聚氨酯-脫細胞基質(zhì)復(fù)合支架的制備及體內(nèi)外生物相容性研究
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【摘要】:目的構(gòu)建用于膀胱修復(fù)與重建的聚氨酯(polyurethane,PU)-膀胱脫細胞基質(zhì)(bladder acellular matrix,BACM)復(fù)合支架,并對其力學性能和生物相容性進行體內(nèi)外評價。方法取10只雄性新西蘭大白兔膀胱,經(jīng)1%SDS及1%Triton X-100脫細胞處理后,用PU乳液對所得BACM進行表面涂覆,獲得PU-BACM復(fù)合支架;用力學試驗儀測試BACM與PU-BACM支架的拉伸強度及斷裂伸長率。將人膀胱平滑肌細胞(human bladder smooth muscle cells,HBSMC)分別與BACM、PU、PU-BACM支架共培養(yǎng),通過細胞計數(shù)試劑盒8法比較各組材料對細胞增殖的影響。以DMEM培養(yǎng)基制得上述3種材料浸提液,并以DMEM培養(yǎng)基作對照,與HBSMC共培養(yǎng),流式細胞儀測定細胞周期。取12只雄性新西蘭大白兔膀胱剪開5 mm小口,將PU-BACM支架以鎖邊法縫合于膀胱切口部位以建立膀胱損傷修復(fù)模型,術(shù)后10、20、40、60 d取材行HE染色觀察炎性浸潤、材料降解和上皮再生情況。結(jié)果 BACM和PU-BACM的拉伸強度分別為(5.78±0.85)N和(11.88±3.21)N,斷裂伸長率分別為14.46%±3.21%和23.14%±1.32%,差異均有統(tǒng)計學意義(t=3.182,P=0.034;t=4.332,P=0.012)。細胞增殖實驗顯示,體外培養(yǎng)5、7 d后,PU-BACM支架組細胞增殖顯著高于BACM組(P0.05);細胞周期實驗中,對照組及PU、BACM、PU-BACM組的細胞增殖率分別為36.78%±1.21%、30.49%±0.89%、18.92%±0.84%和22.42%±1.55%,PUBACM組顯著高于BACM組(P0.05)。兔膀胱修復(fù)實驗中,術(shù)后10 d移植部位出現(xiàn)單核炎性細胞浸潤情況;20 d炎性反應(yīng)逐漸減弱、材料逐步降解;40 d觀測到上皮再生;60 d移植部位形成與正常組織類似結(jié)構(gòu),修復(fù)基本完成。結(jié)論 PU-BACM復(fù)合支架較BACM力學性能及生物相容性均有顯著提升;在兔膀胱修復(fù)實驗中,復(fù)合支架未導(dǎo)致強烈的免疫反應(yīng),并在移植部位形成新生膀胱組織,可為進一步研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
【作者單位】: 四川大學生命科學學院;四川大學華西醫(yī)院再生醫(yī)學研究中心;四川大學華西醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】: 脫細胞基質(zhì) 聚氨酯 膀胱修復(fù) 組織工程 兔
【基金】:國家自然科學基金青年基金資助項目(51203100) 中國博士后科學基金資助項目(2013M531967)~~
【分類號】:R318.08
【正文快照】: 膀胱癌、結(jié)核性攣縮膀胱、先天性膀胱缺失、創(chuàng)傷及炎癥等,均會引起膀胱組織損傷及功能缺失,用組織工程方法研究開發(fā)膀胱組織替代物,以恢復(fù)、維持或改善其功能,是治療膀胱組織損傷和功能缺失的一個新思路[1-2]。理想的組織工程材料應(yīng)具有與正常膀胱組織相適應(yīng)的機械性能、良好
【參考文獻】
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8 俞s,
本文編號:799093
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