角膜修復用絲素蛋白復合膜的研究
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【摘要】:絲素蛋白因其具有良好的生物相容性和可控的降解速率,被廣泛應用在組織修復、支架材料、藥物緩釋和傷口敷料等生物醫(yī)藥領(lǐng)域。另外,絲素蛋白具有很強的可塑性,可加工成纖維、凝膠、薄膜、微球等形態(tài)。然而純絲素蛋白膜因為易溶于水、柔韌性差等缺點,在生物醫(yī)學領(lǐng)域的應用受到限制。本課題將親水性小分子吡咯烷酮衍生物或氨基甲酸酯類化合物與絲素蛋白溶液進行復合,制備絲素蛋白復合膜。通過X-射線衍射法研究小分子對于絲素蛋白結(jié)構(gòu)的影響,結(jié)果表明,小分子可以誘導絲素蛋白形成結(jié)晶結(jié)構(gòu),加入量的不同形成結(jié)晶結(jié)構(gòu)的類型也不同。而高分子聚乙烯吡咯烷酮與絲素蛋白相容性差,沒有改善絲素膜的結(jié)構(gòu)和性能。使用酶標儀測試了絲素蛋白復合膜的透光率,結(jié)果顯示,復合膜具有較好的透光性,尤其是氨基甲酸酯/絲素蛋白復合膜,其透光率達到95%以上。對復合膜的溶失率測試發(fā)現(xiàn),小分子誘導形成的復合膜大大降低了絲素蛋白溶失率,使其不溶于水。力學性能的研究結(jié)果表明,吡咯烷酮或氨基甲酸酯的加入大大提高了絲素膜的柔韌性,斷裂強度也達到角膜修復材料的應用要求。采用浸提液法研究了復合膜細胞毒性,結(jié)果表明單體乙烯基吡咯烷酮與絲素蛋白的復合膜具有細胞毒性,其他的吡咯烷酮類與絲素蛋白的復合膜細胞毒性較小,氨基甲酸酯類與絲素蛋白的復合膜沒有細胞毒性,可以用于角膜修復或替代材料。提取兔角膜基質(zhì)細胞,種植于復合膜上,通過體外培養(yǎng),研究了復合膜上兔角膜基質(zhì)細胞的增殖情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn),兔角膜基質(zhì)細胞可以在復合膜上正常生長增殖,吡咯烷酮類復合膜和氨基甲酸脂類復合膜有望成為一種新的角膜修復材料。
【關(guān)鍵詞】:絲素蛋白 復合膜 細胞毒性 細胞相容性 角膜修復
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R318.08;TQ93
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-10
- 第一章 引言10-17
- 1.1 再生家蠶絲素蛋白的組成及結(jié)構(gòu)10-11
- 1.2 絲素蛋白的生物學特性11-12
- 1.3 絲素蛋白材料在角膜組織工程中的應用12-15
- 1.3.1 角膜組織工程的研究進展12-14
- 1.3.2 絲素蛋白材料用于角膜組修復的研究現(xiàn)狀14-15
- 1.4 本文研究的內(nèi)容與目的15-17
- 第二章 吡咯烷酮/絲素蛋白復合膜的研究17-39
- 2.1 材料與儀器17-18
- 2.1.1 實驗材料17-18
- 2.1.2 實驗儀器18
- 2.2 實驗方法18-20
- 2.2.1 絲素溶液的制備18
- 2.2.2 絲素蛋白復合膜的制備18-19
- 2.2.3 絲素蛋白復合膜結(jié)晶結(jié)構(gòu)的測定19
- 2.2.4 絲素蛋白復合膜透光率的測定19
- 2.2.5 絲素蛋白復合膜溶失率的測定19-20
- 2.2.6 絲素蛋白復合膜的力學性能20
- 2.3 結(jié)果與討論20-38
- 2.3.1 復合膜結(jié)晶結(jié)構(gòu)分析20-25
