本文關(guān)鍵詞：光誘導(dǎo)SNP的NO釋放及其生物學(xué)應(yīng)用研究

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【摘要】：一氧化氮(NO)作為一種重要的信號分子,在多種生理生化過程包括血壓的控制、神經(jīng)系統(tǒng)的傳輸、免疫響應(yīng)以及細胞凋亡等作用中都發(fā)揮著十分顯著的作用。隨著生物醫(yī)學(xué)和疾病治療方法的發(fā)展,光動力療法已經(jīng)成為繼手術(shù)、放療、化療等傳統(tǒng)方法之后的治療腫瘤的另一種新型的技術(shù)手段。同時,光誘導(dǎo)NO的釋放引起研究者的關(guān)注。開發(fā)適當(dāng)?shù)耐庠葱訬O供體,如何控制NO的定量釋放,如何將NO輸送到特定部位等問題成為亟待解決的重要問題。目前已經(jīng)有多種NO的外源供體被應(yīng)用于臨床。硝普鈉(Na2[Fe(CN)5NO]·2H2O, SNP)就是臨床上常用的一種舒張血管的藥物和NO供予體,對于血壓的調(diào)節(jié)有著十分重要的作用。在本文中,我們通過實驗總結(jié)和分析了光誘導(dǎo)SNP在溶液中NO自由基釋放的動力學(xué)過程,通過電子順磁共振譜(ESR)證實了光誘導(dǎo)SNP的NO釋放；利用NO自由基捕捉技術(shù)測定得到了NO自由基的特征信號；利用NO選擇性電極測定技術(shù)檢測了光激發(fā)SNP釋放NO量的多少,初步獲得了定量調(diào)控NO釋放的基本方法；研究了在光照條件下,SNP與生物大分子DNA之間的相互作用,并分析了其中可能的作用機制；研究了光照條件下,SNP對腫瘤細胞生長的抑制情況,為光誘導(dǎo)SNP細胞生物學(xué)效應(yīng)的分子機制研究和臨床應(yīng)用,提供了新的依據(jù)。本文的內(nèi)容主要由以下五部分構(gòu)成：第一：介紹了近年來有關(guān)光動力療法的研究進展、綜述了國內(nèi)外有關(guān)NO的研究動態(tài)以及SNP的理化性質(zhì)和在生物學(xué)研究中的重要作用意義。第二：利用電子自旋共振技術(shù)(ESR)和NO自由基捕捉技術(shù),證實了光誘導(dǎo)SNP溶液中NO的釋放；利用NO選擇性電極測定方法,定量測定了不同波長的光激發(fā)條件下,SNP在溶液中NO的釋放量,獲得了利用光激發(fā)調(diào)控SNP溶液中NO釋放量的基本方法。第三：通過瓊脂糖凝膠電泳法研究了在光照條件下,SNP對pBR322DNA的切割作用,并分析了其作用機制。第四：利用CCK-8法檢測了不同濃度的SNP在光照和未光照條件下對三種人源腫瘤細胞(Hela、HepG2和MCF-7)生長的抑制作用,為疾病治療新方法的研究提供了新的線索。第五,總結(jié)全文并對下一步工作進行展望。
【關(guān)鍵詞】：硝普鈉 光動力療法 一氧化氮 DNA 細胞
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R454.2
【目錄】：

• 中文摘要8-9
• ABSTRACT9-11
• 第一章 緒論11-17
• 1.1 課題研究目的和意義11
• 1.2 課題研究現(xiàn)狀11-15
• 1.2.1 光動力療法11-12
• 1.2.2 NO的研究現(xiàn)狀12-13
• 1.2.3 硝普鈉的作用及性質(zhì)13-15
• 1.3 本論文主要內(nèi)容和貢獻15-17
• 第二章 光誘導(dǎo)SNP在溶液中NO的釋放17-31
• 2.1 引言17-18
• 2.2 電子自旋共振(ESR)技術(shù)檢測NO18-22
• 2.2.1 電子自旋共振(ESR)技術(shù)基本原理18-19
• 2.2.2 自旋捕集技術(shù)19
• 2.2.3 實驗儀器和試劑19-20
• 2.2.4 ESR波譜測定20
• 2.2.5 結(jié)果與討論20-22
• 2.3 照射光源的構(gòu)建22
• 2.4 SNP的吸收光譜測定22
• 2.4.1 實驗儀器22
• 2.4.2 吸收光譜測定22
• 2.5 NO選擇性電極測定22-29
• 2.5.1 NO選擇性電極測定原理23
• 2.5.2 實驗儀器和試劑23-24
• 2.5.3 主要儀器和軟件介紹24-25
• 2.5.4 NO電極的安裝25
• 2.5.5 NO電極的校準25-26
• 2.5.6 溶液中NO實時測量條件的優(yōu)化26-29
• 2.5.7 討論29
• 2.6 本章總結(jié)29-31
• 第三章 光誘導(dǎo)SNP對DNA的切割作用31-39
• 3.1 引言31-33
• 3.2 瓊脂糖凝膠電泳法33-37
• 3.2.1 實驗原理33-34
• 3.2.2 實驗儀器和試劑34-35
• 3.2.3 實驗過程35
• 3.2.4 實驗結(jié)果及分析35-37
• 3.3 本章總結(jié)37-39
• 第四章 光誘導(dǎo)SNP對腫瘤細胞生長的抑制作用39-51
• 4.1 引言39
• 4.2 檢測方法39-40
• 4.2.1 CCK-8法及原理39
• 4.2.2 CCK-8法的優(yōu)勢39-40
• 4.3 細胞培養(yǎng)實驗40-45
• 4.3.1 實驗儀器和試劑40-41
• 4.3.2 試劑配置41
• 4.3.3 細胞培養(yǎng)41-42
• 4.3.4 CCK-8法檢測SNP對三種細胞生長的影響42
• 4.3.5 實驗結(jié)果及分析42-45
• 4.4 膜片鉗實驗的準備45-49
• 4.4.1 膜片鉗技術(shù)簡介45-46
• 4.4.2 實驗所用材料46
• 4.4.3 溶液的配制46-47
• 4.4.4 實驗操作步驟47-49
• 4.5 本章總結(jié)49-51
• 第五章 總結(jié)與展望51-53
• 參考文獻53-59
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果59-60
• 致謝60-61
• 個人簡況及聯(lián)系方式61-62
• 承諾書62-63

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 錢毅;李建平;;一氧化氮的腫瘤生物學(xué)效應(yīng)[J];中國現(xiàn)代手術(shù)學(xué)雜志;2011年04期

2 彭金娥;潘敬新;;一氧化氮在腫瘤治療中的多重作用[J];腫瘤;2012年01期

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本文編號：894130