(jié) 結(jié)論30-33
• 第二章 脫細(xì)胞血管支架-(PCL/Gt/RGD-蛛絲蛋白)雙層血管支架的制備及其理化性能分析33-43
• 第一節(jié) 材料、儀器與試劑33-34
• 第二節(jié) 脫細(xì)胞血管支架/(PCL/Gt/RGD-蛛絲蛋白)雙層血管支架的制備34-36
• 第三節(jié) 雙層血管支架的力學(xué)性能評(píng)價(jià)36
• 第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-40
• 第五節(jié) 討論40-42
• 第六節(jié) 結(jié)論42-43
• 第三章 雙層血管支架的生物相容性分析43-49
• 第一節(jié) 材料與儀器43
• 第二節(jié) 方法43-44
• 第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-46
• 第四節(jié) 討論46-47
• 第五節(jié) 結(jié)論47-49
• 第四章 結(jié)論49-50
• 本論文的創(chuàng)新之處50
• 本課題今后研究設(shè)想50-51
• 附錄51-53
• 參考文獻(xiàn)53-59
• 攻讀學(xué)位期間承擔(dān)的科研任務(wù)與主要成果59-61
• 致謝61-63
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷63-65

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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本文編號(hào)：906238