- 2.3.2 絲素蛋白復合膜的透光率25-29
- 2.3.3 絲素蛋白復合膜的含水率29-30
- 2.3.4 絲素蛋白復合膜的溶失率30-32
- 2.3.5 絲素蛋白復合膜的力學性能32-38
- 2.4 本章小結(jié)38-39
- 第三章 乙烯基吡咯烷酮及聚乙烯吡咯烷酮絲素蛋白復合膜的研究39-51
- 3.1 材料與儀器39-40
- 3.1.1 實驗材料39-40
- 3.1.2 實驗儀器40
- 3.2 試驗方法40
- 3.2.1 絲素溶液的制備40
- 3.2.2 絲素蛋白復合膜的制備40
- 3.2.3 絲素蛋白復合膜結(jié)晶結(jié)構(gòu)的測試40
- 3.2.4 絲素蛋白復合膜透光率的測試40
- 3.2.5 絲素蛋白復合膜溶失率的測試40
- 3.2.6 絲素蛋白復合膜力學性能測試40
- 3.3 結(jié)果與討論40-50
- 3.3.1 絲素蛋白復合膜的結(jié)晶結(jié)構(gòu)40-42
- 3.3.2 絲素蛋白復合膜的透光率42-45
- 3.3.3 絲素蛋白復合膜的含水率45
- 3.3.4 絲素蛋白復合膜的溶失率45-48
- 3.3.5 絲素蛋白復合膜的力學性能48-50
- 3.4 本章小結(jié)50-51
- 第四章 氨基甲酸酯/絲素蛋白復合膜的研究51-62
- 4.1 材料與儀器51
- 4.1.1 實驗材料51
- 4.1.2 實驗儀器51
- 4.2 試驗方法51-52
- 4.2.1 絲素溶液的制備51
- 4.2.2 絲素蛋白復合膜的制備51
- 4.2.3 絲素蛋白復合膜結(jié)晶結(jié)構(gòu)的測試51-52
- 4.2.4 絲素蛋白復合膜透光率的測試52
- 4.2.5 絲素蛋白復合膜溶失率的測試52
- 4.2.6 絲素蛋白復合膜力學性能測試52
- 4.3 結(jié)果與討論52-61
- 4.3.1 絲素蛋白復合膜的結(jié)晶結(jié)構(gòu)52-54
- 4.3.2 絲素蛋白復合膜的透光率54-56
- 4.3.3 絲素蛋白復合膜的含水率56-57
- 4.3.4 絲素蛋白復合膜的溶失率57-58
- 4.3.5 絲素蛋白復合膜的力學性能58-61
- 4.4 本章小結(jié)61-62
- 第五章 不同絲素蛋白復合膜的細胞相容性62-72
- 5.1 材料與方法62-65
- 5.1.1 實驗材料62
- 5.1.2 實驗儀器62
- 5.1.3 兔角膜基質(zhì)細胞的提取62-63
- 5.1.4 用于細胞毒性測試的絲素蛋白復合膜的制備63
- 5.1.5 絲素蛋白復合膜浸提液的制備63
- 5.1.6 用于細胞增殖活性測試的絲素蛋白復合膜制備63
- 5.1.7 使用L929細胞對絲素蛋白復合膜進行毒性測試方法63-64
- 5.1.8 絲素蛋白復合膜上角膜基質(zhì)細胞增殖活性的測試64-65
- 5.2 結(jié)果與分析65-71
- 5.2.1 提取的角膜基質(zhì)細胞培養(yǎng)65-66
- 5.2.2 細胞毒性測試結(jié)果分析66-68
- 5.2.3 角膜基質(zhì)細胞在復合膜上的增殖情況68-71
- 5.3 本章小結(jié)71-72
- 第六章 結(jié)語72-74
- 6.1 全文結(jié)論72
- 6.2 本文主要研究成果72-73
- 6.3 今后進一步的研究計劃73-74
- 參考文獻74-80
- 攻讀碩士研究生期間發(fā)表的論文80-82
- 致謝82-83
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