玻璃化凍存對兔關節(jié)軟骨細胞存活率及生物學活性的影響
本文關鍵詞:玻璃化凍存對兔關節(jié)軟骨細胞存活率及生物學活性的影響
【摘要】:研究背景:關節(jié)軟骨的低溫保存對同種異體關節(jié)軟骨的移植至關重要,傳統(tǒng)的程序性降溫法及梯度降溫法不僅操作繁瑣,且復蘇后細胞的存活率及其代謝活性不高。玻璃化法是近年來新發(fā)展起來的一種低溫保存技術,目前已經(jīng)成功的保存了血液、胚胎、血管等細胞或組織。國內(nèi)對于關節(jié)軟骨細胞的玻璃化凍存亦初見報道,但是其檢測方法比較簡單,且沒有與傳統(tǒng)的冷凍保存方法相比較,不能有力的說明玻璃化凍存的優(yōu)勢所在。本實驗采用玻璃化凍存法對關節(jié)軟骨細胞進行低溫保存,并與傳統(tǒng)的程序性降溫法及梯度降溫法進行比較。通過比較復蘇后軟骨細胞的存活率、總凋亡率及其合成糖胺多糖的能力,,評價3種不同的低溫保存方法對關節(jié)軟骨細胞存活率及生物學活性的影響。 目的:1.探索玻璃化凍存法對兔關節(jié)軟骨細胞的保存效果;2.比較3種不同的低溫保存方法對兔關節(jié)軟骨細胞存活率及生物學活性的影響。 方法:分別采用玻璃化凍存法、程序性降溫法及梯度降溫法對兔關節(jié)軟骨細胞進行低溫保存,采用流式細胞儀計數(shù)及阿爾新藍染色等方法了解復蘇后軟骨細胞的存活率、凋亡率及其生物學活性。 結(jié)果:采用玻璃化凍存法保存的關節(jié)軟骨細胞存活率約87%,與新鮮未冷凍組相比無顯著性差異(P0.05),但明顯高于程序性降溫法及梯度降溫法(P0.05);玻璃化凍存對軟骨細胞合成糖胺多糖的能力有一定影響,但與新鮮未冷凍組相比,無顯著性差異(P0.05),而程序性降溫組及梯度降溫組細胞合成糖胺多糖的能力均明顯下降,與新鮮未冷凍組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結(jié)論:1.兔關節(jié)軟骨細胞可以通過玻璃化凍存法進行低溫保存,復蘇后其存活率及生物學活性接近于新鮮未冷凍細胞;2.玻璃化凍存對關節(jié)軟骨細胞的保存效果優(yōu)于傳統(tǒng)的程序性降溫法及梯度降溫法。
【關鍵詞】:玻璃化 低溫保存 軟骨細胞 冷凍保護劑 兔
【學位授予單位】:山西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R318.52
【目錄】:
- 摘要5-6
- Abstract6-8
- 中英文縮略詞表8-9
- 前言9-11
- 材料與方法11-15
- 結(jié)果15-17
- 討論17-19
- 結(jié)論19-20
- 參考文獻20-22
- 綜述22-28
- 參考文獻26-28
- 攻讀學位期間發(fā)表文章情況28-29
- 致謝29-30
- 個人簡歷30
【參考文獻】
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本文編號:888282
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